组氨酸工程化 Cu-BTC 纳米酶:兼具增强漆酶样活性与机器学习助力 β- 内酰胺类抗生素精准识别

【字体: 时间:2025年05月06日 来源:Biosensors and Bioelectronics 10.7

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  β- 内酰胺类抗生素(BLs)广泛应用但不合理使用会造成残留危害健康。现有检测方法存在不足,纳米酶传感器阵列检测 BLs 也受限。研究人员制备 Cu-BTC@His 纳米酶构建三通道阵列,优化机器学习算法,提升检测准确性,有助于复杂样本中 BLs 识别。

  在医疗、畜牧和水产养殖等众多领域,β- 内酰胺类抗生素(BLs)凭借强大的抗菌活性和广谱抗菌特性,成为对抗细菌感染的有力武器。然而,随着其使用量的不断增加,不合理或过度使用的问题日益凸显,这导致食品、环境等介质中出现大量抗生素残留。想象一下,人们在不知不觉中摄入含有这些残留抗生素的食物,长此以往,身体的免疫力会逐渐下降,肝脏和肾脏的功能也可能受到损害,胃肠道也会出现各种不适。为了守护人类健康和生态环境,准确且方便地检测 BLs 就显得尤为重要。
目前,虽然已经探索出多种检测 BLs 的方法,如高性能液相色谱、毛细管电泳等,但这些方法要么仪器昂贵,要么操作繁琐,难以满足实际检测的需求。近年来,基于纳米酶的生物传感器开始用于检测 BLs,可多数纳米酶生物传感器受传统 “锁 - 键” 特异性识别机制的限制,只能检测单一的 BLs,在实际检测中,多种 BLs 往往同时存在,这使得检测结果不尽人意。另外,纳米酶传感器阵列虽有望解决同时检测多种 BLs 的问题,但很多纳米酶的催化效率较低,大大限制了其检测性能。在这样的背景下,一项新的研究应运而生。

研究人员来自未知机构,他们致力于解决当前检测 β- 内酰胺类抗生素存在的问题,开展了关于制备高活性纳米酶并构建传感器阵列用于精准识别 BLs 的研究。最终,他们成功制备出具有高漆酶样(LAC)催化活性的 Cu-BTC@His 纳米酶,并构建了三通道纳米酶传感器阵列,通过优化多种机器学习(ML)算法,将基于该阵列构建的浓度无关检测模型的准确率从 31.27% 大幅提升至 95.92%。这一研究成果发表在《Biosensors and Bioelectronics》,对提高复杂样本中 BLs 的识别能力具有重要意义,同时也为未来设计高活性漆酶样纳米酶提供了参考和指导。

在这项研究中,研究人员运用了多种关键技术方法。首先是化学合成技术,通过在制备 Cu-1,3,5 - 苯三甲酸(Cu-BTC)时引入组氨酸,合成了 Cu-BTC@His 纳米酶。然后采用离心、恒温水浴等常规实验操作对产物进行处理。还利用反应动力学原理构建了三通道纳米酶传感器阵列,结合优化的机器学习算法对检测模型进行优化,以实现对多种 BLs 的检测和识别 。

制备 Cu-BTC@His 纳米酶


研究人员将 Cu (NO3)2·3H2O 和聚乙烯吡咯烷酮 K30 溶解在甲醇溶液中搅拌,再将 1,3,5 - 苯三甲酸和组氨酸溶解于甲醇后滴加到上述混合溶液中,在 25°C 恒温水浴中老化 24 小时,最后离心得到 Cu-BTC@His 纳米酶。这一制备过程为后续实验提供了关键材料。

表征 Cu-BTC@His


通过共沉淀法制备的 Cu-BTC@His 与 Cu-BTC 相比,晶体结构仍呈规则八面体,但 Cu-BTC@His 的晶体尺寸(约 200nm)小于 Cu-BTC(约 500nm),表明组氨酸的引入虽未显著影响晶体结构,但对晶体尺寸产生了影响。这一结构特征可能与纳米酶的催化活性等性能相关。

构建三通道纳米酶传感器阵列并检测 BLs


基于反应动力学构建了三通道纳米酶传感器阵列,利用 β- 内酰胺类抗生素能抑制 Cu-BTC@His 的 LAC 活性,且抑制程度随反应时间增加的特性,该阵列可用于识别九种 BLs,包括氨苄西林二钠盐(AMP)、阿莫西林三水合物(AMO)等。这一成果为同时检测多种 BLs 提供了可行的技术手段。

优化机器学习算法提高检测模型准确率


研究人员优化多种机器学习算法后,基于该阵列构建的浓度无关检测模型准确率从 31.27% 提升到 95.92%,这使得在实际样本中识别未知样品的能力大大增强,提高了检测的可靠性和实用性。

综上所述,该研究成功制备出高 LAC 催化活性的 Cu-BTC@His 纳米酶,并构建了三通道纳米酶传感器阵列用于识别九种 BLs。优化机器学习算法后,检测模型的准确率显著提高,能有效检测实际样本中的多种 BLs。这项研究首次利用纳米酶传感器阵列同时区分和检测多种 BLs,不仅为复杂样本中 BLs 的识别提供了新方法,也为高活性漆酶样纳米酶的设计开辟了新方向,在生命科学和健康医学领域具有重要的应用价值和研究意义,有望推动相关领域的进一步发展。

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