6 - 苄氨基嘌呤微繁殖优化:环糊精单体及聚合物的创新应用

【字体: 时间:2025年04月28日 来源:Carbohydrate Polymers 10.7

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  在植物微繁殖中,6 - 苄氨基嘌呤(BAP)应用受限。研究人员开展以环糊精(CDs)和 CD 基纳米海绵(CD-NS)为载体优化 BAP 的研究。结果显示,复合物提升了 BAP 性能。该研究为生态农业实践奠定基础。

  在农业生产的大舞台上,植物微繁殖技术是培育大量优质种苗的 “魔法棒”,能在短时间内产出众多基因相同的植株。6 - 苄氨基嘌呤(6-Benzylaminopurine,BAP)作为植物生长调节剂中的一员,在微繁殖中起着促进 shoot 增殖的关键作用,就像给植物生长按下了 “加速键”,不仅能提升植物体外繁殖效率,还能改善果蔬品质、增强植物抗逆性。
然而,这根 “魔法棒” 却有它的 “短板”。BAP 水溶性差,就像不溶于水的沙子,在使用时难以均匀分散,往往需要加大剂量才能达到效果,可这又带来了环境污染和动物毒性等问题。同时,它还怕光怕热,稳定性欠佳,在储存和使用过程中容易 “变质”,这些缺点严重限制了它在农业生产中的广泛应用。

为了解决这些棘手的问题,来自国外研究机构的研究人员踏上了探索之旅,开展了一项关于利用环糊精(Cyclodextrins,CDs)单体及其聚合物纳米海绵(CD-based Nanosponges,CD-NS)作为 BAP 递送载体的研究。他们希望通过这种创新的方式,为 BAP 打造一个 “坚固的铠甲”,提升它的性能,让其更好地服务于农业生产。最终,研究取得了令人欣喜的成果,相关论文发表在《Carbohydrate Polymers》上。

这项研究意义非凡。它为解决 BAP 在实际应用中的难题提供了新的思路和方法,通过 CDs 和 CD-NS 与 BAP 形成复合物,显著改善了 BAP 的性能,有望推动农业微繁殖技术的发展,为生态友好型农业生产提供有力支持,助力实现可持续农业发展目标。

在研究过程中,研究人员运用了多种关键技术方法。首先是相溶解度研究,通过该方法测定 BAP 与不同 CDs 形成的包合物的包合常数(KF),以此评估两者之间的结合强度。接着,利用分子对接技术,从理论层面探究 BAP 与 CDs 的相互作用模式。在表征复合物时,采用了热重分析(TGA)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、动态光散射(DLS)等技术,从不同角度分析复合物的结构和性质。最后,借助高效液相色谱 - 质谱联用(HPLC-MS/MS)技术,对植物体内的 BAP 含量进行精确测定。

下面来看看具体的研究结果:

  1. 天然 CD 对 BAP 溶解度的影响:研究人员发现,不同 CDs 均能提高 BAP 的表观溶解度。其中,β-CD 的包合常数(KF)最高(289.50±23.16 M-1),表明它与 BAP 的结合能力最强。通过分子对接模拟发现,β-CD 的内部空腔能更好地适配 BAP,为后续合成基于 β-CD 的聚合物纳米海绵提供了理论依据。
  2. CD 基聚合物纳米海绵的合理合成:基于 β-CD,研究人员合成了两种纳米海绵,即非极性的 βNS-CDI 和阴离子型的 βNS-CA。它们的合成方法绿色环保,且分子比 CD: 交联剂为 1:4。这两种纳米海绵为后续研究 BAP 的包合和递送奠定了物质基础。
  3. BAP 负载 β-CD 和纳米海绵的表征
    • FTIR-ATR 分析:FTIR-ATR 分析结果显示,BAP 与载体形成包合物后,BAP 的特征峰消失或减弱,证明了包合物的形成。这就好比 BAP 穿上了载体的 “外衣”,其原本的结构特征被隐藏起来。
    • TGA 分析:TGA 分析表明,BAP 与载体形成的复合物热稳定性发生了变化,且复合物的热分解温度与物理混合物不同,进一步证实了包合物的形成。这意味着载体的存在改变了 BAP 的热行为,使其在储存和使用过程中更加稳定。
    • DLS 分析:DLS 分析发现,形成包合物后,样品的 Z - 平均粒径增大,表明包合物的形成改变了粒子的大小。同时,通过固体 - NMR 分析,进一步确认了 BAP 被包合在纳米海绵中。这一系列表征结果从不同方面证明了 BAP 与载体成功形成了包合物。

  4. 载体中 BAP 的定量及释放研究:元素分析结果显示,聚合物对 BAP 的包合率高于 β-CD 单体。在透析膜释放实验中,发现不同载体的 BAP 释放速率不同。β-CD 释放较快,βNS-CDI 1:4 在实验后期释放量较高,βNS-CA 1:4 释放最慢。这表明不同载体对 BAP 的释放具有调控作用,可根据实际需求选择合适的载体。
  5. BAP 及负载 BAP 对李子微繁殖的影响:研究发现,添加载体但未负载 BAP 时,对李子植株培养无影响;负载 BAP 后,能提高 BAP 在培养基中的性能。其中,BAP/βNS-CA 处理的 shoot 增殖率最高,且能提高植物生物量,增加植物体内的内源性 BAP 及其核苷形式的含量。这说明载体能使 BAP 更易被植物吸收利用,从而促进植物生长。

研究结论和讨论部分指出,本研究成功证明了将 BAP 与 CDs 和 CD-NS 复合的巨大潜力。这些复合物不仅改善了 BAP 的水溶性、实现了控释、增强了稳定性和生物利用度,还能有效防止 BAP 的热降解,延长其制剂的保质期。在李子体外培养实验中,复合物显著提高了 BAP 的可用性,促进了 shoot 的生长,且植物组织中 BAP 的浓度与生长效果相关。该研究为利用环保型载体改善植物体外微繁殖技术奠定了基础,为生态农业实践提供了新的方向,有望在未来农业生产中发挥重要作用,推动农业可持续发展。

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