固定化细胞发酵生产丙酸:突破传统局限,开启绿色高效新篇

【字体: 时间:2025年05月06日 来源:Biomass and Bioenergy 5.8

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  丙酸(PA)作为食品防腐剂和化学原料需求大,传统微生物发酵生产 PA 面临生产力低等问题。研究人员以嗜酸丙酸杆菌(P.acidipropionici)FS1026 为对象,优化固定化细胞发酵条件,提高了 PA 产量,为 PA 生产提供新途径,具有工业应用潜力。

  在食品和化工领域,丙酸(Propionic Acid,PA)可是个 “大明星”。它既能有效抑制细菌和霉菌,保障食品的新鲜度和安全性,作为食品防腐剂广泛应用于食品、粮食和饲料加工行业;又是生产农药、香料、药品等的关键中间原料,全球对它的需求持续攀升。
目前,PA 主要通过石化方法合成。但随着油价上涨,人们环保意识增强,对生物基产品愈发青睐,微生物发酵法生产 PA 逐渐进入人们的视野。微生物发酵利用可持续原料,操作条件温和,对环境更友好。在众多产 PA 微生物中,嗜酸丙酸杆菌(P.acidipropionici)凭借对酸性环境的高耐受性,成为发酵生产 PA 的 “潜力股”。

然而,传统的游离细胞发酵却像是前进路上的 “绊脚石”。在厌氧、低 pH 的发酵环境下,细菌增殖和生物量积累受到抑制,发酵时间拉长,生产效率大打折扣。而且,细胞在这样的环境中较为脆弱,稳定性差,每批发酵前都得重新制备发酵细菌,既耗费试剂和能源,又不利于连续发酵。

为了突破这些困境,福建师范大学生命科学学院的研究人员开展了一项意义重大的研究。他们以P.acidipropionici FS1026 为研究对象,选用海藻酸钠和聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)作为复合载体,制备固定化颗粒用于 PA 发酵,并对固定化颗粒的制备条件以及发酵过程进行优化。这项研究成果发表在《Biomass and Bioenergy》上,为 PA 的生产开辟了新的技术路径,在工业生产和环境保护方面都具有重要意义。

研究人员采用的主要关键技术方法包括:细胞固定化技术,利用海藻酸钠和 PVA 作为复合载体,将P.acidipropionici细胞固定在特定空间区域,增强细胞稳定性;优化实验,通过一系列实验分别优化固定化颗粒制备条件和发酵过程参数,确定最佳发酵条件。

1. 菌株生长曲线测定


研究人员对P.acidipropionici FS1026 菌株进行培养,测定其生长曲线。结果显示,在 0 - 32 小时,细菌生长缓慢,处于迟缓期;32 - 72 小时,生长迅速加快,进入对数生长期;72 小时后,生长趋于稳定,进入稳定期,后期细菌数量逐渐下降。这一结果为后续实验选择合适的发酵时间提供了重要依据。

2. 固定化条件优化


经过大量实验,研究人员确定了最佳固定化条件:PVA 浓度为 10.8g/L,海藻酸钠浓度为 1.5g/L,固定化溶液由 2% CaCl2和 50g/L 硼酸混合而成,细菌包埋量为 12%,固定化时间为 8 小时。在这样的条件下制备的固定化颗粒,有利于细胞的固定和后续发酵。

3. 发酵培养基优化


研究发现,固定化细胞发酵 PA 的最佳培养基组成为:葡萄糖 75.41g/L、酵母粉 30g/L、蛋白胨 16.31g/L、K2HPO4 24g/L、MgSO4 0.7g/L。优化后的培养基为细胞生长和 PA 合成提供了更适宜的营养环境。

4. 连续发酵实验


固定化细胞在连续 10 批发酵过程中表现出色,PA 产量稳定,平均产量达到 26.31g/L,证明了该发酵工艺具有良好的操作稳定性和重复性,为工业化连续生产提供了可能。

5. 发酵过程优化


在发酵过程优化实验中,研究人员对比了使用氨水和 Ca (OH)2调节 pH 的效果,发现使用氨水调节 pH 更有利于 PA 的合成。同时,确定了最佳葡萄糖补充间隔为每 24 小时一次,每次补充 35g/L,在这样的条件下,PA 产量高达 42.76g/L,远远超过游离细胞发酵的产量(20.33g/L)。

研究结论表明,利用海藻酸钠 - PVA 复合载体固定P.acidipropionici FS1026 细胞进行 PA 发酵,通过优化固定化条件和发酵过程,显著提高了 PA 的产量和发酵效率。固定化细胞发酵在连续发酵过程中展现出良好的稳定性,为 PA 的工业化生产提供了可靠的技术支持。而且,这种发酵方式减少了试剂和能源的消耗,缩短了发酵周期,符合绿色环保的发展理念。

从更广泛的意义来看,该研究成果不仅为 PA 生产行业带来了新的希望,有望降低生产成本,提高产品质量;还为其他微生物发酵生产领域提供了宝贵的借鉴经验,推动了生物发酵技术的进一步发展。未来,随着研究的不断深入和技术的持续改进,固定化细胞发酵技术有望在更多领域得到应用,为实现可持续发展贡献更多力量。

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