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为解决黄芪茎(AS)常被当作农业废弃物丢弃,其生物活性成分未被充分利用的问题,研究人员开展了高压蒸汽爆破(HPSE)预处理 AS 制备多糖(HPSEASCP)的研究。结果表明 HPSEASCP 抗氧化活性提升,能缓解氧化应激。这为 AS 废弃物利用及功能食品、药品开发提供依据。
在传统中医的宝藏库中,黄芪是备受瞩目的存在,它富含多种生物活性化合物,有着抗氧化、增强免疫力等诸多功效,在临床应用上前景广阔。然而,黄芪的茎却常常遭受被当作农业废弃物丢弃的命运,其中蕴含的大量生物活性成分,如多糖、多酚、黄酮类物质等,被紧紧束缚在木质素、纤维素和蛋白质构成的复杂结构中,难以发挥作用。如何让这些被浪费的资源 “变废为宝”,成为科研人员亟待攻克的难题。
内蒙古农业大学的研究人员肩负着这一使命,开展了一项意义非凡的研究。他们巧妙地运用高压蒸汽爆破(HPSE)技术对黄芪茎进行预处理,再通过水提、醇沉、除蛋白等一系列精细操作,成功制备出一种新型抗氧化粗多糖(HPSEASCP)。随后,他们对 HPSEASCP 的生物活性成分、结构组成和抗氧化性能进行了全面评估,还借助斑马鱼模型深入探究其在体内的抗氧化效果。研究发现,HPSE 预处理显著提升了 ASCP 的抗氧化能力,不仅降低了多糖的分子量,增加了糖醛酸水平,还促进了多糖、结合多酚和黄酮类物质的释放,同时保留了核心 β - 多糖结构和功能基团。在体外实验中,HPSEASCP 展现出比 ASCP 更高的 DPPH 自由基清除活性、羟基自由基清除活性和还原能力。在斑马鱼模型的体内实验里,25μg/mL 的 HPSEASCP 能有效提高胚胎的存活率和孵化率,减轻 2,2’ - 偶氮二(2 - 脒基丙烷)二盐酸盐(AAPH)诱导的氧化应激,降低活性氧(ROS)生成、抑制脂质过氧化水平并减少细胞死亡率,有力地推动了幼虫的健康发育。
这一研究成果发表在《Chemical and Biological Technologies in Agriculture》上,为黄芪茎废弃物的高值化利用点亮了一盏明灯,也为功能性食品和药品的研发提供了极具价值的参考,有望在未来为人类健康带来更多福祉。
在研究方法上,研究人员先采集新鲜黄芪茎,经干燥、粉碎处理后进行 HPSE 预处理。之后,采用水提醇沉法分别从黄芪茎和 HPSE 处理后的黄芪茎中提取粗多糖(ASCP 和 HPSEASCP)。利用多种色谱技术,如高效液相色谱(HPLC)、凝胶渗透色谱(GPC)、超高效液相色谱 - 串联质谱(UPLC - MS/MS)等对多糖的成分、结构和分子量进行分析;运用傅里叶变换红外光谱(FT - IR)表征多糖的功能基团;借助斑马鱼模型,通过观察胚胎存活率、孵化率以及相关生化指标评估 HPSEASCP 的体内抗氧化活性。
下面来看具体的研究结果:
- HPSE 预处理对 ASCP 多糖及糖醛酸糖苷的影响:HPSE 预处理显著提高了 HPSEASCP 中多糖的得率和纯度,其多糖得率达到 106.64 ± 2.44mg/g,明显高于未处理的 ASCP(66.00 ± 3.46mg/g)。HPSEASCP 的分子量降低,单糖组成中半乳糖醛酸(GalA)、阿拉伯糖(Ara)、半乳糖(Gal)和鼠李糖(Rha)的摩尔比增加,同型半乳糖醛酸(HG)和鼠李半乳糖醛酸 I(RG - I)结构比例显著提高,糖醛酸含量也大幅上升。这表明 HPSE 预处理促进了多糖的提取和结构修饰。
- HPSE 预处理对 ASCP 结合酚类和黄酮类的影响:HPSE 预处理后,HPSEASCP 中结合酚类和黄酮类的含量显著增加。通过 UPLC - MS/MS 分析发现,与 ASCP 相比,HPSEASCP 中有 35 种结合酚类和 60 种结合黄酮类显著上调,主要为小分子酚酸和具有抗氧化、抗炎活性的糖基化黄酮类;同时有 72 种结合酚类和 136 种黄酮类显著下调,多为糖基化衍生物。这说明 HPSE 预处理通过去糖基化机制促进了小分子多酚和黄酮苷元的富集。
- HPSE 预处理对 ASCP 结构完整性及活性成分的影响:FT - IR 光谱显示,ASCP 和 HPSEASCP 具有相似的结构特征,都含有丰富的羟基( - OH)、羰基( - C = O)、多酚结构和芳香环等功能基团,且都具有 β - 型糖苷键。HPSE 预处理在增强多糖含量、纯度和糖醛酸水平,促进结合多酚和黄酮类释放的同时,保持了多糖的核心结构和功能基团。
- HPSE 预处理对 ASCP 抗氧化活性的影响:体外抗氧化实验表明,在 1 - 8mg/mL 浓度范围内,ASCP 和 HPSEASCP 的 DPPH 自由基清除活性、羟基自由基清除活性和还原能力均呈剂量依赖性增加。在 2 - 4mg/mL 浓度区间,HPSEASCP 的这三种抗氧化活性均显著高于 ASCP,说明 HPSE 预处理有效提升了 ASCP 的抗氧化性能。
- HPSEASCP 对斑马鱼胚胎发育的影响:在斑马鱼实验中,25μg/mL 的 HPSEASCP 处理组胚胎存活率与对照组相当,且在 48 和 60h 时显著高于 AAPH 处理组;其孵化率在各时间点均有所提高,尤其在高浓度(100μg/mL)时效果明显。HPSEASCP 处理还改善了胚胎的颜色特征,促进了幼虫的发育,使幼虫在特定时间点的体长增加、卵黄囊面积和周长减小,减轻了 AAPH 诱导的氧化应激对胚胎和幼虫发育的负面影响。
- HPSEASCP 对 AAPH 诱导的氧化应激的保护作用:HPSEASCP 能有效减轻 AAPH 诱导的斑马鱼氧化应激。在 25μg/mL 浓度下,它显著降低了 ROS 生成,抑制了脂质过氧化,减少了细胞死亡。在 6.25μg/mL 和 25μg/mL 浓度时,对脂质过氧化的抑制作用显著,且能将细胞死亡速率恢复至正常水平,体现出良好的抗氧化和细胞保护能力。
综合研究结论和讨论部分,HPSE 预处理显著增强了 ASCP 的抗氧化能力,HPSEASCP 在体外和体内都展现出强大的抗氧化特性。它通过多种机制发挥作用,包括优化多糖结构、富集活性成分、清除自由基等。不过,该研究也存在一些局限,如未考虑黄芪茎产地和批次差异的影响,HPSEASCP 生产的成本效益和规模化可行性有待研究,其抗氧化的具体机制也需进一步探索。但总体而言,这项研究为黄芪茎废弃物的资源化利用开辟了新途径,为功能性食品和药品的开发提供了坚实的理论基础,在生命科学和健康医学领域具有重要的意义,有望推动相关领域的进一步发展。