辅料去除对单克隆抗体表征的影响及其在生物类似药可比性分析中的关键意义

为解决生物类似药可比性分析中辅料干扰问题，研究人员以曲妥珠单抗(Tmab)原研药Herclon及其生物类似药Herzuma、Vivitra为例，系统研究辅料（海藻糖、L-组氨酸HCl、聚山梨酯20）去除对电荷变异分析（CEX-HPLC）、二级结构（FTIR/远紫外CD）和三级结构（近紫外CD/本征荧光FLR）的影响，发现基础峰差异达3.62%，荧光最大波长偏移6nm，为生物类似药开发提供重要方法学警示。

　　

生物治疗产品的全面分析和功能表征是监管硬性要求，尤其对生物类似药而言，其获批必须证明与参照药的可比性。典型生物制剂配方含多种稳定用辅料，这些成分可能干扰表征和可比性研究的关键技术。本研究以曲妥珠单抗(Tmab)参照药Herclon及其商业生物类似药Herzuma、Vivitra为模型，采用"逐一剔除"策略考察辅料去除对分析技术的影响。

研究发现海藻糖、L-组氨酸HCl和聚山梨酯20的去除会显著影响：阳离子交换色谱(CEX-HPLC)检测的电荷变异体（基础峰差异达3.62%）、傅里叶变换红外光谱(FTIR)酰胺I区信号、圆二色谱(CD)二级/三级结构数据，以及本征荧光光谱(FLR)最大波长（偏移达6nm）。这些干扰效应提示，生物类似药开发商在从制剂中提取活性成分进行可比性分析时（行业常规操作），必须充分考虑配方差异和辅料去除对分析结果的潜在影响。