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本文聚焦脂质体技术在循环肿瘤生物标志物（CTBs，如循环肿瘤细胞 CTCs、细胞外囊泡 EVs 等）检测中的应用。详细阐述了脂质体结构、制备技术，以及其在捕获和检测各类标志物的应用、挑战与前景，为肿瘤早期诊断和精准治疗提供新思路。
脂质体概述
脂质体是由磷脂等构成的纳米级囊泡，具有独特结构和良好特性。其基本构成单元是磷脂，在特定条件下可自组装成双层膜结构。根据双层膜的层数和大小，脂质体可分为单室囊泡（如小单室囊泡 SUVs、大单室囊泡 LUVs、巨大单室囊泡 GUVs）和多室囊泡（如寡层囊泡 OLVs、大多层囊泡 LMVs、多囊泡） 。
脂质体的制备技术多样，传统的薄膜水化法虽应用广泛，但亲水药物包封率较低。溶剂注射法和逆相蒸发法可提高包封率，此外还有超声、高压均质、超临界流体等后处理方法，以及曲率调制、渗透冲击等新型制备方法，能优化脂质体的结构和性能 。
脂质体在循环肿瘤细胞（CTCs）检测中的应用
CTCs 是存在于外周血中的肿瘤细胞，对肿瘤诊断和治疗意义重大，但因其数量稀少，检测难度较大。脂质体可通过靶向识别来捕获 CTCs，例如设计表皮生长因子受体（EGFR）靶向的免疫磁性脂质体（EILs），能高效捕获结直肠 CTCs，且在检测 KRAS 基因突变方面具有重要价值；利用生物正交点击化学结合杂化 EVs - 脂质体伪装的磁性囊泡，也可实现 CTCs 的富集，检测限低至 10 个 CTCs 。
在 CTCs 检测方面，脂质体检测技术具有优势。如构建免疫磁性微球（IMMS）的多位点脂质体，可准确识别非小细胞肺癌患者血液中的 CTCs，阳性分选率超 90%；基于人参皂苷 Rg3 的脂质体（Rg3 - Lp/DTX）能通过与葡萄糖转运蛋白 1（Glut1）相互作用，高效捕获 CTCs，其对模拟细胞的捕获效率是普通胆固醇脂质体的 2.17 倍 。
脂质体在细胞外囊泡（EVs）检测中的应用
EVs 是细胞分泌的膜囊泡，包含多种生物分子，可作为肿瘤生物标志物。脂质体可用于 EVs 的捕获，如构建聚二乙炔（PDA）脂质体免疫传感器，通过抗原 - 抗体相互作用，利用 PDA 独特的光学性质实现外泌体的检测，检测限为3×108个 /mL；利用尺寸排阻色谱结合荧光检测（SEC - FD）技术，通过脂质体区分小 EVs 与背景的色谱行为，可在不富集的情况下分析 sEVs 。
脂质体在 EVs 检测方面也有应用。在检测 EVs 中的 RNA 时，如利用脂质体介导的膜融合策略转染 CRISPR/Cas13a（MFS - CRISPR）平台，可检测血浆中的 miRNA，能区分乳腺癌患者和健康供体中 miR - 21 的表达差异，检测限低至1.2×103个 /mL；通过在脂质体探针上锚定互补 DNA 标签，可原位检测 EVs 中的 miRNA，能有效消除背景干扰 。在检测 EVs 中的蛋白质时，基于脂质体与功能抗体的结合，如设计抗体功能化的合成囊泡体（FSV）策略，可高效捕获真皮间质液中的 EVs；利用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT） - 核酸适配体 - 脂质体复合物，可通过酶促信号放大检测外泌体 。
脂质体在循环肿瘤蛋白（CTPs）检测中的应用
CTPs 是肿瘤细胞分泌到循环系统中的特定蛋白，是重要的肿瘤标志物，但现有检测方法存在局限性。脂质体可用于蛋白标志物检测，如开发基于生物素化脂质体的免疫环介导等温扩增（LI - LAMP）方法，可检测尿液中的癌症蛋白标志物；利用磁性生物发光纳米脂质体（LBM）技术，可实现蛋白质标志物的快速检测，对甲胎蛋白（AFP）的检测限低至 0.016 ng/mL，优于传统检测方法 。
脂质体还可用于肿瘤特异性酶检测，如基于血清磷脂酶 A2（PLA2）与多种癌症的相关性，设计脂质体探针，通过酶促反应和石墨烯结构增强信号，可检测 PLA2活性，但血清中的芳香代谢物会干扰检测；利用辣根过氧化物酶包封的脂质体（HRP - Ls）构建的等离子体比色生物传感器，可检测肿瘤特异性端粒酶活性，实现可视化和定量检测 。
脂质体在循环肿瘤核酸（ctNAs）检测中的应用
ctNAs 是源自肿瘤细胞的核酸，可反映肿瘤的特征，但检测存在挑战。脂质体可用于 ctNAs 检测，如通过电化学阻抗谱（EIS），利用酶修饰的脂质体和纳米结构的丝网印刷电极，可检测与肿瘤发生密切相关的 miR - 222，检测限为 0.400 pM；利用 SA@Comb - HCR 纳米系统，可检测肝细胞癌相关的端粒酶 RNA（hTR），检测限低至 0.7 pM 。
结论与展望
脂质体凭借其生物相容性、稳定性和靶向性，在肿瘤标志物检测和癌症诊断方面展现出潜力，可实现对低丰度、小尺寸标志物分子的灵敏精确识别。目前，脂质体在肿瘤治疗领域已有多种药物获批，但其在 CTBs 靶向检测方面仍处于小规模或前瞻性替代试验阶段。
未来，需优化脂质体的化学修饰和功能化技术，提高其稳定性和生物相容性，增强检测系统的内源性选择性，评估探针的生物毒性、免疫原性和代谢途径。同时，可开发新型材料，研究环境敏感型脂质体，将脂质体技术与其他分子识别技术结合，构建 “一站式” 检测平台，推动脂质体在临床诊断和治疗中的广泛应用 。
