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"叶间至布基实验室:空间DNA纳米机器人协同二维石墨炔实现甘蔗梢枯病超精准电化学追踪"
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年05月06日 来源:Biosensors and Bioelectronics 10.7
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针对甘蔗梢枯病早期诊断难题,广西科学院团队创新性开发了基于DNA Walker与硫掺杂石墨炔(S-GDY)协同的"Lab-on-Cloth"电化学生物传感器。该技术通过空间限域DNA Walker双循环链置换扩增(SDA)和S-GDY/AuNPs异质结构增强电子传递,实现16.6 aM的超低检测限,较传统qPCR显著提升田间检测效率,为精准农业提供革命性工具。
【研究背景】
在全球能源转型与粮食安全双重挑战下,甘蔗作为重要生物能源作物,其产量正遭受梢枯病的严重威胁。这种由真菌引起的病害早期症状隐蔽,传统检测依赖实验室qPCR等耗时方法,难以满足田间实时监测需求。现有生物传感器虽具便携优势,但面临信号放大效率低、电子传递速率慢等瓶颈。如何将纳米材料的高效催化特性与DNA纳米技术的精准识别相结合,构建超灵敏的现场检测系统,成为农业病害监测领域亟待突破的科学难题。
【技术方法】
广西科学院研究团队通过三步创新策略:1) 构建Phi29 DNA聚合酶/Nb.BbvCI限制酶驱动的空间限域DNA Walker系统,实现靶标触发的双循环SDA扩增;2) 采用气相沉积法制备硫掺杂石墨炔(S-GDY)纳米阵列,与金纳米粒子(AuNPs)形成三维导电网络;3) 在碳布基底集成HCR信号放大与[Ru(NH3)6]3+介导的闭环电路,建立双信号自验证机制。
【研究结果】
材料表征
SEM/TEM显示S-GDY呈现不规则团聚结构,AuNPs均匀负载(粒径15±3 nm)。XPS证实硫成功掺杂形成C-S-C键(结合能164.1 eV),电化学测试显示S-GDY/AuNPs异质结使电子转移速率提升3.2倍。
传感机制优化
通过调整DNA Walker步进臂长度(优化至18 nt)和Nb.BbvCI切割频率(0.5 U/μL),使双循环SDA效率达到单循环的47倍。差分脉冲伏安法(DPV)证实电位分辨信号解耦(-0.35 V/-0.12 V)可消除交叉干扰。
分析性能
在0.1 fM-10 nM范围内呈现线性响应(R2=0.997),检测限低至16.6 aM(信噪比S/N=3)。对镰刀菌属其他菌株的交叉反应性<3.2%,在甘蔗叶片提取液中回收率达98.7%-102.4%。
田间验证
与qPCR对比检测127份田间样本,符合率96.1%(Kappa值=0.92),检测时间从常规4小时缩短至35分钟,且无需冷链运输。
【结论与意义】
该研究开创性地将空间DNA纳米机器人与二维碳材料协同效应应用于植物病害监测,其创新性体现在:1) 首创"双循环SDA-DNA Walker"级联放大系统,突破传统酶促扩增的时空限制;2) 硫掺杂策略使GDY电荷密度提升2.1倍,解决生物传感器界面电子转移瓶颈;3) 柔性碳布基底实现检测成本降低80%,为发展穿戴式植物健康监测设备奠定基础。这项发表于《Biosensors and Bioelectronics》的工作,为应对全球粮食安全挑战提供了颠覆性的技术范式。
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