从印度温泉土壤宏基因组挖掘新型耐热耐碱 GH-10 木聚糖酶（rXyn-GM）：克隆表达、特性解析及应用前景

来自印度的研究人员为挖掘新型木聚糖酶，从 Tapovan 温泉土壤宏基因组中开展研究。他们成功克隆并表达了木聚糖酶基因 Xyn-GM，获得的 rXyn-GM 有良好稳定性和催化活性，或可用于食品和制药行业作益生元。

　　从印度北阿坎德邦 Tapovan 温泉的宏基因组文库中，分离出了一个 927bp 大小、不含纤维素酶的木聚糖酶基因（Xyn-GM）。该基因编码一种含 308 个氨基酸的木聚糖酶，属于糖苷水解酶家族 10（GH-10）。Xyn-GM 基因被导入 pET28a (+) 载体，并在大肠杆菌（Escherichia coli）BL21 (DE3) 宿主细胞中表达。通过 Ni²⁺-NTA 亲和层析一步纯化法，分离出分子量约 32.5kDa 的重组木聚糖酶（rXyn-GM）。纯化后的 rXyn-GM 具有广泛的热稳定性（50 - 100°C）和 pH 稳定性（4.0 - 11.0），在 70°C 和 pH 9.0 时活性最佳。在 1mM Mn²⁺存在下，其活性提高 67%。rXyn-GM 在 50°C 和 60°C 下处理 2 小时后仍保留约 65% 的活性，在 pH 9.0 下处理 3 小时后保留约 75% 的活性。它对山毛榉木聚糖表现出偏好，动力学参数 Km 为 20.9mg/mL，Vmax 为 156.25μmol/mg/min。此外，rXyn-GM 能催化山毛榉木聚糖生成低聚木糖，这表明它在食品和制药行业作为益生元具有潜在应用价值。