抗原特异性T细胞联合T细胞衔接器疗法通过分子特征优化增强T细胞适应性

本研究针对肿瘤免疫治疗中CD8+ T细胞功能差异问题，通过整合抗原特异性T细胞疗法与双特异性T细胞衔接抗体（TCE）的协同机制，发现抗原特异性T细胞能显著提升TCE疗效，并鉴定出CD3下调、NFAT活性抑制及PD-1/TCF1表达调控等关键分子特征，为联合免疫治疗策略提供了新生物标志物和理论依据。

　　

在肿瘤免疫治疗领域，CD8⁺ T细胞是清除肿瘤的核心效应细胞，但现有疗法如过继性T细胞治疗（ACT）和双特异性T细胞衔接抗体（TCE）仍面临T细胞耗竭和疗效差异的挑战。ACT依赖T细胞受体（TCR）识别MHC-抗原复合物，而TCE通过非MHC依赖途径激活T细胞，两者机制互补却缺乏协同效应的系统研究。此外，如何维持T细胞适应性（fitness）并延缓耗竭是提升疗效的关键科学问题。

为解答这些问题，研究人员通过整合体外实验与THP-1荷瘤NSG MHC I/II双敲除小鼠模型，首次揭示了抗原特异性T细胞联合TCE治疗的协同机制。研究发现，经体外扩增的抗原特异性T细胞比天然多克隆T细胞（bulk CD8⁺）更能有效介导TCE的肿瘤杀伤作用。通过荧光素酶报告系统证实，TCE处理可降低抗原特异性T细胞的CD3表达水平，提示CD3可能作为TCE活性的替代生物标志物。进一步通过Jurkat NFAT报告基因实验和流式细胞术发现，TCE治疗显著抑制NFAT（活化T细胞核因子）转录活性，同时下调耗竭标志物PD-1并上调干细胞样转录因子TCF1，形成有利于T细胞长期存活的分子特征。

关键实验技术
研究采用荧光素酶法量化TCR/TCE介导的肿瘤杀伤，流式细胞术分析T细胞表型，Jurkat NFAT报告系统评估转录活性，并通过骨髓来源抗原特异性T细胞的RNA-seq与基因集富集分析（GSEA）解析分子通路。

研究结果

1. 抗原特异性T细胞增强TCE疗效：体外实验显示，抗原特异性T细胞对TCE的响应效率显著高于多克隆T细胞。
2. CD3下调与TCE活性相关：TCE处理导致抗原特异性T细胞表面CD3表达降低，提示其可作为疗效监测指标。
3. NFAT活性抑制与表型优化：TCE通过抑制NFAT信号减少T细胞耗竭，同时促进TCF1表达，维持干细胞样特性。

结论与意义
该研究揭示了抗原特异性T细胞与TCE联合治疗的协同机制，提出CD3/NFAT/TCF1轴是调控T细胞适应性的关键通路。其重要意义在于：①为联合免疫治疗提供了理论依据；②鉴定出CD3等可转化应用的生物标志物；③通过分子重编程延缓T细胞耗竭，为实体瘤治疗提供新思路。论文发表于《Blood Immunology》，为肿瘤免疫治疗的优化设计开辟了新方向。