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肝移植后肝纤维化影响患者长期生存。研究人员开展 “骨髓间充质干细胞（BMSCs）对肝移植后肝纤维化影响及 JAK1/STAT5 通路作用” 的研究。结果显示 BMSCs 可缓解肝纤维化，该研究为治疗肝移植后肝纤维化提供新思路。
在医学领域，肝脏疾病一直是困扰人类健康的一大难题。对于终末期肝病患者而言，肝移植（LT）原本是重获新生的希望之光，然而肝移植后的肝纤维化问题却如同一朵阴霾，笼罩着患者的康复之路。多项针对儿童肝移植后长期监测肝活检的研究表明，肝纤维化的发生率高达 25%-100% 。如果不能及时治疗，这一问题可能会像滚雪球一样，逐渐发展为不可逆的肝硬化，最终导致移植物丢失，患者的生存率也会大打折扣。所以，探寻肝移植后肝纤维化的形成机制，并找到有效的预防方法，就成了提高肝移植患者长期生存率的关键所在。
在这样的背景下，天津第一中心医院等机构的研究人员挺身而出，开展了一项极具意义的研究。他们聚焦于骨髓间充质干细胞（BMSCs）在肝移植后肝纤维化中的作用，以及 JAK1/STAT5 信号通路在这一过程中扮演的角色。最终，研究得出令人振奋的结论：BMSCs 能够减轻肝细胞损伤，减少肝细胞分泌的 IL7，下调肝星状细胞（HSCs）中的 IL7R/JAK1/STAT5 通路，从而降低 HSCs 的活化程度，有效缓解肝移植后的肝纤维化。这一发现为治疗肝移植后肝纤维化提供了全新的方向，让众多患者看到了新的希望，该研究成果发表在《Stem Cell Research & Therapy》上。
为了开展这项研究，研究人员运用了多种关键技术方法。在动物实验方面，他们建立了大鼠肝移植后肝纤维化模型，通过控制供肝冷缺血时间来诱导肝纤维化。细胞实验上，构建了细胞缺氧 - 复氧模型以及细胞共培养模型。同时，采用 RNA 测序（RNA-seq）分析差异基因和通路，运用定量实时聚合酶链反应（RT-qPCR）、蛋白质免疫印迹法（WB）检测相关基因和蛋白的表达水平，还进行了血清测量、肝组织病理学检查等实验 。
下面来看具体的研究结果：
- BMSCs 的提取、鉴定及在大鼠肝脏中的存活时间：研究人员从 4 周龄大鼠的股骨和胫骨中成功提取出原代 BMSCs，并进行了培养和诱导分化实验。通过茜素红染色和油红 O 染色，分别证实了其向成骨细胞和脂肪细胞分化的能力。经流式细胞术鉴定，这些细胞表面分子 CD34 和 CD45 呈阴性，而 CD90 和 CD29 呈阳性。将用 CM-Dil 染料标记的 BMSCs 注入大鼠门静脉后发现，它们能够在大鼠肝脏中存活 7 - 14 天甚至更久 。
- BMSCs 缓解大鼠肝移植后的肝纤维化：研究人员将大鼠分为假手术组（Sham group）、肝移植组（LT group）、肝移植 + BMSCs 组（LT + BMSC group）等多个组进行实验。通过苏木精 - 伊红（HE）染色、Masson 染色、天狼星红染色等方法观察发现，与 LT 组相比，LT + BMSC 组的肝小叶结构紊乱、纤维结缔组织增生和炎症细胞浸润明显减轻，纤维化程度降低，血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平也有所下降 。同时，RT-qPCR 和 WB 检测结果显示，BMSCs 能够逆转因延长冷缺血时间导致的相关基因和蛋白表达的变化，表明 BMSCs 可以缓解大鼠肝移植后的肝纤维化 。
