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为解决现有胰岛素检测方法成本高、操作复杂等问题,研究人员开展合成镍掺杂壳聚糖纳米颗粒(Ni-CSNPs)用于电化学胰岛素检测的研究。结果显示,修饰后的电极检测性能优异,这为糖尿病诊断提供了新途径。
在生物医学检测领域,糖尿病的诊断一直是备受关注的焦点。胰岛素作为调节血糖的关键激素,其准确检测对于糖尿病的诊断和治疗至关重要。然而,当前的胰岛素检测方法,如高效液相色谱和毛细管电泳,存在成本高昂、需要复杂的预处理步骤以及依赖专业人员操作等问题。这些问题限制了它们在临床诊断中的广泛应用,因此,开发一种高效、低成本且操作简便的胰岛素检测方法迫在眉睫。
为了解决这些问题,来自国外的研究人员开展了一项关于合成镍掺杂壳聚糖纳米颗粒(Ni-CSNPs)并将其应用于电化学胰岛素检测的研究。该研究成果发表在《Biosensors and Bioelectronics: X》上。这项研究具有重要意义,若能成功,将为糖尿病的临床诊断提供一种更便捷、高效的检测手段,有望改善糖尿病患者的诊断体验和治疗效果。
研究人员在此次研究中运用了多种关键技术方法。首先,通过离子凝胶法合成了壳聚糖纳米颗粒(CSNPs)和 Ni-CSNPs,利用扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)以及动态光散射(DLS)等技术对纳米颗粒进行全面表征,以明确其结构和性质。在电化学检测方面,采用循环伏安法(CV)来研究修饰电极的性能,包括检测胰岛素的活性、分析氧化反应的动力学等 。
在研究结果部分,研究人员首先对 CSNPs 和 Ni-CSNPs 进行了详细表征。通过 DLS 分析不同体积三聚磷酸钠(TPP)对 CSNPs 粒径和多分散指数(PDI)的影响,发现添加 100 μL TPP 时,PDI 小于 0.5 且颗粒较小,更适合后续实验。Zeta 电位和电导率测试表明,CSNPs 和 Ni-CSNPs 体系稳定性良好,且 Ni 的引入对 Zeta 电位影响较小。FT-IR 分析确认了化学组成和分子间相互作用,证明了吸附过程涉及功能基团间的静电作用和络合反应。SEM 和 TEM 图像显示,CSNPs 和 Ni-CSNPs 均呈球形结构,TEM 测得 CSNPs 平均粒径约 134.1 nm,Ni-CSNPs 约 158.5 nm,同时 EDX 分析确定了元素组成。活性表面积测定发现,Ni-CSNPs 修饰的丝网印刷碳电极(Ni-CSNPs-SPCE)活性表面积最大,为分析物检测提供了更多活性位点。
随后,研究人员研究了 pH 对电化学胰岛素测定的影响及胰岛素电化学氧化机制。在不同 pH 溶液中对胰岛素进行测定,发现碱性条件下(pH = 11)电流响应更高,这表明 OH-参与了电化学反应。Ni (OH)2在电极活化过程中形成,其氧化生成的 NiO (OH) 是催化胰岛素直接氧化的活性位点。
在胰岛素氧化动力学研究中,通过记录不同扫描速率下 2 μM 胰岛素(pH = 11)的 CV 曲线,发现胰岛素氧化过程是吸附控制过程,电极反应为单电子不可逆氧化过程,计算得到标准异相反应速率常数为 5.39×10-3 s-1 。
在电化学测定胰岛素方面,利用 Ni-CSNPs-SPCE 对不同浓度胰岛素进行测定,结果显示在 0.3 μM 至 5 μM 范围内,电流响应与胰岛素浓度呈良好线性关系,具有高灵敏度(0.09 mA/μM)和低检测限(0.02 μM) ,检测性能优于许多文献报道的修饰电极。在选择性研究中,该修饰电极在常见干扰物存在下仍能准确检测胰岛素。在人体血液血清中的检测实验表明,Ni-CSNPs-SPCE 可用于实际样品中胰岛素的测定,在血清中检测限为 0.02 μM,灵敏度为 0.12 mA/μM。
研究结论和讨论部分指出,本研究成功合成了 Ni-CSNPs,其导电性高于壳聚糖薄膜,FT-IR 证实了壳聚糖与 TPP 以及壳聚糖纳米颗粒与 Ni2+之间的键合和络合物形成。胰岛素在修饰电极上的氧化是受吸附限制的不可逆单电子反应。基于这些研究,修饰电极在胰岛素检测方面展现出优异性能,不仅检测范围宽、灵敏度高、检测限低,而且能够在干扰物存在及血液血清中准确检测胰岛素。这使得 Ni-CSNPs-SPCE 成为一种极具前景的胰岛素检测平台,有望在未来糖尿病临床诊断中得到广泛应用,为糖尿病的精准诊断和治疗提供有力支持。