益肾中药良方佑归丸：调控 ROS/PHD2/HIF-1α 通路治疗糖皮质激素性骨坏死的新希望

糖皮质激素性骨坏死发病率渐升，机制未明。南京中医药大学研究人员开展佑归丸（YGY）治疗该病的研究。发现 YGY 可调节 ROS/PHD2/HIF-1α 通路，促进骨修复。为 YGY 临床应用提供理论依据。

　　在医学领域，糖皮质激素广泛应用，但它却带来了一个棘手的问题 —— 诱发骨坏死。就拿股骨头坏死（ONFH）来说，在非创伤性的病例里，因糖皮质激素导致的竟占了 51% 。比如系统性红斑狼疮（SLE）患者，每增加 10mg/d 的糖皮质激素用量，骨坏死风险就飙升 3.6%。而且，目前糖皮质激素性骨坏死的病理生理机制还没完全搞清楚，不过越来越多证据表明，氧化应激在其中起着关键作用。氧化应激就像是身体里的一场 “氧化风暴”，过多的活性氧（ROS）打破了细胞内氧化还原的平衡，让细胞走向凋亡。所以，找到对抗这种氧化损伤的方法，就成了治疗糖皮质激素性骨坏死的关键。

在这样的背景下，南京中医药大学的研究人员开启了一项意义重大的研究。他们把目光投向了传统中药佑归丸（YGY）。这可不是普通的药方，它已经有四百多年治疗骨坏死的历史，在临床应用中，对糖皮质激素相关的股骨头坏死（GA-ONFH）也展现出了良好的预防效果。但它到底是怎么发挥作用的呢？这就是研究人员想要解开的谜题。

经过一系列深入研究，他们发现佑归丸能够通过调节 ROS/PHD₂/HIF-1α 氧化应激信号通路，来促进糖皮质激素性骨坏死的骨修复。这一发现意义非凡，为佑归丸在临床上治疗糖皮质激素性骨坏死提供了全新的理论依据，就像是为迷茫的临床治疗点亮了一盏明灯。这项研究成果发表在了《Chinese Medicine》杂志上。

为了开展这项研究，研究人员采用了多种先进的技术方法。在成分分析上，运用超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF–MS）技术，精准鉴定佑归丸中的活性成分；借助网络药理学，预测其治疗 GA-ONFH 的潜在作用机制；利用血清代谢组学，寻找相关生物标志物；通过免疫组化（IHC）、蛋白质免疫印迹法（Western Blot）等实验技术，从分子层面探究其作用机制 。研究用到的样本包括 SD 大鼠，用于体内实验；大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs），用于体外实验。

下面来详细看看研究结果。

1. 佑归丸的成分鉴定：通过 UPLC-Q-TOF–MS 实验，研究人员在佑归丸中发现了 76 种活性成分，其中 33 种被确定为潜在的主要成分，像 5,7,3′ - 三甲氧基左旋表儿茶素、德尔可辛、新地黄苷、松果菊苷和芦丁等，可能是佑归丸发挥作用的关键 “选手”。
2. 网络药理学分析：研究人员找到了 71 个与佑归丸成分相关的关键靶点，其中 23 个与糖皮质激素性骨坏死重叠。经过一系列分析，发现佑归丸的治疗效果可能和抗氧化途径有关，就像是给细胞的抗氧化 “防线” 加了把力。
3. 体内实验结果
   • 促进股骨修复：给 GA-ONFH 大鼠模型使用佑归丸后，大鼠的体重逐渐恢复，炎症因子水平降低，而且没有出现生物毒性。组织学分析发现，佑归丸能减少骨细胞的损伤和脂肪积累，促进股骨的修复，改善股骨头的结构。
   • 调节氧化应激和分子靶点：在 GA-ONFH 大鼠中，佑归丸降低了血清和股骨组织中的丙二醛（MDA）水平，提高了超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）的水平，还调节了 PHD₂、HIF-1α 和 RUNX2 等分子的表达，这一系列操作就像是给受损的细胞 “修复大师”，让它们重新恢复活力。
   
   
4. 体外实验结果
   • 促进成骨分化：用 YGY 含药血清处理地塞米松（DXMS）诱导的 BMSCs 后，细胞的增殖能力增强，凋亡减少，成骨分化能力提高，钙结节沉积明显增加，说明佑归丸能帮助这些受损细胞重新走上正常的成骨分化道路。
   • 调节 ROS/PHD₂/HIF-1α 通路：实验表明，YGY 含药血清能降低 DXMS 诱导的 BMSCs 内 ROS 水平，恢复 PHD₂的表达，抑制 HIF-1α 的表达，同时提高成骨标记物 RUNX2 的表达，进一步证实了佑归丸是通过调节这条信号通路来发挥作用的。
   • 基因敲低验证：通过敲低 PHD₂基因，发现会减弱 YGY 含药血清对 DXMS 诱导的 BMSCs 成骨分化的促进作用；而敲低 HIF-1α 基因，则能增强这种促进作用，这就像在信号通路上做了 “开关” 实验，更加明确了这条通路在佑归丸发挥作用过程中的重要性。
   
   

研究结论和讨论部分指出，佑归丸中的活性成分可以通过清除 ROS，减轻糖皮质激素对 PHD₂的抑制作用，增强 HIF-1α 的降解，维持 RUNX2 的表达，从而促进成骨分化。不过，目前佑归丸在临床应用中还存在一些问题，比如缺乏标准化的给药方案，不同研究中使用的有效剂量差异较大，而且从动物实验到人体应用还存在一些障碍。未来需要利用人源化动物模型、三维骨类器官和生理药代动力学模型等进一步研究，为佑归丸的临床转化提供更坚实的基础。

总的来说，这项研究为我们揭示了佑归丸治疗糖皮质激素性骨坏死的潜在机制，虽然还有很长的路要走，但它为未来的临床治疗提供了新的方向和希望，有望让更多患者受益。