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晚期早产胎膜早破（PPROM）伴宫内炎症（IAI）是早产的重要原因。目前 IAI 诊断标准存在争议，为此研究人员检测羊水蛋白并与 IL-6 浓度关联分析。结果显示，羊水 IL-6＞10000pg/mL 时多数蛋白改变，该值或可作为诊断 IAI 的合适临界值，有助于优化临床决策。
在妇产科领域，早产一直是困扰医学界的一大难题。晚期早产胎膜早破（PPROM），指的是怀孕 34 - 37 周期间胎膜过早破裂并伴有羊水流出的情况，它在所有早产分娩中占比高达三分之一，其中晚期 PPROM 又占 PPROM 病例的一半以上 。虽然这类妊娠接近足月，但新生儿发病率却显著高于足月妊娠，宝宝出生后往往需要更多的复苏抢救、呼吸和营养支持，母乳喂养的成功率也更低。
宫内炎症（IAI）是导致 PPROM 不良结局的重要因素，它与新生儿败血症等疾病风险增加密切相关。目前，羊水白细胞介素 - 6（IL-6）常被用作 IAI 的关键诊断指标，但现有诊断临界值存在争议。传统酶联免疫吸附测定（ELISA）法确定的羊水 IL-6 诊断 IAI 的临界值在 2600 - 11300pg/mL 之间波动，而电化学发光免疫分析法（ECLIA）的临界值为 3000pg/mL 。这些临界值大多是基于羊水培养结果或与细菌感染的关联确定的，然而在部分 PPROM 病例中，羊水 IL-6 升高却检测不到细菌，而且 IL-6 浓度在 PPROM 中差异极大，从几百到数万 pg/mL 不等。此外，羊水 IL-6 浓度从未与其他促炎蛋白的整体反应相关联，这使得 IAI 的诊断和分层缺乏精准性。
为了解决这些问题，来自捷克共和国 Hradec Kralove 大学医院等机构的研究人员开展了一项研究。他们的研究成果发表在《Scientific Reports》上，为 IAI 的诊断提供了新的思路和依据。
研究人员采用了多种关键技术方法。首先，他们建立了一个包含 60 名 PPROM 孕妇的横断面队列，这些孕妇年龄≥18 岁，均为单胎妊娠，且孕周在 34 + 0 到 36 + 6 周之间 。研究人员通过超声引导经腹羊膜穿刺术获取羊水样本，使用 ECLIA 法测定羊水 IL-6 浓度，该方法可检测的浓度范围为 1.5 - 5000pg/mL，样本稀释 10 倍后可扩展至 50000pg/mL 。同时，利用二维液相色谱 - 串联质谱（2D LC-MS/MS）技术对羊水蛋白质进行全面分析，可一次运行识别数千种蛋白质 。之后，运用 MaxQuant 和 Perseus 软件对质谱数据进行处理和统计分析，并通过 ELISA 对选定的蛋白质进行靶向定量验证。
在研究结果方面：
- 样本分组及临床特征：根据羊水 IL-6 浓度，研究人员将 60 例羊水样本分为 5 组，分别为 0 - 1000pg/mL、1000 - 2500pg/mL、2500 - 5000pg/mL、5000 - 10000pg/mL 和高于 10000pg/mL。通过比较发现，只有从 PPROM 到分娩的潜伏期在各组间存在显著差异，其他临床特征如孕妇年龄、孕周、分娩方式等在各组间均无显著差异。同时，随着 IL-6 浓度升高，孕妇血液中 C 反应蛋白（CRP）和白细胞计数（WBC）虽有升高趋势，但差异无统计学意义；组织学绒毛膜羊膜炎（HCA）、脐带炎的发生率以及羊膜腔微生物入侵（MIAC）的发生率在各组间也无显著差异。
- 羊水蛋白质组分析：运用 2D TMT LC-MS/MS 技术，研究人员在所有样本中成功定量了 925 种蛋白质。差异表达分析显示，与其他组相比，有 378 种蛋白质在一个或多个定义组中表达显著改变 。进一步研究发现，在 IL-6 浓度达到 5000pg/mL 时，羊水蛋白质水平无显著差异；而当 IL-6 浓度高于 10000pg/mL 时，羊水蛋白质组的差异才明显显现。基因本体富集分析表明，IL-6 上调与胶原蛋白和细胞外基质蛋白的下调相关，同时细胞代谢过程和核小体蛋白上调。
- 关键蛋白质验证及临界值确定：基于 LC-MS/MS 分析结果，研究人员选择了基质金属蛋白酶 8（MMP8）、髓过氧化物酶（MPO）、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（LCN2）和蛋白质 S100 - A12（S100A12）这 4 种蛋白质进行进一步验证 。ELISA 检测结果显示，这 4 种蛋白质的浓度在 IL-6 浓度高于 10000pg/mL 的组中显著改变，其中 MMP8 在 IL-6 浓度为 5000 - 10000pg/mL 时也出现了上调 。通过绘制受试者工作特征曲线（ROC），研究人员确定 IL-6 浓度为 10000pg/mL 时，对识别羊水促炎蛋白组的上调具有良好的判别能力，其曲线下面积（AUC）证实了这一点。
研究结论和讨论部分表明，本研究首次全面地将羊水 IL-6 浓度与羊水促炎蛋白的整体变化相关联。研究发现，传统的羊水 IL-6 诊断 IAI 的临界值可能并不准确，10000pg/mL 或许是更合适的临界值，这一数值能更好地反映羊水蛋白质组的变化，从而更精准地诊断 IAI 。这一发现对于临床决策具有重要意义，有助于识别那些能从积极干预和早期分娩中获益的晚期 PPROM 病例，进而降低新生儿败血症和其他并发症的发生风险。
然而，该研究也存在一定的局限性。研究仅局限于 34 - 37 周的晚期 PPROM 病例，未涉及其他孕周；ECLIA 检测方法虽具有临床优势，但并非所有实验室都具备；研究队列中 MIAC 的比例高于正常人群，可能会对结果产生一定影响 。未来研究需要进一步扩大样本范围，探索其他孕周的情况，并对非侵入性生物材料如母体血清和宫颈液进行研究，将其中的 IL-6 水平及其他蛋白质水平与羊水进行关联分析，以完善 IAI 的诊断标准，为临床提供更精准的指导。
