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炎症性肠病（IBD）中肠道上皮屏障功能障碍机制不明。研究人员探究 TSG-6 对肠道上皮屏障的调节作用。发现外源性 TSG-6 可缓解 DSS 诱导的小鼠结肠炎，通过结合 Pou2f3 促进簇绒细胞分化。为 IBD 治疗提供新方向。
在健康的肠道中，肠道上皮屏障就像一道坚固的城墙，守护着人体免受外界病菌的侵害。然而，炎症性肠病（Inflammatory Bowel Disease，IBD）的出现打破了这一平衡。IBD 包括溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis，UC）和克罗恩病（Crohn’s Disease，CD），全球发病率不断上升，给患者带来极大痛苦，也给医疗系统造成沉重负担。尽管科研人员多年来不断探索，但 IBD 的病因仍不明确，现有的治疗手段在诊断准确性和治疗效果上都存在局限。其中，肠道上皮屏障功能障碍是 IBD 的一个重要特征，可现有研究却没能清晰揭示其背后的机制。在这样的背景下，探索新的治疗方法迫在眉睫。
为了解开这些谜题，浙江癌症医院和河北医科大学第二医院的研究人员开展了相关研究。他们把目光聚焦在肿瘤坏死因子 α 刺激基因 6（Tumor Necrosis Factor α Stimulated Gene 6，TSG-6）上。此前研究虽表明 TSG-6 能缓解肠道炎症和黏膜损伤，但其具体作用机制和靶点却不为人知。此次研究意义重大，若能明确 TSG-6 的作用机制，将为 IBD 治疗开辟新的道路。该研究成果发表在《Molecular Medicine》上。
研究人员为开展此项研究，用到了多种关键技术方法。首先构建了 IBD 小鼠模型，用葡聚糖硫酸钠（Dextran Sodium Sulfate，DSS）诱导小鼠患结肠炎，同时设置不同处理组，观察 TSG-6 的治疗效果。采用蛋白质组学分析肠道样本，探索 TSG-6 的作用机制和治疗靶点。利用分子对接、免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation，Co-IP）和免疫荧光共定位等技术，确定分子间的相互作用 。此外，还收集了人类结肠活检样本，为研究提供更全面的数据支持。
研究结果如下：
- TSG-6 缓解 DSS 诱导的小鼠结肠炎症状：通过构建小鼠模型并分组处理，观察发现 TSG-6 能剂量依赖性地减轻小鼠结肠炎症状。接受高剂量 TSG-6（200 μg/kg）治疗的小鼠，便血情况明显改善，体重下降得到缓解，结肠长度增加，疾病活动指数（DAI）评分降低，结肠组织的炎症细胞浸润减少，隐窝结构得到保护。
- TSG-6 降低炎症细胞因子表达和 MPO 水平：研究人员进行免疫组化和活性检测，发现 TSG-6 能减少中性粒细胞浸润，降低髓过氧化物酶（Myeloperoxidase，MPO）活性。同时，细胞因子 qPCR 芯片分析显示，高剂量 TSG-6 可上调白血病抑制因子（Leukemia Inhibitory Factor，LIF）、IL-4、IL-10 和转化生长因子 -β（Transforming Growth Factor-β，TGF-β）等抗炎因子水平，抑制趋化因子配体 1（Chemokine Ligand 1，CXCL1）、IL-6 和干扰素 -γ（Interferon-γ，IFN-γ）等促炎标志物表达。
- TSG-6 逆转结肠炎小鼠的上皮屏障损伤：利用 FITC-D 检测肠道通透性、透射电镜（Transmission Electron Microscopy，TEM）观察肠道超微结构、PAS 染色检测杯状细胞数量、免疫组化检测增殖标记物 Ki-67 表达以及免疫荧光检测紧密连接蛋白表达，结果表明 TSG-6 可降低肠道通透性，改善微绒毛和紧密连接结构，增加杯状细胞数量和 Ki-67 阳性细胞数量，上调紧密连接蛋白 Zo-1、Occludin 和 Claudin-1 的表达，从而修复肠道上皮屏障。
- TSG-6 对结肠组织蛋白质组的影响：对肠道样本进行无标记定量蛋白质组学分析，发现 5823 种蛋白质中有 411 种表达存在显著差异。基因本体（Gene Ontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）分析显示，TSG-6 可能通过调节细胞周期、细胞连接和炎症反应相关的靶因子，促进肠道上皮屏障完整性。
- TSG-6 可直接结合 Pou2f3 并上调其表达：通过转录因子注释、蛋白质免疫印迹（Western blot）、分子对接、免疫共沉淀和免疫荧光共定位等实验，证实 TSG-6 能直接与 Pou 类 2 同源盒 3（Pou class 2 homeobox 3，Pou2f3）结合并上调其表达。
- TSG-6 挽救结肠炎中 Dclk1 的抑制并增强 IL-25 的产生：研究人员对 UC 患者和健康对照者的结肠黏膜样本进行检测，发现 UC 患者结肠黏膜中簇绒细胞标记物 Dclk-1 表达降低，而 TSG-6 治疗可增加 Dclk-1 阳性簇绒细胞数量，提高肠道 IL-25 表达水平。
研究结论和讨论部分指出，TSG-6 通过与 Pou2f3 直接相互作用并上调其表达，促进结肠簇绒细胞的增殖和分化，增加肠道 IL-25 含量，从而维持肠道屏障完整性，减轻结肠炎症。这一研究不仅揭示了 TSG-6 修复肠黏膜的治疗机制，还为 IBD 的预防和治疗提供了新的策略和方向。不过研究也存在一些局限性，如调节 Pou2f3 表达的精确机制尚未明确，蛋白质组学发现的候选通路还需进一步功能验证等。未来研究可针对这些问题，通过谱系追踪研究和微生物代谢物分析等方法深入探索，有望为 IBD 治疗带来更多突破。
