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在兽医领域,脂肪组织来源的间充质干细胞(MSCs)用于治疗犬类疾病存在诸多问题。研究人员开展犬脐带 MSCs 分离优化方案的研究,发现 COL 和 TRIP+COL 方案在细胞数量和质量上更优,COL 方案最佳,为兽医治疗提供新方向。
间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)凭借其免疫调节和抗炎特性,拥有治疗疾病的潜力。在兽医学中,脂肪组织是获取 MSCs 治疗犬类疾病最常用的来源,但采集过程具有侵入性,且细胞会受供体年龄和健康状况的影响。这些问题促使人们积极寻找 MSCs 的替代来源,围产期组织便是其中之一。
在这项研究中,研究人员开发并验证了一种优化的犬脐带 MSCs 分离方案,旨在应用于兽医治疗。研究人员从剖腹产获取的脐带入手,采用三种不同的方案处理脐带,这些方案涉及机械和酶解组织解离的不同组合。随后,对获取的细胞进行培养,并利用流式细胞术检测细胞膜受体,以此鉴定 MSCs,同时评估细胞的分化能力。
结果显示,胰蛋白酶和胶原酶联合方案(TRIP+COL)与单独胶原酶方案(COL)获取的细胞数量并无显著差异。在体外培养时,TRIP+COL 和 COL 方案在首次传代时,分别比组织块培养(EXP)组多产生 12 - 14 倍的细胞,且培养天数更少。此外,这两种方案获取的细胞在传代过程中展现出更强的扩增能力,细胞呈现成纤维细胞样形态,且在传至第 6 代时仍具备增殖能力。通过表型鉴定,这些细胞呈现 CD45?、CD34?、CD14?、HLA - DR?、CD29+、CD44+和 CD90+的特征,符合 MSCs 的身份标识,不过细胞中的 CD90 表达在第 6 代时显著下降。在分化能力方面,COL 方案获取的细胞表现出向软骨和骨谱系分化的能力。
综上所述,COL 和 TRIP+COL 方案在分离细胞的数量和质量上均优于 EXP 方案。考虑到 COL 方案酶解作用相对温和,研究人员认为它是获取犬 MSCs 的最佳方法。