实时定量 PCR(qPCR):非侵入式监测普通章鱼寄生虫负荷,助力福利提升

【字体: 时间:2025年04月29日 来源:Aquaculture 3.9

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  为解决普通章鱼养殖中 Aggregata octopiana 寄生虫检测难题,研究人员开展基于粪便样本 qPCR 检测寄生虫负荷的研究。结果显示该方法快速、可靠且非侵入性,还建立了感染程度参考系统,对保障章鱼福利和养殖可持续发展意义重大。

  在神秘的海洋世界里,普通章鱼(Octopus vulgaris)以其独特的技能吸引着众多目光。它们凭借先进的运动能力在水中灵活穿梭,利用神奇的变色本领巧妙伪装,拥有敏锐的视觉洞察周围环境,复杂的神经系统更是赋予它们学习的能力。正因如此,普通章鱼不仅成为科研领域的热门模型,在美食界也备受青睐,是水产养殖的潜力之星。
然而,随着章鱼养殖规模的扩大,一系列问题接踵而至。在众多威胁章鱼健康的因素中,Aggregata octopiana 寄生虫格外棘手。这种寄生虫寄生在章鱼的胃肠道,严重影响其健康。在自然环境中,寄生虫与章鱼尚能维持微妙的平衡,但在人工养殖环境下,这种平衡极易被打破。一旦章鱼感染,就可能出现炎症、消化上皮细胞肥大、溃疡等症状,严重时器官结构解体,引发吸收不良综合征,不仅阻碍章鱼生长,还会降低其商业价值,让养殖户们头疼不已。

此前,检测这种寄生虫主要依靠组织学研究方法,不仅操作繁琐,需要专业人员仔细甄别,还会损害章鱼的身体完整性,不符合动物福利理念。因此,开发一种快速、简单且可靠的非侵入性检测方法迫在眉睫。

来自西班牙 IIM - CSIC(Instituto de Investigacións Mari?as - Consejo Superior de Investigaciones Científicas)的研究人员勇挑重担,开启了这场探索之旅。他们致力于开发一种基于粪便样本的非侵入性检测方法,利用实时定量 PCR(qPCR)技术来检测和量化 Aggregata octopiana 寄生虫负荷。经过不懈努力,研究取得了丰硕成果。他们成功建立了一种快速、高度特异性和灵敏的诊断方法,通过分析粪便样本,能够准确识别和量化寄生虫负荷。同时,还制定了感染程度(低、中、高)的参考值,这一成果对保障章鱼福利、推动可持续水产养殖发展意义非凡。该研究成果发表在《Aquaculture》杂志上。

在研究过程中,研究人员主要采用了以下关键技术方法:首先,从西班牙维哥湾(Ría de Vigo)采集了 9 只普通章鱼样本(6 只雌性,3 只雄性)。然后,通过光学显微镜对粪便样本进行研究,识别并计数 Aggregata octopiana 的孢子囊。最重要的是,运用绝对 qPCR 技术,构建 18S A. octopiana DNA 质粒的标准曲线,以此确定寄生虫的拷贝数。

下面来看具体的研究结果:

  • 样本采集与准备:研究人员从西班牙维哥湾采集了 9 只平均体重 1kg 的普通章鱼样本,将其运至实验水族馆设施,为后续研究提供了样本基础。
  • 显微镜观察结果:通过光学显微镜对粪便涂片进行观察,成功识别出 A. octopiana 的孢子囊。这些孢子囊呈球形,直径 11 - 15μm,内部可见子孢子,且不同样本的孢子囊计数在 1 sporocyst/mg(样本 S22 和 S23)至 215 sporocysts/mg(样本 S33)之间。
  • qPCR 检测结果:利用绝对 qPCR 技术构建标准曲线,实现了对 A. octopiana DNA 拷贝数的准确测定,为量化寄生虫负荷提供了有力依据。

研究结论表明,通过绝对 qPCR 分析粪便样本,能够快速、准确地识别和量化感染普通章鱼消化道的球虫 A. octopiana 负荷,并建立了感染程度参考值。这一非侵入性检测工具易于重复操作,可作为监测章鱼健康和福利状况的有效手段。

从讨论部分来看,随着水产养殖规模的不断扩大,动物福利愈发受到关注。该研究的成果不仅为章鱼养殖提供了实用的寄生虫检测方法,还有助于推动可持续水产养殖的发展,在保障动物健康、提升养殖产品质量等方面都有着不可忽视的价值。它让养殖户能够及时发现寄生虫感染情况,采取相应措施,减少经济损失;也为科研人员深入研究章鱼健康和疾病防控提供了新的途径,在生命科学和健康医学领域具有重要的参考意义。

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