《Achromobacter种属抗菌药物敏感性试验方法与折点确立：推动难治性感染精准治疗的关键突破》

这篇研究为临床微生物学领域填补了重要空白，首次系统建立了针对Achromobacter种属的CLSI M45标准暂定折点（BP），涵盖哌拉西林-他唑巴坦（PTZ）、碳青霉烯类（MEM/IPM）和复方新诺明（SXT）的MIC与纸片扩散法（DD）标准。通过整合全基因组测序（WGS）揭示90.1%菌株携带blaOXA变异体，并验证改良碳青霉烯灭活试验（mCIM）的检测效能（灵敏度100%/特异度87%），为多重耐药（MDR）Achromobacter感染的精准诊疗提供关键工具。

　　

ABSTRACT
Achromobacter种属作为机会性致病菌，其多重耐药特性导致临床治疗困难。本研究通过建立CLSI M45暂定折点、评估mCIM方法及解析耐药机制，填补了该菌属标准化药敏检测的空白。关键发现包括：哌拉西林-他唑巴坦、亚胺培南和美罗培南的暂定流行病学临界值（tECV）分别为1、2和0.5 μg/mL；基于91株美国分离株的DD与MIC相关性研究证实，除少数因样本量导致的微小误差外，结果均符合CLSI M23标准；WGS揭示82株（90.1%）携带bla_OXA变异体，其中bla_OXA-114占主导（90.2%）。

INTRODUCTION
Achromobacter属属于Alcaligenaceae科，包含22个物种，其中A. xylosoxidans是最常见的临床分离株。这类非发酵糖革兰阴性杆菌通过固有和获得性耐药机制（如外排泵、β-内酰胺酶）对多种抗菌药物耐药，尤其对囊性纤维化等免疫缺陷患者构成威胁。现行CLSI M100非肠杆菌折点存在明显局限：未随PK/PD数据更新、缺乏DD标准，且包含对Achromobacter固有耐药的药物（如氨基糖苷类）。本研究旨在建立物种特异的AST标准。

MATERIALS AND METHODS
研究通过三方面数据确立折点：

1. MIC分布与tECV：整合UCLA（711株）、梅奥诊所（1,639株）和SENTRY数据库（548株）的MIC数据，使用ECOFFinder计算tECV；
2. DD相关性：对91株分离株同步进行参考肉汤微量稀释（BMD）和DD试验，应用dBETS软件分析；
3. 分子机制：通过WGS检测耐药基因，评估mCIM对碳青霉烯酶的检测效能。

RESULTS

1. 折点确立：

   • 美罗培南和亚胺培南的临床折点设为≤2（敏感）、4（中介）、≥8 μg/mL（耐药）；
   • 哌拉西林-他唑巴坦采用分级折点（≤8/16/≥32 μg/mL），复方新诺明设为≤2/≥4 μg/mL；
   • 头孢他啶、氟喹诺酮类和米诺环因野生型MIC过高未设折点。

2. DD性能：所有药物符合M23误差标准，仅复方新诺明在≥I+2范围出现20%微小误差。

3. 分子特征：

   • A. xylosoxidans（84.6%）主要携带bla_OXA-114（87%），16株共存bla_AXC；
   • 碳青霉烯不敏感株中仅2株含bla_VIM-4，提示耐药主要依赖非酶机制。

4. mCIM评估：对VIM检测灵敏度达100%，但bla_AXC导致6例假阳性。

DISCUSSION
本研究首次系统性建立Achromobacter属AST标准，其意义在于：

1. 解决临床实验室依赖非肠杆菌折点的误判风险；
2. 揭示碳青霉烯耐药主要与非酶机制相关，指导联合用药策略；
3. 提出mCIM可作为碳青霉烯酶初筛工具，但需分子确认。
   局限性包括缺乏PK/PD临床数据支持，且DD试验未评估多中心差异。这些暂定折点将于2026年纳入CLSI M45第4版。

创新性发现：

• 首次报道bla_OXA-243-like在A. deleyi中的优势分布（7/8株）；
• 提出Achromobacter对喹诺酮类临床无效的实验室证据（MIC模态值远超可达到血药浓度）。