VISTA通过调控巨噬细胞抑制三阴性乳腺癌中CD8+T细胞毒性功能的机制研究

本研究针对三阴性乳腺癌（TNBC）免疫治疗响应率低的难题，揭示了免疫检查点分子VISTA通过调控肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的表型转换，抑制CD8+T细胞功能的关键机制。研究人员通过临床样本分析和小鼠模型证实，VISTA在TNBC中高表达于巨噬细胞和中性粒细胞，其阻断可逆转TAMs的免疫抑制表型，促进CD8+T细胞浸润与活化，为开发新型联合免疫疗法提供了理论依据。

　　

三阴性乳腺癌（TNBC）作为乳腺癌中最具侵袭性的亚型，因其缺乏雌激素受体、孕激素受体和HER2表达，导致靶向治疗选择有限。尽管免疫检查点抑制剂（ICIs）如PD-1/PD-L1抑制剂为部分患者带来希望，但总体响应率不足10%，揭示肿瘤微环境（TME）中可能存在其他免疫抑制机制。近年来，VISTA（V-domain Ig suppressor of T-cell activation）作为B7家族的新型免疫检查点分子，在多种癌症中显示出调控髓系细胞和T细胞功能的双重作用，但其在TNBC中的具体机制尚不明确。

英国利物浦大学的研究团队通过分析TNBC患者样本和Py230小鼠模型，首次系统阐明了VISTA通过巨噬细胞介导的免疫抑制网络。研究发现，TNBC组织中VISTA表达显著高于癌旁组织，且主要富集于CD68⁺巨噬细胞和MPO⁺中性粒细胞。通过单次剂量抗VISTA抗体（13F3）干预，成功逆转了巨噬细胞的MHCII⁺促炎表型，同时降低CD206⁺免疫抑制标志物表达。体外实验进一步证实，VISTA阻断通过细胞直接接触（而非可溶性因子）解除巨噬细胞对CD8⁺T细胞IFN-γ和颗粒酶B（GzmB）产生的抑制，且该过程不依赖PSGL-1通路。

关键技术方法包括：1）利用人TNBC组织芯片和Py230原位移植小鼠模型进行空间多色免疫荧光分析；2）通过流式细胞术检测免疫细胞亚群及活化标志物CD69；3）建立肿瘤条件培养基（TCM）诱导的骨髓源性巨噬细胞（BMDMs）共培养体系；4）采用qPCR评估M1/M2型巨噬细胞相关基因表达谱。

研究结果部分：
VISTA在TNBC中主要表达于巨噬细胞和中性粒细胞
临床样本显示VISTA⁺细胞与CD8⁺T细胞功能耗竭呈空间共定位，小鼠模型验证Ly6G⁺中性粒细胞和F4/80⁺巨噬细胞是主要VISTA表达群体。

VISTA阻断重塑巨噬细胞免疫刺激表型
单次抗VISTA处理即可上调肿瘤和转移肺中MHCII⁺巨噬细胞比例，伴随IL12b、CXCL9等M1型标志物基因表达升高，而Arg1表达下降。

VISTA通过细胞接触依赖性机制调控CD8⁺T细胞功能
共培养实验表明，VISTA阻断使CD8⁺T细胞IFN-γ分泌增加2.3倍，但该效应在Transwell体系中消失，提示需要直接细胞接触。

系统性免疫激活效应
尽管短期干预未显著缩小原发瘤，但转移肺中CD8⁺T细胞浸润增加1.8倍，且GzmB⁺细胞比例提升，显示远端免疫微环境重塑潜力。

结论部分强调，该研究首次阐明VISTA在TNBC中通过"巨噬细胞-CD8⁺T细胞"轴介导免疫逃逸的具体机制，突破传统认知中VISTA仅通过PSGL-1通路发挥作用的理论。讨论部分指出，鉴于VISTA与PD-1通路的非重叠性，其阻断剂与现有ICIs联用可能克服TNBC治疗耐药性。研究为临床转化提供两大启示：1）VISTA表达可作为TNBC免疫治疗响应的预测标志物；2）开发靶向髓系细胞的联合策略有望提升现有免疫疗法疗效。论文发表于《British Journal of Cancer》，为TNBC免疫治疗开辟了新方向。