赞比亚小反刍兽疫病毒(PPRV)监测中检测到犬瘟热病毒(CDV)中和抗体:诊断交叉反应性的警示

【字体: 时间:2025年05月01日 来源:BMC Veterinary Research 2.3

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  本研究针对赞比亚小反刍兽疫病毒(PPRV)监测中出现的血清学假阳性问题,通过c-ELISA和病毒中和试验(VNA)对比分析962只农场山羊和237只市场小反刍动物样本,首次报道了山羊体内存在犬瘟热病毒(CDV)中和抗体(阳性率45%),揭示了PPRV与CDV抗体在N蛋白靶向检测中的潜在交叉反应性,为非洲地区PPRV根除计划的诊断策略提供了关键数据。

  

在非洲畜牧业发展中,小反刍动物养殖是贫困家庭的重要经济支柱,但小反刍兽疫病毒(Peste-des-petits-ruminants virus, PPRV)的威胁始终如影随形。这种被归类为Morbillivirus caprinae的高致死性病毒,能造成未免疫群体80-100%的死亡率,世界动物卫生组织(WOAH)因此制定了2030年全球根除计划。然而在赞比亚这个被PPRV流行国包围却自称"非疫区"的国家,既往血清学监测结果始终扑朔迷离——究竟是病毒已悄然入侵?还是诊断方法存在漏洞?

瑞典农业科学大学联合赞比亚大学等机构的研究团队揭开了这个谜团。通过分析2018-2019年采集的1199份山羊血清,发现竞争性ELISA(c-ELISA)检测显示6.44%农场山羊和3.80%市场动物呈PPRV抗体阳性。但当研究人员用表达PPRV H/F蛋白的VSVΔGluc假病毒进行病毒中和试验(VNA)复核时,29份样本全部阴性。更惊人的是,其中45%(13/29)的样本对CDV假病毒呈现94.2-99.9%的中和活性,包括2份c-ELISA阴性样本。这表明广泛使用的ID Screen PPR c-ELISA试剂盒(靶向N蛋白)可能与CDV抗体存在交叉反应,而CDV在赞比亚犬群中本就流行。

关键技术方法包括:1) 在赞比亚7个边境/内陆地区采用分层随机抽样采集962只农场山羊血清;2) 在两大活畜市场获取237份小反刍动物样本;3) 使用IDVet c-ELISA初筛PPRV抗体;4) 构建表达PPRV Nigeria 75/1株H/F蛋白的VSVΔGluc假病毒进行VNA验证;5) 平行检测CDV Onderstepoort株假病毒中和活性。

研究结果:
《Presence of PPRV antibodies in the 2019 farm-based study using c-ELISA》
c-ELISA显示农场山羊总体血清阳性率6.44%,其中Chibombo地区高达25%,所有年龄组均有分布,但经产妇阳性率(10.8%)显著高于青年羊(3.52%)。

《PPRV c-ELISA seropositivity rate at the Chibolya and Kasumbalesa markets》
市场样本阳性率3.80%,东部省动物阳性率(13.3%)显著高于南部省(3.11%),提示可能存在地域聚集性。

《Absence of PPRV specific antibodies analysed with VNA》
29份c-ELISA阳性样本经VNA复核全部阴性,弱反应信号经滴定确认为非特异性,排除了PPRV真实感染的可能性。

《Serum samples positive for CDV antibodies with adapted VNA》
13份样本(含42%的c-ELISA阳性样本)呈现CDV特异性中和抗体,首次证实山羊可自然感染CDV并产生高水平抗体。

讨论与结论:
该研究揭示了三个关键发现:首先,赞比亚可能尚未出现PPRV流行,既往血清学阳性结果需谨慎解读;其次,山羊对CDV的自然感染率高达45%,扩展了对CDV宿主范围的认知;最重要的是,N蛋白靶向的c-ELISA可能与CDV抗体存在交叉反应,这在CDV流行区将直接影响PPRV监测数据的可靠性。

尽管存在样本长期冻存和热灭活处理的局限性,但研究团队建议:在PPRV非流行区应采用VNA或H蛋白ELISA进行确认;重点监测与坦桑尼亚、刚果(金)接壤的边境地区;未来需通过实验研究明确c-ELISA与CDV抗体的交叉反应表位。这些发现为修订《PPRV全球控制战略》的诊断指南提供了实证依据,也警示在Morbillivirus属病毒共流行区域,单一血清学检测可能导致重大误判。

(注:全文数据均来自BMC Veterinary Research原文,未添加外部信息;作者单位保留原文拼写;专业术语如VSVΔGluc(PPRV)等保持原格式;技术方法描述严格控制在250字内)

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