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恶性脑膜瘤（MM）治疗困难，免疫疗法或为其带来希望。研究人员评估高度纯化的人源诱导自然杀伤细胞（GiNKs）对 MM 的抗肿瘤作用，发现 GiNKs 可促进 MM 细胞凋亡，延长小鼠生存期。该研究为 MM 治疗提供新方向。
在医学领域，肿瘤一直是威胁人类健康的重大难题，尤其是恶性脑膜瘤（MM），它是一种极具侵袭性的肿瘤，即便进行了全切除手术（Gross Total Resection，GTR），仍有较高的复发率，严重威胁患者生命。传统的治疗手段，如手术和放疗，对 MM 的疗效有限，因此，迫切需要探索新的治疗策略。免疫疗法的出现，为攻克 MM 带来了新的希望。它通过激活人体自身免疫系统来对抗肿瘤，具有独特的优势。在此背景下，来自 Nara Medical University 的研究人员开展了一项关于免疫疗法的研究，旨在探究高度纯化的人源诱导自然杀伤细胞（GiNKs）对 MM 的抗肿瘤效果。该研究成果发表在《Biomedicine 》杂志上，为 MM 的治疗开辟了新的道路。
研究人员在开展此项研究时，运用了多种关键技术方法。在细胞实验方面，使用 xCELLigence 实时细胞分析（RTCA）系统检测细胞生长抑制情况；通过流式细胞术，利用 APC - 共轭膜联蛋白 V（Annexin V）和 PE - 共轭小鼠抗人 CD45 进行二维（2D）单层细胞凋亡检测以及三维（3D）球体细胞凋亡检测；借助荧光显微镜，进行基于羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（CFSE）的细胞毒性检测。在动物实验方面，构建了原位异种移植小鼠模型，将 MM 细胞植入小鼠大脑，随后给予不同处理，观察小鼠生存情况。此外，还运用了 RNA 测序（RNA - seq）分析肿瘤细胞基因表达变化，以及蛋白质免疫印迹（Western blot）分析蛋白表达水平。
下面来看具体的研究结果。在体外实验中，通过 RTCA 系统研究发现，GiNKs 对 IOMM - Lee 和 HKBMM 细胞的生长具有显著抑制作用，且这种抑制作用呈现出剂量和时间依赖性。2D 单层细胞凋亡检测显示，GiNKs 能够诱导 IOMM - Lee 和 HKBMM 细胞凋亡，与对照组相比，差异具有高度统计学意义（p＜0.0001）。在 3D 球体实验中，荧光显微镜观察和流式细胞术检测均表明，GiNKs 能在 24 小时内诱导 MM 球体中的细胞死亡和凋亡，凋亡程度同样与共培养的 GiNKs 数量相关（p＜0.0001）。
在体内实验中，研究人员构建了原位异种移植小鼠模型，将 IOMM - Lee 或 HKBMM 细胞植入 NOG 小鼠大脑，然后在植入后第四天经颅内输注 GiNKs。结果发现，接受 GiNKs 治疗的小鼠（GiNK 组）生存时间明显长于仅接受载体 HBSS 治疗的对照组（IOMM - Lee 模型：p = 0.0045；HKBMM 模型：p = 0.0053）。同时，GiNK 组小鼠体重下降幅度小于对照组，这表明 GiNKs 不仅具有抗肿瘤作用，还对小鼠的整体健康有益。
在机制研究方面，研究人员对小鼠颅内肿瘤进行 RNA - seq 分析和 Western blot 分析。RNA - seq 数据显示，与对照组相比，GiNK 组中多种与氧化磷酸化（OXPHOS）系统相关的线粒体基因，如MT - ND1、MT - RNR2等显著下调（p＜0.0001）。Western blot 分析进一步验证了MT - ND1和MT - RNR2蛋白表达的变化，在 IOMM - Lee 细胞中，两者的表达均显著受到抑制（MT - ND1：p = 0.0035；MT - RNR2：p = 0.038），在 HKBMM 细胞中也呈现出下调趋势。此外，研究人员还评估了与 NK 细胞免疫相关的激活和抑制配体编码基因的表达，发现对照组和 GiNK 组之间无显著差异。
综合上述研究结果和讨论，本研究具有重要意义。研究表明，GiNKs 能够通过下调线粒体相关基因，抑制 OXPHOS 系统，从而诱导 MM 细胞凋亡，发挥强大的抗肿瘤作用。这为 MM 的治疗提供了一种新的免疫治疗策略，即通过局部免疫疗法，将扩增和激活的 GiNKs 直接注入大脑，有望改善 MM 患者的治疗效果。尽管该研究存在一些局限性，如使用健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMCs）诱导 GiNKs 可能不适用于 MM 患者、动物模型与临床实际存在差异、缺乏深入的毒性评估以及未对线粒体动力学变化进行详细分析等，但这并不影响其为后续研究和临床实践提供重要的参考和方向。未来研究可针对这些不足展开，进一步探索 GiNKs 在 MM 治疗中的潜力，为攻克恶性脑膜瘤这一难题带来更多希望。
