UV-Vis 导数分光光度法监测蓝藻:溶解有机碳、浊度和盐度影响下的关键突破与应用前景

【字体: 时间:2025年05月06日 来源:Cleaner Water

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  为解决蓝藻水华早期检测和常规监测难题,研究人员开展 “溶解有机碳、浊度和盐度对 UV-Vis 导数分光光度法检测和监测蓝藻的影响” 研究。结果表明该方法结合 100mm 比色皿和导数分光光度法可用于监测蓝藻。其对保障水源安全意义重大。

  在地球的水域中,蓝藻(Cyanobacteria,CB)这个微小却能量巨大的生物,正引发着越来越严峻的环境问题。蓝藻水华频繁爆发,不仅会产生有毒物质,还会造成水体异味、变色,甚至形成浮沫,严重影响水质,给供水安全带来极大挑战。据研究,受有毒蓝藻水华影响的水源,会让水处理厂增加数百万美元的运营成本。当前的蓝藻监测技术,像直接计数法、实时定量聚合酶链反应(qPCR)、遥感和基于荧光法的探头技术等,都存在各自的缺陷。直接计数法依赖专业人员且无法现场检测;qPCR 等技术虽理论上可估计细胞或毒素浓度,但受水质和蓝藻多变性影响,准确性和重复性欠佳,荧光法还易受多种因素干扰。因此,开发一种更可靠的蓝藻监测技术迫在眉睫。
在此背景下,来自国外研究机构的研究人员展开了一项关于 “溶解有机碳(Dissolved Organic Carbon,DOC)、浊度和盐度对 UV-Vis 导数分光光度法检测和监测蓝藻的影响” 的研究,该研究成果发表在《Cleaner Water》上。

研究人员为了探究这一课题,采用了多种关键技术方法。首先,培养非产毒的铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)作为研究对象,通过特定的无菌培养条件获得实验样本。在样本处理上,利用离心分离等方式将微囊藻从生长培养基中分离出来,并在不同的水基质(模拟不同盐度、DOC 和浊度条件)中进行稀释。之后,使用 Jenway 6850 双光束分光光度计和不同光程(10 - 、50 - 和 100 - mm)的石英比色皿对样本进行分析,同时运用 Savitzky - Golay(S - G)一阶导数吸光度技术处理数据,以提高检测的灵敏度和准确性,还依据特定方法计算了检测限(Method Detection Limit,MDL)。

下面来看具体的研究结果:

  • 分光光度测量结果:研究人员测定了不同浓度铜绿微囊藻在不同水基质中的吸光度光谱,发现光谱在 442 - 、632 - 和 682 - nm 处有吸收峰,其中 682 - nm 处的吸收峰最显著。随着蓝藻细胞浓度增加,吸光度也增加,符合比尔 - 朗伯定律(Beer - Lambert Law)。除 50 和 100 NTU 浊度的结果外,蓝藻浓度与 632 - 和 682 - nm 处的吸光度之间有很强的线性关系(R2 > 0.9),50 和 100 NTU 浊度结果也呈正相关(R2 > 0.8)。同时,随着水质参数(Water Quality Parameters,WQPs)浓度增加,数据线性度和回归线斜率下降,MDL 上升。100mm 光程比 50mm 光程的检测灵敏度更高。
  • S - G 一阶导数吸光度结果:对吸光度数据应用 S - G 一阶导数技术后,在 660 - 和 706 - nm 处出现了新的特征峰。与零阶吸光度相比,除高浊度(50 和 100 NTU)情况外,其他 WQPs 测试中叶绿素 a(Chl - a)和藻蓝蛋白(Phycocyanin,PC)峰的吸光度响应更强。应用 S - G 导数技术后,所有 WQPs 测试的检测限至少提高了 2 倍。
  • 修改 S - G 技术应用范围的结果:研究人员尝试将 S - G 技术应用于更窄的波长范围,结果发现并未提高对铜绿微囊藻的检测限。
  • 不同水基质光谱比较结果:对比去离子水和不同 WQPs 条件下铜绿微囊藻的吸光度光谱,发现主要吸收峰的波长一致,但去离子水中能更清晰地观察到 Chl - a 和 PC 的峰,且去离子水中的 MDL 低于 WQPs 测试中的最低值。在较低 WQPs 水平下,去离子水和 WQPs 的校准曲线斜率相关性较好,而在较高 WQPs 水平下,斜率出现偏差。

综合研究结果和讨论部分,该研究意义重大。研究表明,尽管水质参数多变,但结合导数分光光度法和 100mm 比色皿光程,该方法可用于不同水源水中蓝藻的检测和监测。除 100 NTU 浊度和 30 ppt 盐度测试外,大部分采用 S - G 方法得到的检测限低于世界卫生组织(WHO)规定的 20,000 cells/mL 的标准,这意味着该方法有望成为蓝藻实时监测和早期检测的有效工具。此外,分光光度法可同时测量多种水质参数和微藻光合色素,能通过在线分光光度计实现藻类浓度的实时定量,且无需样本预处理,操作简便。虽然该方法在检测灵敏度等方面存在一定局限性,但在多参数监测和现场应用方面具有独特优势,能为水资源管理部门提供重要的决策依据,助力保障水源水的安全。

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