首次揭秘鸡肠库特菌(Kurthia intestinigallinarum)全基因组序列,探索微生物奥秘与潜在价值

【字体: 时间:2025年04月29日 来源:Microbiology Resource Announcements 0.7

编辑推荐:

  为深入探究 Kurthia 属细菌的生理作用,研究人员开展了对鸡肠库特菌(K. intestinigallinarum)全基因组的研究。从鹿口腔分离出该菌并测序,得到完整基因组序列,这为研究宿主 - 微生物相互作用及细菌生理功能提供了重要依据。

  鸡肠库特菌(Kurthia intestinigallinarum)是从鹿口腔中分离出来的。在本研究中,科研人员报告了鸡肠库特菌的完整基因组序列,这是该物种的首个完整基因组报告。
Kurthia 属是一类需氧的革兰氏阳性菌,能从土壤、肉类和粪便中分离得到。部分 Kurthia 属物种与肉类腐败有关,还可能具有致病潜力,但它们的生理作用在很大程度上尚未被探索。此前已报道过鸡肠库特菌的草图基因组(DDBJ/GenBank 组装编号:GCA_019114605.1) ,该细菌最初是从鸡肠道分离得到的。

研究人员从日本鹿(Cervus nippon)的口腔中采集细菌样本。用无菌接种环擦拭鹿的口腔前庭,然后将样本涂抹在 TGY(胰蛋白胨葡萄糖酵母提取物)琼脂平板上。平板在室温(25℃)下培养 2 天,待菌落形成后,置于 4℃保存。

将保存的细胞接种到 5mL TGY 培养基(0.5% 胰蛋白胨、0.1% 葡萄糖、0.5% 酵母提取物和 0.1% KH2PO4)中,在 30℃下培养过夜。取 1mL 培养液离心收集菌体,使用 Wizard 基因组 DNA 纯化试剂盒(Promega)提取基因组 DNA。对于长读长测序,用 Native Barcoding Kit(SQK - NBD114.24,牛津纳米孔技术公司)制备文库,并在配备 Flow Cell(R10.4.1,FLO - MIN114)的 MinION Mk1B 测序仪上进行测序。使用 Dorado 软件(v0.7.2,牛津纳米孔技术公司)以超高精度(SUP)模式进行碱基识别和接头修剪。对于短读长测序,用 Nextera XT 试剂盒(Illumina)制备用于 Illumina 双端测序(2×300bp)的样本文库。利用 Illumina MiSeq 测序仪和 MiSeq Reagent Kit v3 600 循环对样本进行测序。MinION 测序产生了 145353 条读长,平均长度为 7515.6bp,N50 为 16855bp。MiSeq 测序产生了 1688664 对短读长,平均长度为 247bp。研究人员使用 Unicycler(ver. 0.5.1) 、SPAdes(ver. 4.0.0)和 Racon(ver. 1.3.3)对长短读长进行混合从头组装,基因组覆盖度达到 390×。除特殊说明外,均使用默认参数。

使用 DDBJ 快速注释和提交工具(DFAST)和类型(菌株)基因组服务器(TYGS)进行注释。组装得到的基因组 GC 含量较低(39.0%),总长度为 3855051bp,分布在 7 条序列上,包含 3774 个编码区域。Unicycler 软件确认了基因组的环状结构。DFAST 鉴定该菌株为鸡肠库特菌(基因组分类数据库登录号:GCA_019114605.1),平均核苷酸同一性(ANI)为 98.79%。TYGS 分析也证实了这一鉴定结果,数字 DNA - DNA 杂交(dDDH,d4)值为 89.8%。

根据之前的标准,分离菌株的 DNA 可分为 1 条染色体、3 条大质粒和 3 条质粒 。BUSCO 分析(数据库:bacteria_obd10)表明只有染色体包含核心基因,且完整性为 100%。

鸡肠库特菌作为天然的多质粒携带细菌具有重要研究价值。携带某些质粒可能有助于宿主适应特定环境。此外,该菌存在于口腔和肠道环境中,其基因组序列有助于研究宿主 - 微生物相互作用,为分析其生理功能提供了有力支持。

相关新闻
生物通微信公众号
微信
新浪微博
  • 急聘职位
  • 高薪职位

知名企业招聘

热点排行

    今日动态 | 人才市场 | 新技术专栏 | 中国科学人 | 云展台 | BioHot | 云讲堂直播 | 会展中心 | 特价专栏 | 技术快讯 | 免费试用

    版权所有 生物通

    Copyright© eBiotrade.com, All Rights Reserved

    联系信箱:

    粤ICP备09063491号