维奈克拉联合西达本胺：难治性转化型滤泡性淋巴瘤的新希望

转化型滤泡性淋巴瘤（t-FL）治疗棘手，预后差。研究人员开展了维奈克拉与西达本胺联合治疗 t-FL 的研究。结果显示，二者联用可抑制 t-FL 细胞增殖、诱导凋亡等，为 t-FL 治疗提供了新策略。

　　在血液肿瘤的世界里，转化型滤泡性淋巴瘤（transformed follicular lymphoma，t-FL）是一个令人头疼的难题。它是由滤泡性淋巴瘤转化而来的侵袭性亚型，病情进展迅速，患者的 5 年生存率仅为 20 - 30%。当前的治疗策略，无论是化疗、干细胞移植还是细胞治疗，都存在诸多局限。化疗效果有限且易复发，干细胞移植或细胞治疗仅适用于部分符合条件的患者，这使得寻找更有效的治疗方法成为当务之急。

在此背景下，厦门大学附属第一医院及厦门大学血液病研究所等机构的研究人员开展了一项意义重大的研究。他们旨在探索一种新的联合治疗方案，以改善 t-FL 患者的治疗效果。研究结果表明，维奈克拉（venetoclax）与西达本胺（chidamide）联合使用，在 t-FL 的临床前模型中展现出强大的抗癌效果，为 t-FL 的治疗带来了新的希望。该研究成果发表在《Clinical Epigenetics》杂志上。

研究人员采用了多种关键技术方法来开展此项研究。首先是高通量筛选（high-throughput screening，HTS）技术，用于评估多种药物组合的协同效应；其次运用细胞系和原代样本进行体外实验，深入研究药物对 t-FL 细胞的作用；还建立了细胞系来源的异种移植（cell line-derived xenograft，CDX）动物模型进行体内疗效测试；此外，通过 RNA 测序（RNA-seq）和蛋白质免疫印迹（Western blot）分析等技术探究联合治疗的分子机制。

研究结果主要包括以下几个方面：

• 高通量筛选药物组合：研究人员通过 HTS 技术，对与西达本胺联合的七种药物进行筛选，发现维奈克拉与西达本胺联合在多个 t-FL 细胞系中展现出显著的抑制细胞增殖和诱导凋亡的效果。
• 联合用药对细胞增殖的影响：在二次验证实验中，选择了四个 t-FL 细胞系，结果显示西达本胺或维奈克拉单独使用时，均可抑制细胞增殖，且联合治疗的抑制效果更显著，组合指数（combination index，CI）小于 1，表明二者具有协同作用。同时，使用泛半胱天冬酶抑制剂 Z-VAD-FMK 处理细胞后发现，联合用药对细胞增殖的抑制作用与半胱天冬酶途径相关。
• 联合用药诱导细胞凋亡：在四个 t-FL 细胞系中，联合治疗显著提高了细胞凋亡水平。通过检测半胱天冬酶家族蛋白的表达，发现联合治疗可触发半胱天冬酶 - 3 的切割，同时还检测到半胱天冬酶 - 9、半胱天冬酶 - 8 和聚（ADP - 核糖）聚合酶（PARP）的变化，表明联合用药通过激活内源性和外源性凋亡途径，诱导细胞凋亡。此外，联合治疗还降低了线粒体膜电位，进一步证实其诱导线粒体损伤和激活凋亡的作用。
• 联合用药对细胞周期的影响：细胞周期实验表明，联合治疗可使 t-FL 细胞阻滞在 G₀/G₁期，并诱导细胞进入亚 G₁期。通过 Western blot 分析发现，联合治疗后，与 G₀/G₁期检查点相关的蛋白标记物表达水平发生变化，如 p53、细胞周期蛋白 E1（Cyclin E1）、细胞周期蛋白依赖性激酶 2（CDK2）、细胞周期蛋白 D1（Cyclin D1）和细胞周期蛋白依赖性激酶 4（CDK4）等蛋白表达水平降低，而 p21 和 p27 蛋白水平在部分细胞系中升高，这表明联合治疗可诱导细胞周期阻滞和凋亡，抑制 t-FL 细胞增殖。
• 联合用药对基因表达的影响：对 SU-DHL4 细胞进行 RNA-seq 分析，发现联合治疗后，基因表达发生改变，其中 Wnt 信号通路受到显著调节。通过 Western blot 验证，发现联合治疗可显著降低 Wnt 信号通路关键蛋白的表达水平，如 Wnt3a、Wnt5a/b、β - 连环蛋白（β - catenin）和磷酸化糖原合成酶激酶 3β（phosphorylated GSK3β）等，表明联合治疗可抑制 Wnt 信号通路。此外，联合治疗还可降低抗凋亡蛋白 BCL-xL 和髓细胞白血病 - 1 蛋白（MCL-1）的表达水平，提高促凋亡蛋白 Bid 的表达水平，同时降低组蛋白去乙酰化酶 1（HDAC1）、HDAC2、HDAC3 和 HDAC10 的蛋白水平，这些变化有助于增强联合治疗的抗癌效果。
• 联合用药的体内疗效：在健康野生型小鼠中进行的药物毒性测试表明，维奈克拉和西达本胺联合用药的安全性可接受。在 t-FL 的 CDX 小鼠模型中，联合治疗显著抑制了肿瘤的生长，减小了肿瘤体积和重量，延长了小鼠的生存期，且对小鼠的体重和肝肾功能影响较小。通过对肿瘤组织的免疫组化染色和蛋白质分析发现，联合治疗可抑制肿瘤细胞增殖，促进细胞凋亡，其机制与抑制 Wnt 信号通路有关。
• 联合用药对原发性 B 细胞淋巴瘤的作用：对临床样本的研究发现，联合治疗可显著增强原发性 B 细胞淋巴瘤患者淋巴细胞的凋亡水平，且对健康供者的外周血单个核细胞（PBMCs）无细胞毒性，表明联合治疗具有选择性靶向原发性淋巴瘤细胞的能力，这对于减少治疗的副作用和提高患者的治疗效果具有重要意义。

研究结论和讨论部分指出，t-FL 是一种具有挑战性的血液肿瘤，西达本胺单药治疗虽有一定效果，但存在局限性，如副作用和耐药性等问题。本研究通过 HTS 技术筛选出维奈克拉与西达本胺联合治疗 t-FL 的方案，在体外实验和动物模型中均展现出显著的抗癌效果。联合治疗通过抑制 Wnt 信号通路、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期等多种机制发挥作用，且在体内具有良好的耐受性，选择性地靶向原发性淋巴瘤细胞而不影响正常细胞。这一研究结果为 t-FL 的治疗提供了一种新的、有前景的联合治疗方案，有望在未来的临床试验中进一步验证其有效性和安全性，为 t-FL 患者带来新的希望。