无酶扩增增强的比率荧光法:高灵敏检测急性心肌梗死生物标志物的新突破

【字体: 时间:2025年04月29日 来源:Biosensors and Bioelectronics 10.7

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  急性心肌梗死危害大,早期诊断至关重要,现有检测方法存在局限。研究人员构建非酶比率荧光生物传感平台检测 cTnI。该平台灵敏度高,为急性心血管事件诊断、医疗监测等提供新框架。

  在医学领域,急性心肌梗死(AMI)如同潜藏在人体中的 “定时炸弹”,时刻威胁着人们的生命健康。AMI 是由冠状动脉急性持续性缺血缺氧导致的心肌坏死,患者常伴有急性胸痛,还可能出现心律失常、心力衰竭、休克等症状,出院后 90 天内死亡率和再入院风险高,已然成为严峻的公共卫生问题。目前,临床诊断 AMI 常依赖心电图(ECG),然而这种方法存在明显缺陷。它需要大型仪器,且仅考虑人体表面电特性,在心肌损伤早期,心电图可能无异常表现,误诊率较高。
大量研究表明,当心脏组织因缺氧出现炎症或损伤时,血液中心脏生物标志物浓度会发生变化,检测这些标志物浓度有助于判断 AMI 风险。其中,心肌肌钙蛋白 I(cTnI)与心肌损伤阶段密切相关,对判断心肌状态具有高度特异性,是诊断和排除 AMI 的首选血清生物标志物 。因此,准确检测生物体液(如血液、唾液、间质液)中的 cTnI 浓度,对疾病的早期诊断、治疗和医学预后意义重大。

虽然生物分析技术不断发展,多种分析技术已应用于蛋白质生物标志物检测,但实际应用中仍困难重重。例如,三明治免疫分析、表面增强拉曼光谱、分子免疫印迹等技术,操作繁琐,需多次洗涤,不适合大规模生产。近年来,基于 DNA 探针的比率荧光分析方法兴起,不过现有的 cTnI 比率荧光传感技术问题不少。多数比率探针结构复杂,合成步骤多,限制大规模生产;分析灵敏度有限,信号响应模式依赖 “一对一” 关系,难以满足临床需求;核酸酶消化和非特异性蛋白结合易产生假阳性信号;复杂设计、合成、光漂白及高成本等因素,也阻碍了其实际应用。

为解决这些难题,来自未知研究机构的研究人员开展了一项重要研究,相关成果发表在《Biosensors and Bioelectronics》杂志上。研究人员构建了一个非酶比率荧光生物传感平台,利用动态核酸循环和链置换的协同效应,实现对 cTnI 的高灵敏检测。

研究人员采用的主要关键技术方法有:一是利用链置换和核酸链循环原理,设计特异性核酸探针 X;二是运用比率荧光检测法,通过双发射通道校正系统误差;三是借助空间位阻修饰和能垒优化开发自驱动分子开关,确保检测灵敏度。

在研究结果部分:

  • 比率荧光检测机制:该检测系统通过适配体特异性识别和协同链置换反应的双响应机制,实现对 cTnI 的超灵敏检测。核心设计包含两个级联分子响应模块,即适配体介导的靶标识别和竞争释放,以及通过链置换反应对初始靶标识别事件进行指数级放大。
  • 检测性能:实验显示,该方法对实际血清样本中的 cTnI 检测灵敏度高达 0.001 ng/mL,线性检测范围为 0.001 ng/mL - 1000 ng/mL,展现出高灵敏度和宽线性检测范围的优势。
  • 模拟分析:通过精确模拟计算和多维表征分析,记录模拟过程的快照,揭示了模拟过程中系统能量的变化情况。

研究结论表明,该研究巧妙结合无酶扩增技术和核酸链循环,实现了超加和效应,显著提高了光传感器的灵敏度。该传感器在针对 cTnI 的荧光检测中,展现出卓越的空间特异性和高灵敏度。此研究具有重要意义:构建了全新的分子检测框架,有望用于急性心血管事件的快速床边诊断、战场医疗监测和院前急救决策,为相关领域的发展提供了新方向和新方法,推动了生命科学和健康医学领域在心血管疾病检测方面的进步 。

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