- BMSCs 减轻缺氧 - 复氧后 HSCs 的活化并减少其凋亡，但不影响增殖：在体外实验中，研究人员将 HSC-T6 细胞进行缺氧 - 复氧处理，并与 BMSCs 共培养。结果发现，与缺氧 - 复氧组（HSC-T6 + IR group）相比，共培养组（HSC-T6 + IR + BMSC group）中 HSC-T6 细胞的活化相关基因和蛋白表达显著降低，凋亡细胞比例减少，而细胞增殖不受影响。这表明 BMSCs 能够减轻缺氧 - 复氧后 HSCs 的活化并减少其凋亡 。
- BMSCs 可能通过 JAK1/STAT5 通路缓解肝移植后的肝纤维化：通过 RNA 测序分析发现，肝纤维化组与正常肝组相比，有大量基因表达发生变化；BMSCs 处理后的肝组织与肝纤维化组相比，基因表达模式也明显不同。KEGG 富集分析显示，差异表达的 RNA 主要涉及 IL7、IL7R 和 JAK/STAT 信号通路 。进一步研究发现，肝纤维化时 JAK1 表达和 STAT5 磷酸化水平增加，而 BMSCs 处理后这些指标下降。使用 JAK1 抑制剂 Abrocitinib 和激动剂 RO8191 进行实验，结果表明 BMSCs 可能通过抑制 JAK1/STAT5 通路来缓解肝移植后的肝纤维化 。
- BMSCs 可能通过 JAK1/STAT5 通路抑制缺氧 - 复氧后 HSC-T6 细胞的活化并减少其凋亡：对缺氧 - 复氧后的 HSC-T6 细胞进行研究发现，JAK1 和 IL7R 表达水平增加，STAT5 磷酸化水平也增加 。添加 JAK1 抑制剂 Abrocitinib 后，相关基因和蛋白表达下降，细胞凋亡比例减少。这说明 BMSCs 可能通过抑制 JAK1/STAT5 通路来抑制缺氧 - 复氧后 HSC-T6 细胞的活化并减少其凋亡 。
- JAK1 激动剂 RO8191 逆转 BMSCs 在缓解肝纤维化和减轻 HSCs 活化中的作用：给大鼠口服 JAK1 激动剂 RO8191 后发现，与 LT + BMSC 组相比，LT + BMSC + RO8191 组的肝纤维化程度加重，相关基因和蛋白表达增加，细胞凋亡比例上升。这表明 RO8191 能够逆转 BMSCs 在缓解肝纤维化和减轻 HSCs 活化中的作用 。
- BMSCs 通过调节肝细胞分泌的 IL7 来调控 HSCs 中的 IL7R/JAK1/STAT5 通路：给大鼠注射抗 IL7 抗体和抗 IL7Rα 后，发现与 LT 组相比，肝纤维化程度减轻，相关基因和蛋白表达下降，STAT5 磷酸化水平也降低 。同时，研究还发现 BMSCs 能够减少肝细胞损伤后 IL7 的分泌。这说明 BMSCs 通过调节肝细胞分泌的 IL7 来调控 HSCs 中的 IL7R/JAK1/STAT5 通路，进而缓解肝纤维化 。
综合上述研究结果，研究人员得出结论：BMSCs 能够缓解肝细胞损伤，减少肝细胞来源的 IL7，下调 HSCs 中的 IL7R/JAK1/STAT5 通路，从而降低 HSCs 的活化程度，最终缓解肝移植后的肝纤维化。这一研究首次揭示了 BMSCs 在肝移植后肝纤维化中的作用机制，为将 BMSCs 开发成为治疗肝移植后肝纤维化的潜在方法奠定了实验基础。不过，该研究也存在一些不足之处，比如 BMSCs 减轻肝细胞分泌 IL7 的具体机制尚不明确，对其他 STATs 作用的研究不够深入，以及 BMSCs 对基因组、转录组、蛋白质组等代谢过程的综合影响还有待进一步探索 。但尽管如此，这项研究依然为肝移植后肝纤维化的治疗开辟了新的道路，为未来的临床应用提供了重要的理论依据，有望让更多患者受益。
