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为解决甘薯纤维含量遗传机制不明的问题,研究人员开展甘薯纤维含量的全基因组关联研究(GWAS)。他们鉴定出 7 个显著单核苷酸多态性(SNP)和 4 个候选基因,为甘薯纤维优化育种提供资源,具有重要意义。
在健康饮食备受关注的当下,膳食纤维因其对人体健康的诸多益处而愈发受到重视。甘薯(Ipomoea batatas (L.) Lam.)作为一种重要的根类作物,富含膳食纤维。适量的膳食纤维有助于降低代谢和胃肠道疾病风险,但过多的膳食纤维却会影响甘薯的口感,降低消费者的喜爱度。可令人遗憾的是,甘薯中膳食纤维含量的遗传机制一直如同迷雾,尚未被人类完全揭开。这不仅阻碍了培育口感与营养兼具的甘薯品种,也限制了甘薯在食品领域的进一步开发利用 。为了打破这一困境,韩国农村振兴厅作物与食品科学研究所(National Institute of Crop and Food Science, RDA)价值作物研究所的研究人员勇挑重担,开展了一项极具意义的研究 。他们通过全基因组关联研究(Genome-wide association study,GWAS),致力于找出与甘薯纤维含量相关的基因组区域和候选基因。这项研究成果发表在《BMC Plant Biology》杂志上,为甘薯遗传研究和品种改良开辟了新道路 。
研究人员采用了多种关键技术方法。首先,对 140 个甘薯基因型进行种植,在特定时间收获贮藏根用于纤维含量评估。在基因分析方面,利用改良的十六烷基三甲基溴化铵法提取甘薯叶片基因组 DNA ,通过基因分型测序(Genotyping-by-sequencing,GBS)技术进行基因分型,并运用多种软件对测序数据进行处理和筛选,获得高质量单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)数据 。同时,运用群体结构分析和 GWAS,分别使用 STRUCTURE 软件和 GAPIT 工具中的 FarmCPU、BLINK 模型进行分析,最后通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)对候选基因表达进行分析 。
表型分布:纤维含量差异显著
研究人员测定了 140 个甘薯基因型贮藏根的纤维含量,结果令人惊讶,不同基因型间的纤维含量差异极大。含量范围从最低的 24.00mg/100g(IT232029)到最高的 426.67mg/100g(IT258182),平均含量为 124.80mg/100g,标准差达 80.70mg/100g 。这种显著的差异表明,甘薯纤维含量在遗传上具有多样性,为后续研究提供了丰富的素材 。
群体结构:分为三个亚群
通过对筛选后的 20,899 个高质量 SNP 进行群体结构分析,研究人员发现这些甘薯基因型可分为三个亚群 。其中,亚群 I 包含 34 个基因型,多为韩国的育种系或品种;亚群 II 占比最大,有 69 个基因型,主要来自亚洲国家;亚群 III 有 37 个基因型,多分离自韩国或中国台湾地区 。值得注意的是,亚群 III 的纤维含量显著低于亚群 I 和亚群 II,这暗示着不同地理来源和育种方向可能对甘薯纤维含量产生影响 。
GWAS 分析:确定关键 SNP
利用 FarmCPU 和 BLINK 模型对 20,899 个 SNP 进行 GWAS 分析,研究人员发现了多个与纤维含量显著相关的 SNP 。其中,位于 7 号染色体(Iba_chr07a_20294133)和 12 号染色体(Iba_chr12a_38616338)上的两个 SNP 在两种模型中均被检测到 。进一步分析发现,部分 SNP 不同等位基因的基因型间纤维含量存在显著差异,如 Iba_chr01a_17621178 位点携带 A 等位基因的基因型纤维含量显著高于携带 G 等位基因的基因型 。这表明这些 SNP 有望成为调控甘薯纤维含量的关键遗传标记 。
候选基因预测:锁定关键基因
研究人员在显著 SNP 附近 100kb 区域内筛选出 8 个候选基因,并对低纤维基因型(IT232029)和高纤维基因型(IT258195 和 IT327288)在不同时间点进行纤维含量评估和基因表达分析 。结果显示,IbANT1(腺嘌呤核苷酸转运蛋白 BT1)、IbCYP86B1(细胞色素 P450 86B1)、IbSCR3(稻草人样蛋白 3)和 IbFER(FERONIA 受体样激酶)这 4 个基因在高纤维基因型中的表达始终高于低纤维基因型 。这些基因分别参与了木栓质生物合成、细胞壁重塑和代谢调控等过程,暗示它们在甘薯纤维积累中发挥着重要作用 。
在研究结论与讨论部分,此次研究成功鉴定出与甘薯纤维含量相关的 7 个显著 SNP 和 4 个候选基因 。其中,3 个 SNP 在纯合等位基因间表现出显著的表型差异,为开发纤维含量调控的选择标记提供了可能 。4 个候选基因在高纤维基因型中显著上调表达,为揭示甘薯纤维积累的分子机制提供了重要线索 。然而,研究也存在一些局限性,如实验仅在单一地点进行,未考虑等位基因剂量,遗传资源多样性有限等 。尽管如此,这项研究仍是甘薯纤维含量遗传研究领域的重要突破,为通过标记辅助选择培育纤维含量优化的甘薯品种奠定了坚实基础 ,未来进一步的研究有望克服这些局限,推动甘薯遗传改良取得更大进展 。