探秘抗结核新策略：β - 内酰胺酶抑制剂与 β - 内酰胺联合抗耐药结核杆菌的体外研究

为解决耐多药结核杆菌（MDR - TB）治疗难题，研究人员开展了 “比较评估五种 β - 内酰胺酶抑制剂与 β - 内酰胺联合抗耐多药结核杆菌体外活性” 的研究。结果发现替比培南（tebipenem）与瑞来巴坦（relebactam）组合抗菌活性最强，为临床治疗提供新方向。

　　结核病，这个曾经的 “白色瘟疫”，在现代医学的发展下本应逐渐销声匿迹，但耐多药结核杆菌（MDR - TB）的出现却打破了这一美好愿景。MDR - TB 至少对利福平和异烟肼这两种重要的抗结核药物耐药，使得全球结核病防控遭遇重大阻碍。据世界卫生组织（WHO）估计，全球约有 46.5 万利福平耐药结核病患者，其中 78% 为 MDR - TB 患者，可仅有三分之一的患者能得到恰当治疗。更棘手的是广泛耐药结核病（XDR - TB），这类 MDR - TB 对氟喹诺酮类药物以及贝达喹啉和利奈唑胺中至少一种药物也耐药，治疗成功率极低。传统的一线和二线抗结核药物已难以满足耐药结核病的治疗需求，寻找新的有效治疗策略迫在眉睫。

在这样的背景下，河南省疾病预防控制中心的研究人员展开了一项意义重大的研究。他们聚焦于 β - 内酰胺类药物和 β - 内酰胺酶抑制剂联合使用对 MDR - TB 的抗菌活性研究，相关成果发表在《BMC Infectious Diseases》杂志上。

研究人员采用了多种关键技术方法。首先，收集了来自河南省六个市级结核病防控机构培养阳性的 105 株 MDR 临床菌株作为样本队列。然后，运用肉汤稀释法测定 β - 内酰胺类药物单独使用及与 β - 内酰胺酶抑制剂联合使用时对临床 MDR 菌株的最低抑菌浓度（MIC）。此外，通过 PCR 和 DNA 测序分析 blaC、ldt_mt1、dacB2 和 ldt_mt2等基因的突变情况 。

在研究结果方面：

1. β - 内酰胺酶抑制剂最佳抑制浓度的确定：研究人员评估了不同 β - 内酰胺类药物单独使用及在 β - 内酰胺酶抑制剂浓度梯度（1.25、2.5、5 和 10μg/ml）存在时对 5 株 MDR 菌株的 MIC。结果显示，随着抑制剂浓度增加，比阿培南、多立培南和替比培南的 MIC 显著降低，大多数情况下 MIC 降低 4 - 8 倍。5μg/ml 和 10μg/ml 抑制剂浓度组的 β - 内酰胺类药物 MIC 差异不大，因此后续实验选择 5μg/ml 作为抑制剂浓度。
2. MDR 菌株对 β - 内酰胺类药物联合克拉维酸的敏感性：在 6 种 β - 内酰胺类药物中，替比培南对 MDR - TB 菌株抗菌活性最佳，其 MIC₅₀和 MIC₉₀分别为 8μg/ml 和 16μg/ml。添加克拉维酸后，替比培南与之协同作用最佳，对部分菌株 MIC 降低 32 倍或 16 倍 。克拉维酸对亚胺培南 MIC 影响最小，但在与亚胺培南的协同作用上，克拉维酸相较于其他抑制剂效果最好。
3. MDR 菌株对 β - 内酰胺类药物联合他唑巴坦的敏感性：他唑巴坦与 β - 内酰胺类药物联合应用时，在三种传统抑制剂中协同效果最差。不过，替比培南与他唑巴坦联合对 MDR 菌株 MIC 改变显著，联合应用使替比培南对多数 MDR - TB 菌株 MIC 降低超 4 倍。但他唑巴坦对美罗培南和亚胺培南的 MIC 影响较小。
4. MDR 菌株对 β - 内酰胺类药物联合舒巴坦的敏感性：舒巴坦与 6 种 β - 内酰胺类药物中的 4 种（比阿培南、美罗培南、多立培南和替比培南）协同作用良好，能使这些药物的 MIC₅₀降至 8μg/ml 以下。其中，舒巴坦与替比培南协同效果最佳，对部分菌株 MIC 降低 32 倍或 16 倍。
5. MDR 菌株对 β - 内酰胺类药物联合阿维巴坦的敏感性：阿维巴坦与 6 种 β - 内酰胺类药物中的 4 种（比阿培南、美罗培南、多立培南和替比培南）协同作用优于克拉维酸，可使这 4 种药物的 MIC₅₀降至 8μg/ml 以下。阿维巴坦与替比培南联合对 MDR 菌株 MIC 改变显著，对部分菌株 MIC 降低 16 倍或 32 倍。
6. MDR 菌株对 β - 内酰胺类药物联合瑞来巴坦的敏感性：瑞来巴坦与替比培南协同作用最佳，使替比培南的 MIC₅₀和 MIC₉₀均降低 16 倍，对部分菌株 MIC 降低 32 倍或 16 倍。瑞来巴坦与多立培南和比阿培南也有良好协同作用。
7. β - 内酰胺酶抑制剂与 6 种 β - 内酰胺类药物协同作用的比较：传统抑制剂中，克拉维酸对亚胺培南 MIC 降低作用最大；舒巴坦与比阿培南、美罗培南联合时，协同效果优于其他组合。新型抑制剂阿维巴坦和瑞来巴坦中，瑞来巴坦与多数 β - 内酰胺类药物协同效果显著，尤其是与替比培南组合，展现出很强的抗菌活性。
8. 协同作用与 BlaC 基因突变的相关性研究：13.33%（14/105）的分离株存在 blaC 基因突变，主要有 AGT333AGG、AAC638ACC 和 ATC786ATT 三种突变类型。其中，Asn213Thr 和 Ser111Arg 突变可增强美罗培南与克拉维酸、舒巴坦联合用药的协同作用。

综合研究结论和讨论部分，该研究表明替比培南和瑞来巴坦联合对 MDR - M. tuberculosis 抗菌活性最高。瑞来巴坦可口服，在门诊管理和患者依从性方面具有优势。同时，研究还发现 BlaC 蛋白中某些位点的突变会影响药物协同作用。不过，研究也存在局限性，如 β - 内酰胺类抗生素治疗结核病的疗效可能有限，且本研究未进行体内实验和临床试验。但总体而言，该研究为开发新型抗结核治疗方案提供了重要依据，为解决耐药结核病治疗难题带来了新的希望 。