智利和西班牙蝙蝠疱疹病毒的分子调查:发现潜在新物种,拓宽病毒认知版图

【字体: 时间:2025年05月02日 来源:Veterinary Research Communications 1.8

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  为探究蝙蝠中疱疹病毒情况,研究人员对西班牙 3 种、智利 5 种蝙蝠血液或脾脏样本开展调查。通过广谱巢式 PCR 技术,发现西班牙 9.7%、智利 10.0% 的蝙蝠携带疱疹病毒,还发现潜在新物种,这增加了对疱疹病毒多样性的认知。

  在神秘的动物世界里,蝙蝠,这个能在空中自由翱翔的哺乳动物群体,一直吸引着众多科研人员的目光。它们不仅是哺乳动物中的 “飞行高手”,更是众多病毒的宿主和天然 “储存库” 。像冠状病毒(Coronaviridae)、副粘病毒(Paramyxoviridae)、丝状病毒(Filoviridae)和弹状病毒(Rhabdoviridae)等 RNA 病毒,都能在蝙蝠身上找到踪迹,这些病毒有的甚至能引发严重的公共卫生事件,让人们谈之色变。
然而,在病毒研究的领域中,一直存在一个 “偏科” 现象。过去,大多数针对蝙蝠的病毒学研究都把重点放在了 RNA 病毒上,而对 DNA 病毒的关注少之又少,相关信息也极为有限。这就好比在一座宝藏山中,人们只挖掘了一侧的宝藏,而对另一侧的宝藏视而不见。在众多 DNA 病毒家族里,疱疹病毒(Herpesviruses)所属的正疱疹病毒科(Orthoherpesviridae)十分重要。这类病毒能够在宿主体内建立潜伏感染,就像隐藏在黑暗中的 “潜伏者”,时刻可能对宿主健康产生影响。按照生物学分类,它又细分为 α 疱疹病毒亚科(Alphaherpesvirinae)、β 疱疹病毒亚科(Betaherpesvirinae)和 γ 疱疹病毒亚科(Gammaherpesvirinae) 。由于蝙蝠种类繁多,理论上应该存在大量与之对应的疱疹病毒种类。可实际上,在全球范围内,虽然已经在 75 种蝙蝠中发现了 348 种 α、β、γ 疱疹病毒和未分类的疱疹病毒,但疱疹病毒监测研究在不同地区并不均衡。在西班牙,关于蝙蝠疱疹病毒的研究仅有一项;而在智利,这方面的数据几乎是一片空白,整个南美洲关于蝙蝠疱疹病毒的报道也寥寥无几。这种信息的缺失,就像拼图中缺少了关键的几块,让我们无法完整地认识蝙蝠疱疹病毒的全貌。为了填补这些知识空白,来自西班牙和智利等多个研究机构的科研人员,开展了一项针对蝙蝠疱疹病毒的调查研究。最终,研究成果发表在了《Veterinary Research Communications》杂志上。

研究人员采用了便利抽样的方法。在西班牙,他们从加泰罗尼亚地区的一个废弃矿井和两个洞穴中,捕获了 31 只蝙蝠,这些蝙蝠分属于两个不同的科,其中多数是长翼蝠科(Miniopteridae)的施氏长翼蝠(Miniopterus schreibersii ),还有少数属于蝙蝠科(Vespertilionidae) 。在智利,研究人员捕获了 50 只蝙蝠,涉及 4 个物种,分属于犬吻蝠科(Molossidae)和蝙蝠科(Vespertilionidae)。这些蝙蝠有的是在狂犬病监测项目中捕获的,有的则是在特定的森林和公园中捕获的。采集样本时,研究人员遵循动物福利法规,从蝙蝠的头静脉采集血液样本,对于部分蝙蝠,还采集了脾脏样本。

样本采集完成后,研究人员运用了多种分子生物学技术进行分析。首先,他们使用核酸提取试剂盒,分别从西班牙蝙蝠的冷冻血液样本和智利蝙蝠的血液、脾脏样本中提取总 DNA。接着,采用广谱 PCR 技术,对提取的 DNA 进行检测,这种技术能够扩增 α、β 和 γ 疱疹病毒 DNA 聚合酶基因的特定片段。然后,对扩增出的符合预期大小的片段进行纯化和测序,并通过生物信息学软件对测序结果进行分析,与 GenBank/DDBJ/EMBL 数据库中的序列进行比对,构建系统发育树,以此来确定所检测到的疱疹病毒的种类和分类地位。

在西班牙的研究结果显示,31 只蝙蝠中有 3 只(9.7%)检测出疱疹病毒阳性,且均为施氏长翼蝠。通过序列分析发现,这些蝙蝠携带的疱疹病毒序列类型均为 γ 疱疹病毒,与中国报道的施氏长翼蝠和小蹄蝠(Rhinolophus pusillus blythi )中的 γ 疱疹病毒序列相似性较高。而在智利,50 只蝙蝠中有 5 只(10.0%)呈阳性,且均为巴西游离尾蝠(Tadarida brasiliensis )。研究人员在这些蝙蝠中鉴定出了两种 β 疱疹病毒、两种 γ 疱疹病毒序列类型,还有一种无法确定分类的疱疹病毒。除了一种高度分化的疱疹病毒外,其他检测到的疱疹病毒序列与乌拉圭的巴西游离尾蝠中发现的序列最为相似。通过系统发育分析,研究人员发现此次研究中获得的疱疹病毒序列均未被归类到之前在哺乳动物中描述的疱疹病毒属中。

综合来看,研究人员在西班牙和智利的蝙蝠中发现了新型的 β 和 γ 疱疹病毒序列类型,以及一种未分类的高度分化的疱疹病毒,其中部分病毒很可能代表了新的物种。这一研究成果极大地拓展了人们对蝙蝠疱疹病毒多样性的认知,也让南美洲蝙蝠疱疹病毒的研究不再 “空白” ,为后续深入研究蝙蝠疱疹病毒的演化、传播和致病性奠定了重要基础。不过,这些疱疹病毒对蝙蝠健康的影响尚不明确,未来还需要对智利和西班牙其他蝙蝠科的疱疹病毒进行监测研究,进一步完善我们对蝙蝠疱疹病毒的认识。

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