术后椎间盘组织稳定性研究：为自体软骨细胞疗法 “保驾护航”

为解决椎间盘组织运输至符合药品生产质量管理规范（GMP）的细胞培养设施可能出现的延迟问题，研究人员开展了评估手术切除椎间盘组织在适当储存不同时长下稳定性的研究。结果显示，24 小时内超 80% 组织保持活力，96 小时培养成功率降至 30%，但细胞免疫表型不变。该研究有助于规划自体软骨细胞治疗背痛方案。

　　利用手术切除椎间盘组织中自体、体外（ex vivo）扩增的软骨细胞进行细胞治疗，已成为椎间盘退变患者有前景的治疗选择。其中关键在于需在符合药品生产质量管理规范（Good Manufacturing Practice，GMP）的组织培养设施中培养细胞。考虑到椎间盘组织运输至集中细胞培养设施时可能出现延误，本研究旨在评估手术切除的椎间盘组织在适当储存不同时长下的稳定性。
将手术切除的椎间盘组织在 4°C 生理盐水中储存不同时长，然后在添加人血小板裂解物的杜氏改良 Eagle 培养基（Dulbecco’s Modified Eagle Medium，DMEM）中进行体外（in vitro）培养。使用一组已报道的软骨细胞特异性抗体，包括分化簇 73（Cluster of Differentiation 73，CD73）、CD90、CD105、CD166、CD14、人白细胞抗原 DR（Human Leukocyte Antigen DR，HLA-DR）和 CD34 进行免疫表型分析以验证。
研究发现，直至 24 小时，超过 80% 的组织因细胞生长而保持活力，之后若储存长达 96 小时，软骨细胞的培养成功率降至近 30%。但在所有时间点，细胞的免疫表型均相同。对于细胞治疗而言，手术切除的椎间盘组织最好在术后 24 小时内进行体外扩增，尽管无论储存时长如何，所有成功培养的细胞都表达相同的表型标记。这项研究将有助于规划针对背痛的自体软骨细胞治疗方案，特别是当组织需要运输至较远的 GMP 设施时。