USP22通过稳定PPARγ增强巨噬细胞胞葬作用并改善动脉粥样硬化斑块稳定性

为解决动脉粥样硬化中巨噬细胞胞葬作用（efferocytosis）受损和斑块不稳定的问题，研究人员开展了USP22（泛素特异性肽酶22）调控PPARγ（过氧化物酶体增殖物激活受体γ）稳定性的机制研究。研究发现USP22通过去泛素化作用稳定PPARγ，促进巨噬细胞对凋亡细胞的清除，从而减轻动脉粥样硬化进展。该研究揭示了USP22-PPARγ通路在斑块稳定性中的关键作用，为动脉粥样硬化治疗提供了新靶点。

　　

动脉粥样硬化是威胁人类健康的主要慢性炎症性疾病，其核心病理特征是动脉壁内脂质沉积和斑块形成。巨噬细胞在这一过程中扮演双重角色：一方面通过吞噬脂质形成泡沫细胞驱动斑块发展，另一方面通过清除凋亡细胞（胞葬作用）维持斑块稳定。然而，在晚期动脉粥样硬化病变中，巨噬细胞的胞葬功能常常受损，导致凋亡细胞堆积、坏死核心扩大，最终引发斑块破裂等致命并发症。尽管已知过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）能调控巨噬细胞功能，但其上游调控机制及与去泛素化酶的关联尚不明确。

来自广西医科大学第一附属医院的研究团队在《Communications Biology》发表重要研究成果，首次揭示泛素特异性肽酶22（USP22）通过稳定PPARγ增强巨噬细胞胞葬作用，显著改善动脉粥样硬化斑块稳定性。研究采用ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化模型，结合RNA测序、免疫共沉淀、流式细胞术等关键技术，发现USP22-PPARγ轴是调控斑块稳定的关键分子开关。

结果部分
巨噬细胞USP22表达在严重动脉粥样硬化病变中降低
通过Western饮食喂养ApoE^-/-小鼠16周建立晚期动脉粥样硬化模型，发现病变主动脉中USP22蛋白表达显著降低。免疫荧光显示斑块内CD68⁺巨噬细胞的USP22平均荧光强度较正常饮食组下降50%。体外实验证实LPS/IFN-γ刺激可时间依赖性下调THP-1源性巨噬细胞USP22表达，而IL-4/IL-13则上调其表达。

巨噬细胞过表达USP22缓解动脉粥样硬化
通过AAV-F4/80-OE-USP22特异性过表达巨噬细胞USP22，显著减少斑块坏死核心面积（降低42%）和脂质沉积（ORO阳性面积减少35%），同时增加胶原含量（提升28%）。值得注意的是，虽然斑块总面积无显著变化，但过表达组巨噬细胞相关TUNEL⁺凋亡细胞与游离凋亡细胞比值升高2.1倍，提示胞葬作用增强。Western blot显示主动脉组织BAX（促凋亡蛋白）表达下降而BCL-2（抗凋亡蛋白）表达升高。

USP22抑制泡沫细胞形成和炎症反应
siRNA沉默USP22使THP-1巨噬细胞的ox-LDL摄取量增加80%，而过表达则减少45%。机制上，USP22下调脂质摄取受体CD36和LOX-1表达。在炎症调控方面，USP22过表达使M1型标志物MCP-1和IL-12 mRNA降低60%，同时提升M2型因子IL-10和TGF-β表达3倍。流式检测显示USP22使巨噬细胞早期凋亡率降低55%。

USP22通过PPARγ增强胞葬作用
RNA-seq和GSEA分析提示USP22激活PPAR信号通路。共聚焦显微镜和Co-IP实验证实USP22与PPARγ在巨噬细胞核内直接结合，并通过去泛素化作用延长PPARγ半衰期（CHX实验显示蛋白稳定性提高2.3倍）。当使用PPARγ抑制剂GW9662处理时，USP22促进的胞葬作用被完全阻断。动物实验进一步证实，GW9662可抵消USP22过表达对斑块的保护作用，使坏死核心面积反弹增加65%。

USP22抑制剂加剧动脉粥样硬化
高剂量USP22i-S02（15 mg/kg）处理使斑块脂质沉积增加40%，血浆MCP-1水平升高2.4倍，但未显著影响胶原含量或血脂水平，证实USP22的药理抑制可重现基因沉默的表型。

结论与意义
该研究首次阐明USP22-PPARγ轴在动脉粥样硬化中的双重保护机制：一方面通过去泛素化稳定PPARγ，上调AXL/MERTK等胞葬受体表达增强凋亡细胞清除；另一方面通过抑制CD36/LOX-1减少脂质蓄积，协同维持斑块稳定。从转化医学角度看，研究不仅解释了临床晚期斑块中USP22表达降低的病理意义，更提示靶向巨噬细胞USP22可能成为稳定易损斑块的新策略。值得注意的是，与直接激活PPARγ的经典药物（如罗格列酮）不同，USP22调控能避免全身性PPARγ激活带来的心血管副作用，具有更好的靶向性。未来研究可进一步探索USP22在人类斑块中的表达谱，并开发特异性激动剂用于动脉粥样硬化治疗。