综述：利用工程化细胞外囊泡增强治疗效能：癌症免疫治疗的新进展

这篇综述系统阐述了工程化细胞外囊泡（EVs）在癌症免疫治疗中的突破性应用。通过改造EVs的生物发生、表面特性和内容物（如免疫调节分子和基因编辑工具GETs），可精准调控肿瘤微环境（TME），克服免疫抑制并增强靶向递送。文章还探讨了EVs作为纳米疫苗平台、免疫检查点阻断剂及多模式协同治疗的潜力，同时分析了临床转化面临的规模化生产与安全性挑战。

　　

引言

癌症仍是全球健康的主要威胁，传统疗法如手术和化疗存在局限性。免疫治疗通过激活机体免疫系统对抗肿瘤，但面临肿瘤免疫逃逸（TIE）和系统性毒性等问题。细胞外囊泡（EVs）——尤其是外泌体（Exos）等纳米级膜泡——因其天然递送能力和低毒性成为研究热点。工程化EVs通过装载免疫调节分子或基因编辑工具（GETs），可重塑免疫抑制性TME，为癌症治疗提供新策略。

EVs的生物发生与组成

EVs是由细胞分泌的脂质双层结构，按大小和来源分为外泌体（Exos，30-150 nm）、微泡（MVs）和凋亡小体（ABs）。Exos通过多泡体（MVBs）与质膜融合释放，携带蛋白质（如MHC分子）、脂质和核酸（miRNA、circRNA）。肿瘤来源EVs（TEX）富含肿瘤相关抗原（TAAs），既能促进免疫激活，也可能介导免疫抑制。例如，外泌体表面蛋白LAMP-2B可被改造为靶向配体载体，而hnRNPA2B1等RNA结合蛋白调控miRNA分选。

EVs的工程化策略

基因工程：通过重组DNA技术（rDNA）使母细胞分泌携带特定蛋白（如PD-1）或siRNA的EVs。例如，LAMP-2B融合靶向肽可增强肿瘤特异性归巢。
表面修饰：采用点击化学（CuAAC）或非共价结合（如cRGDyK肽靶向整合素）优化EVs的靶向性。NK细胞膜包被的仿生纳米颗粒（NK-NPs）能显著抑制肿瘤生长。
内部载药：电穿孔或超声法可高效装载化疗药物（如阿霉素）或核酸（如CRISPR-Cas9），但需平衡载药效率与膜完整性。

癌症免疫治疗应用

纳米疫苗平台：DC来源EVs（DEVs）携带TAAs激活树突状细胞（DCs），而M1巨噬细胞EVs（M1-Exos）通过抑制Wnt通路将M2型肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化为抗肿瘤M1型。
细胞毒性效应：CAR-T细胞衍生的EVs保留母细胞杀伤功能，而IL-2修饰的EVs（IL2-sEVs）可降低PD-L1表达，增强CD8⁺ T细胞活性。
重塑TME：EVs递送STING激动剂激活cGAS-STING通路，或通过siRNA沉默Galectin-9（Gal-9）逆转胰腺癌（PDAC）的免疫抑制。
免疫检查点阻断：PD-1修饰的EVs模拟抗体功能，而细菌外膜囊泡（OMVs）联合PD-L1阻断显著抑制结肠癌。

挑战与展望

尽管工程化EVs在动物模型中效果显著，但临床转化仍需解决EVs异质性、规模化生产（GMP标准）及长期安全性问题。未来需优化分离技术（如微流控）、建立标准化质控体系，并探索合成EVs等替代方案。通过多学科协作，EVs有望成为癌症精准治疗的革命性工具。

全文通过详实的机制解析和案例展示，揭示了工程化EVs在突破肿瘤治疗瓶颈中的独特价值，为研究者提供了从基础到临床的全景视角。