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对虾易感染白斑综合征病毒（WSSV），现有 DNA 提取技术存在局限。研究人员对比 DMSO、酚 - 氯仿和盐酸胍（GHCL）技术。结果显示，DMSO 法 DNA 产量高（378.4 ng/μL）、检测限低至 10??。该方法为水产养殖疾病诊断带来新方案。
在广袤的海洋世界里，对虾是重要的水产养殖品种，为人们提供了丰富的蛋白质。然而，白斑综合征病毒（White Spot Syndrome Virus，WSSV）却如同一颗 “定时炸弹”，严重威胁着对虾的生存，一旦爆发，会导致大量对虾死亡，给水产养殖业带来巨大损失。在分子生物学研究中，DNA 提取是至关重要的环节，其质量直接影响后续的分析结果。但传统的 DNA 提取方法，像酚 - 氯仿和盐酸胍（Guanidium Hydrochloride，GHCL）法，存在着操作繁琐、耗时久等问题，商业 DNA 提取试剂盒又成本高昂，不适合大规模应用于水产养殖研究。因此，寻找一种简单、快速且高效的 DNA 提取方法迫在眉睫。
为了解决这些难题，来自印度韦洛尔理工学院（Vellore Institute of Technology）的研究人员 Vernita Priya 和 Raja Sudhakaran 展开了深入研究。他们致力于开发一种新的 DNA 提取方法，以提高对虾 WSSV 检测的效率和准确性。研究结果表明，基于二甲亚砜（Dimethyl Sulfoxide，DMSO）的 DNA 提取方法展现出显著优势，为水产养殖疾病诊断提供了新的有力工具，该研究成果发表在《Scientific Reports》上。
研究人员采用了多种关键技术方法。在样本采集方面，他们从印度泰米尔纳德邦金奈东北角收集了 30 只疑似感染 WSSV 的凡纳滨对虾（Litopennaeus vannamei），并选取肌肉组织作为检测样本。在 DNA 提取阶段，使用含有 DMSO 的裂解缓冲液和相关沉淀缓冲液进行操作，并与酚 - 氯仿和 GHCL 法对比。之后，运用分光光度计测定 DNA 浓度和纯度，通过聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）评估 DNA 提取物的扩增适用性，利用实时荧光定量 PCR（qPCR）测定 DNA 的拷贝数。
研究结果如下：
- DNA 质量和数量评估：通过对比三种提取技术，发现 DMSO 法的 DNA 产量（378.4 ng/μL）显著高于酚 - 氯仿法（267.8 ng/μL）和 GHCL 法（151.2 ng/μL） 。在纯度方面，DMSO 法的纯度比值为 1.88，酚 - 氯仿法为 2.0，GHCL 法为 1.8。这表明 DMSO 法在提取 DNA 时，能更有效地从样本基质中获取 DNA，且污染较少。
- 敏感性分析：PCR 检测结果显示，DMSO 提取法的灵敏度远超酚 - 氯仿和 GHCL 法。酚 - 氯仿和 GHCL 法只能检测到浓度为 10??的 DNA，而 DMSO 法能检测到低至 10??稀释度的 WSSV DNA，这意味着 DMSO 法在低浓度 DNA 检测上具有更大优势。
- 拷贝数评估：实时荧光定量 PCR 结果显示，DMSO 法获得的拷贝数（4.89E + 09）明显高于酚 - 氯仿法（7.78E + 06）和 GHCL 法（4.16E + 07） 。这进一步证明 DMSO 法在提取病毒 DNA 时，能实现更高质量和产量的提取，为后续分析提供更有利的条件。
综合研究结果和讨论部分，DMSO 法在对虾 WSSV 检测的 DNA 提取中具有诸多优势。它能够高效裂解富含几丁质的虾类组织，有效避免 DNA 降解，减少污染，且操作更安全、简便、经济。这一方法不仅适用于对虾 WSSV 检测，还可能为其他水生生物疾病诊断中的 DNA 提取提供借鉴，为水产养殖业的健康发展提供了重要的技术支持，推动了水产养殖疾病诊断领域的进步。
