绿原酸对黄喉拟水龟生长性能、免疫调节及肠道微生态的优化作用及其分子机制

本研究针对黄喉拟水龟(Mauremys mutica)养殖中存在的生长缓慢、免疫力低下及肠道健康问题，通过添加100-800 mg/kg绿原酸(CGA)探究其对生长性能、消化酶活性、抗氧化指标(如SOD、CAT、MDA)、非特异性免疫因子(ACP、AKP、C3/C4)及肠道菌群的影响。结果表明200 mg/kg CGA显著提升增重率(WGR)47.52%、降低饲料系数(FCR)至2.55，上调Cetobacterium丰度并下调Escherichia_Shigella，通过调控MHC I/II基因表达抑制Th1/Th17炎症通路，为水产饲料添加剂开发提供科学依据。

　　

论文解读
在龟类养殖业快速发展的背景下，黄喉拟水龟作为我国重要的经济龟种，却面临着集约化养殖导致的生长迟缓、疾病频发等严峻挑战。传统抗生素的滥用更引发耐药性和药物残留问题，亟需寻找安全高效的饲料替代方案。绿原酸(CGA)作为杜仲等传统中药的核心活性成分，虽在鱼类中已证实具有促生长和免疫增强作用，但龟类与鱼类在免疫系统和生理特性上存在显著差异，其作用机制尚属空白。广西大学的研究团队在《Aquaculture Reports》发表的研究，首次系统揭示了CGA对黄喉拟水龟的多维调控机制。

研究采用5组等氮等脂饲料设计（0-800 mg/kg CGA），通过60天养殖实验结合16S rRNA测序和肝脏转录组分析。关键技术包括：生长性能参数（WGR、SGR、FCR）计算、肠道消化酶（淀粉酶/脂肪酶/胰蛋白酶）活性检测、血清抗氧化（SOD/CAT/MDA）和免疫指标（ACP/AKP/C3/C4）测定、肠道形态学HE染色观察、Illumina NovaSeq 6000转录组测序及qPCR验证。

3.1 生长性能
200 mg/kg CGA组表现最优，增重率提升25.9%（47.52% vs 对照组37.73%），饲料转化率降低21%（2.55 vs 3.23）。回归分析显示最佳促生长剂量为197.50-296.22 mg/kg。

3.2 消化酶与肠道形态
CGA2组三种消化酶活性达峰值，胰蛋白酶活性较对照组提高1.8倍。肠道绒毛长度增加52%（1.49 mm vs 0.98 mm），但800 mg/kg组出现绒毛断裂，提示高剂量可能产生损伤。

3.3 免疫与抗氧化
200 mg/kg CGA使血清SOD活性提升至359.39 U/mL，MDA含量降低32%。补体C3/C4水平分别提高53%和41%，非特异性免疫酶ACP/AKP活性达峰值。

3.5 肠道菌群
CGA显著增加Cetobacterium相对丰度（9.71%→24.3%），减少Escherichia_Shigella（7.2%→3.5%）。Alpha多样性显示ACE指数提升44%，但800 mg/kg组Shannon指数降低21%，提示CGA优化菌群结构但可能降低多样性。

3.6 转录组机制
关键发现是200 mg/kg CGA显著下调MHC II基因表达（log₂FC<-1），KEGG富集到Th1/Th2分化、哮喘等免疫通路。验证基因HLA class II和FOS表达趋势与测序结果一致，证实CGA通过抑制MHC分子调控T细胞分化，缓解过度免疫反应。

这项研究不仅确立了197.50-359.39 mg/kg的CGA最佳添加剂量，更创新性地揭示了其在龟类中的"肠道-肝脏轴"调控机制：通过促进有益菌定植增强营养吸收，同时下调MHC II介导的炎症通路，实现生长与免疫的双重提升。该成果为水产无抗养殖提供了理论支撑，也为爬行动物免疫调节研究开辟了新视角。值得注意的是，研究首次发现龟类与鱼类对CGA的响应差异——龟类需要更高剂量（200 vs 鱼类100 mg/kg）才能激活最佳免疫效果，这与其更复杂的免疫系统进化特征相吻合。未来研究可进一步探索CGA在龟类疫苗免疫中的协同作用。