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非小细胞肺癌（NSCLC）中，KRAS-G12C 突变常见且 KRAS-G12C 抑制剂疗效受耐药限制。研究人员开展安罗替尼与 KRAS-G12C 抑制剂联合治疗研究，发现该联合疗法可抑制 c-Myc/ORC2 轴，显著抑制肿瘤。这为 NSCLC 治疗提供新策略。
在肺癌的众多类型中，非小细胞肺癌（NSCLC）是 “主力军”，它也是全球癌症相关死亡的主要原因之一。其中，KRAS 突变在 NSCLC 中约占 20 - 25%，而 KRAS-G12C 突变在肺腺癌里约占 14%。针对 KRAS-G12C 突变研发的抑制剂，像索托拉西布（sotorasib）和阿达格拉西布（adagrasib），虽然在临床试验中初露锋芒，但原发性和获得性耐药却成了它们发挥更大作用的 “拦路虎”，患者的总生存期并未得到明显改善。因此，寻找新的治疗策略迫在眉睫。
上海交通大学医学院附属上海胸科医院和上海交通大学医学院基础医学院的研究人员，开展了一项关于联合用药治疗 NSCLC 的研究。他们发现，安罗替尼（anlotinib）联合 KRAS-G12C 抑制剂，能够有效克服原发性和获得性耐药，显著抑制肿瘤生长。这一研究成果发表在《Cell Death and Disease》杂志上，为 NSCLC 患者带来了新的希望。
研究人员采用了多种关键技术方法。细胞实验方面，使用多种 NSCLC 细胞系，通过细胞活力、集落形成、伤口愈合等实验检测细胞增殖、迁移能力；利用流式细胞术分析细胞周期和凋亡情况。分子生物学实验上，运用转录组测序（RNA-seq）、定量 PCR（qPCR）和蛋白质免疫印迹（Western blotting）技术，探究基因和蛋白表达变化。动物实验则构建细胞来源的异种移植（CDX）模型，观察联合用药对肿瘤生长的影响，并通过免疫组化分析肿瘤组织相关蛋白表达 。此外，研究还使用了组织微阵列（TMA）分析临床样本。
研究结果
- 安罗替尼增强耐药细胞对 KRAS-G12C 抑制剂的敏感性：研究人员检测了不同 NSCLC 细胞系对索托拉西布的敏感性，筛选出原发性耐药细胞系。同时，构建获得性耐药细胞系。细胞活力和协同分析表明，安罗替尼能剂量依赖性增强索托拉西布和阿达格拉西布的效果，抑制细胞生长、迁移和长期存活12。
- 联合治疗诱导细胞周期阻滞和凋亡：联合治疗在原发性耐药细胞系中诱导 G1期阻滞，在获得性耐药细胞系中诱导 G1和 G2/M 期阻滞，均减少 S 期细胞比例。同时，联合治疗诱导的凋亡率显著高于单药治疗，机制与抑制抗凋亡蛋白有关34。
- 安罗替尼增敏作用由抑制 c-Myc 介导：研究发现，安罗替尼和索托拉西布对经典 RAS 信号通路影响有限。转录组分析表明，c-Myc 在耐药细胞中高表达，联合治疗可有效抑制其表达。c-Myc 过表达降低细胞对索托拉西布敏感性，联合安罗替尼可逆转这一影响56。
- c-Myc/ORC2 轴是联合治疗关键信号通路：分析发现 EIF4E、COPS5 和 ORC2 在联合治疗后显著下调，其中 ORC2 在耐药细胞中高表达。ORC2 敲低可恢复细胞对索托拉西布敏感性，逆转 c-Myc 过表达的保护作用，表明 c-Myc/ORC2 轴在联合治疗中起关键作用78。
- 联合治疗在体内有效抑制肿瘤生长：在 H23 和 H2122SR CDX 模型中，联合治疗显著抑制肿瘤生长，且不影响小鼠体重。免疫组化分析显示，联合治疗降低肿瘤组织中 Ki-67、c-Myc 和 ORC2 表达。TMA 分析表明，c-Myc 和 ORC2 共高表达与 NSCLC 患者不良生存结局相关910。
研究结论与讨论
本研究表明，安罗替尼联合 KRAS-G12C 抑制剂通过调节 c-Myc/ORC2 信号轴，有效克服原发性和获得性耐药，显著抑制肿瘤生长。这一联合治疗策略在多种耐药 NSCLC 细胞系和体内模型中均展现出良好效果，为 NSCLC 治疗提供了新的方向。不过，该联合策略在其他 KRAS-G12C 突变癌症中的适用性、长期安全性和疗效，以及 c-Myc 抑制机制等问题，还需要进一步研究探索。总体而言，这项研究为 NSCLC 患者带来了新的治疗希望，有望推动精准医学在肺癌治疗领域的发展。
