综述：甲状腺癌中等位基因频率：机制、挑战及在癌症治疗中的应用

这篇综述深入探讨了甲状腺癌中关键基因突变（如BRAFV600E、TERT、RAS、RET和TP53）的等位基因频率（AF）特征，揭示了AF与肿瘤恶性程度、临床预后及靶向治疗响应的定量关联。作者系统分析了AF在个体化诊疗中的潜在价值，尤其强调BRAF与TERT突变AF的协同效应可提升复发风险评估精度，为甲状腺癌（PTC/FTC/MTC/ATC）的分子分型和精准治疗提供新视角。

　　

引言

甲状腺癌作为最常见的内分泌恶性肿瘤，其病理亚型包括乳头状癌（PTC）、滤泡癌（FTC）、低分化癌（PDTC）、未分化癌（ATC）和髓样癌（MTC）。近年来，二代测序（NGS）技术的普及使得等位基因频率（AF）——即特定突变占测序深度的百分比——成为量化肿瘤基因组异质性的关键指标。这一参数不仅能反映突变克隆的丰度，还与肿瘤侵袭性、治疗响应密切相关。

BRAF突变与AF

BRAF^V600E是PTC中最常见的驱动突变，但其AF呈现显著地域差异：中国患者平均AF为19.36-31.20%，而意大利和加拿大分别为21.9%和21.4-26%。值得注意的是，甲状腺癌中BRAF突变AF普遍低于50%，与黑色素瘤中高频出现的染色体7多体性形成鲜明对比，提示甲状腺癌细胞可能通过微环境调控维持突变克隆的动态平衡。

临床数据显示，BRAF突变AF与甲状腺包膜侵犯（P=0.002）、血管神经浸润（P=0.023）显著相关。当AF>28.2%时，患者复发风险增加6倍。机制上，高AF可能通过激活RAF/MEK/ERK通路并抑制免疫微环境，促进肿瘤进展。此外，BRAF抑制剂对高AF患者的疗效更显著，凸显AF在靶向治疗筛选中的价值。

RAS突变与AF

RAS突变在FTC中检出率高达49%，但AF与恶性程度关联较弱（良性结节AF 20.1% vs 恶性23.2%）。有趣的是，MTC中RAS突变AF随肿瘤直径增大而升高（<1cm时29.8% vs >3cm时46.62%），提示其可能参与肿瘤去分化过程。RAS与BRAF突变通常互斥，但与TERT共突变时可通过PI3K通路协同促进恶性转化。

TERT突变与AF

TERT启动子突变（C228T/C250T）在PDTC/ATC中富集，平均AF高达46.71%。AF>50%的病例可能涉及双等位突变或染色体拷贝数变异（CNV）。与BRAF突变类似，TERT高AF与血管侵犯、远处转移相关。更重要的是，76.47-81.63%的TERT突变与BRAF共存，两者AF呈正相关（BRAF AF每增加1%，TERT共突变风险上升1.16%），这种协同作用使联合检测对复发预测的准确性显著提升。

其他突变与AF

RET突变在MTC中占比95-98%，其AF与肿瘤负荷呈正相关（<1cm AF 23.42% vs >3cm 42.48%）。TP53突变则多见于ATC，cfDNA检测显示其AF可反映肿瘤负荷。PIK3CA/AKT突变虽在PTC中罕见（AF 6.7-12.2%），但在ATC中与BRAF共突变可能导致靶向治疗耐药。

AF的临床启示

AF的量化特性为区分驱动突变（如BRAF^V600E AF>5%）和乘客突变提供了新思路。对于中高危PTC患者，NGS检测可优化靶向治疗方案选择——例如BRAF抑制剂对高AF患者更有效。但需注意肿瘤纯度（建议>80%）和空间异质性对AF检测的影响。

展望

未来研究需明确AF阈值与治疗决策的量化关系，并开发针对PDTC/ATC的多基因检测panel。通过动态监测AF演变，有望揭示甲状腺癌克隆进化规律，为精准医疗提供更全面的基因组蓝图。