基于LC-MS/MS的夜间唾液皮质醇与皮质酮临界值确立及其在肿瘤性高皮质醇症诊断中的优化价值

为解决肿瘤性高皮质醇症诊断中夜间唾液皮质醇(CortisolLNSa)和皮质酮(CortisoneLNSa)临界值差异大、准确性不足的问题，阿姆斯特丹大学医学中心团队通过LC-MS/MS技术开展回顾性研究，确立CortisolLNSa（2.25 nmol/L）和CortisoneLNSa（15.5 nmol/L）的优化临界值，证明后者诊断效能更优（敏感性93.8%，特异性94.5%），为临床筛查提供更可靠依据。

　　

论文解读

在临床内分泌学领域，肿瘤性高皮质醇症（如库欣综合征）的诊断始终面临巨大挑战。这种由ACTH或皮质醇分泌性肿瘤引发的疾病，典型表现为昼夜节律紊乱——正常人在深夜本该降至低谷的皮质醇水平，患者却持续居高不下。尽管夜间唾液皮质醇(Cortisol_LNSa)检测因其无创、居家可操作性强被列为推荐初筛手段，但现有研究给出的临界值从1.9到5.1 nmol/L不等，差异悬殊。更棘手的是，传统免疫分析法易受皮质酮交叉反应干扰，而唾液皮质酮(Cortisol_LNSa)作为皮质醇的代谢产物，其诊断潜力尚未形成共识。这种混乱局面导致临床误诊率升高，患者可能因"假阳性"结果承受不必要的侵入性检查，或因"假阴性"延误治疗。

阿姆斯特丹大学医学中心的研究团队决心破解这一困局。他们采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)这一高特异性技术，对2015-2022年间455例筛查对象（25例确诊肿瘤性高皮质醇症，430例经长期随访排除）的夜间唾液样本展开回顾性分析。研究设计严格以组织病理学和术后临床缓解为金标准，排除仅依赖生化检测确诊的病例，确保结论的可靠性。

关键技术方法包括：1）标准化唾液采集流程（22:00-23:59使用合成纤维拭子）；2）同位素稀释LC-MS/MS同步检测Cortisol_LNSa和Cortisol_LNSa（定量下限1 nmol/L）；3）ROC曲线分析确定最佳临界值；4）35个月中位随访验证非病例组排除标准。

研究结果

患者特征与样本
确诊组较非确诊组更年轻（43 vs 57岁，p<0.001）且舒张压更高（89 vs 77 mmHg，p<0.001）。80%确诊者因临床症状就诊，而63.4%非确诊者源于肾上腺意外瘤筛查，后者仅1.1%最终确诊，提示影像学技术进步可能降低意外瘤的恶性风险。

生物标志物性能
Cortisol_LNSa中位数在确诊组达7.8 nmol/L，显著高于非确诊组0.8 nmol/L（p<0.001）。ROC分析显示其最佳临界值为2.25 nmol/L（敏感性92%，特异性89%）。而Cortisol_LNSa表现更优：确诊组中位数35.5 nmol/L vs 非确诊组5.3 nmol/L（p<0.001），15.5 nmol/L临界值对应敏感性93.8%、特异性94.5%，阳性预测值提升至46.9%（Cortisol_LNSa仅32.9%）。

假阳性因素
活动性恶性肿瘤患者更易出现Cortisol_LNSa假阳性（21.3% vs 6.0%，p<0.001），而阻塞性睡眠呼吸暂停(OSAS)与Cortisol_LNSa假阳性相关（29.4% vs 11.9%，p=0.04），但排除这些因素未改变临界值。

结论与意义
该研究首次在严格临床终点验证的基础上，确立LC-MS/MS检测下Cortisol_LNSa和Cortisol_LNSa的优化临界值。尤为重要的是，发现Cortisol_LNSa因受11β-HSD2酶转化调控，受外界干扰更少，诊断准确性显著超越传统Cortisol_LNSa。这一发现为《Clinica Chimica Acta》的读者提供了明确的技术选择依据：在资源允许的情况下，应优先采用LC-MS/MS检测Cortisol_LNSa，或至少将其作为Cortisol_LNSa的补充指标。研究同时警示临床需警惕活动性肿瘤和OSAS患者的假阳性风险，但强调这些共存疾病不应影响临界值设定。

这项研究的价值不仅在于提供具体数值，更在于其方法学突破——通过长期随访的临床终点而非生化结果作为参照，避免了现有文献中"循环论证"的缺陷。团队建议全球实验室在采用这些临界值前进行方法学比对，以推动肿瘤性高皮质醇症诊断标准的统一化进程，最终减少患者的诊断延迟与重复检测负担。