新发现!南极耐冷菌Pseudomonas rossensis sp. nov.:对抗耐药菌的潜在 “奇兵”
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为解决南极Pseudomonas菌株生物技术潜力及抗菌化合物研究不足的问题,研究人员对南极Pseudomonas菌株展开研究。结果发现新物种Pseudomonas rossensis sp. nov.,其对临床分离的Pseudomonas aeruginosa有抑制作用,为抗菌研究提供新方向。
在神秘的南极大陆,极端的环境条件,如严寒、干燥和营养匮乏,造就了独特的微生物世界。尽管南极微生物多样性丰富,但其中许多物种的研究还远远不够。
Pseudomonas属细菌广泛分布于南极,它们具有多样的代谢能力,然而,南极
Pseudomonas菌株在生物技术潜力以及产生抗菌化合物能力方面,一直未得到充分探索。随着全球抗菌耐药问题日益严峻,寻找新型抗菌物质迫在眉睫,南极这片净土或许藏着解决问题的关键。
来自国外的研究人员针对这一现状,开展了一项极具意义的研究。他们对从南极詹姆斯罗斯岛分离出的 5 株Pseudomonas菌株进行深入研究,最终发现了一个新的耐冷物种 ——Pseudomonas rossensis sp. nov.,并证实该物种对临床分离的耐药Pseudomonas aeruginosa(一种常见且难以治疗的医院感染病原体)具有抗菌活性。这一研究成果发表在《Current Research in Microbial Sciences》上,为抗菌研究开辟了新的方向,有望为解决耐药菌问题提供新的途径。
研究人员在这项研究中主要运用了以下关键技术方法:一是基因组测序及分析技术,通过对菌株全基因组测序(如对 P2663T菌株采用 MiSeg 技术测序),进行基因注释、系统发育分析等,确定菌株的分类地位和基因功能;二是多相分类技术,综合运用生理生化测试、脂肪酸分析、MALDI-TOF MS 分析等多种方法,全面鉴定新物种的特征;三是抗菌活性检测技术,采用 overlay plate assay 检测菌株对P. aeruginosa的拮抗作用。
研究结果
- 系统发育和进化分析:通过对 16S rRNA 基因序列、全基因组序列等分析,发现菌株 P2663T在Pseudomonas属中占据独特的系统发育位置,与P. svalbardensis、P. silesiensis等物种相关。基因组距离分析(如 dDDH、ANI 等)以及基于管家基因和指纹方法的分析(如 rpoB、16S rRNA、rpoD 基因分析,ribotyping 和 REP-PCR 分析),均证实了这些南极分离株的新颖性,支持 P2663T代表一个新物种的假设。
- P2663T的基本基因组特征:P2663T菌株基因组大小为 6511781 bp,包含 6048 个蛋白质编码序列(CDSs),GC 含量为 58.68 mol%。基因组中含有多种基因,如 57 个 tRNAs、3 个 rRNAs 等,还鉴定出 10 个前噬菌体区域,其中一个被认为是编码噬菌体尾状颗粒的 tailocin 基因簇,可能与抗菌活性有关。
- 新物种的生物合成潜力:利用 antiSMASH 网络工具鉴定出与次生代谢产物相关的基因簇,包括与铁载体(如 pyoverdine、histicorrugatin 等)和抗真菌化合物(如 fengycin、fragin 等)生产相关的基因簇,还有一些基因簇与未知功能的代谢产物相关。通过 OrthoMCL 分析发现,P2663T与相关物种共享约 65% 的基因簇,有 16 个基因簇为该菌株所特有。
- 基因组揭示的冷适应策略:在 P2663T基因组中发现了 214 个可能参与应激反应的基因,包括与冷休克蛋白(如 Csp A、C、D 和 G)、热休克蛋白(dnaK 基因家族)、渗透应激(如与 osmoregulated periplasmic glucans 和 betaine 生产相关基因)、氧化应激(如编码 catalase、superoxide dismutase 等的基因)相关的基因,还发现了与生物膜形成和色素生产相关的基因,这些基因有助于该菌株在南极恶劣环境中生存。与相关Pseudomonas物种相比,P. rossensis P2663T在应激相关基因方面具有独特的基因谱。
- 表型特征:南极分离株为革兰氏阴性、运动性杆菌,能在多种培养基上生长,产生黄色 - 绿色色素 pyoverdine。菌株具有嗜冷特性,能在低温(-2 °C)下生长,偏好较低温度(<30 °C)。通过 MALDI-TOF MS 分析,发现该菌株有 11 个独特的质谱信号,与相关物种不同。极性脂质和脂肪酸分析表明,其特征与其他Pseudomonas物种相似,但也存在一些差异,如脂肪酸组成中 Summed feature 8 的含量较低。
- 抗生素敏感性:体外微量稀释法测试显示,该新物种对一些氨基糖苷类、β - 内酰胺类抗生素(如 piperacillin/tazobactam、meropenem)、colistin 和 ciprofloxacin 敏感,但对 ampicillin/sulbactam、trimethoprim/sulfamethoxazole、aztreonam 和 ceftazidime 耐药。在 P2663T基因组中发现了与耐药相关的基因,如编码 β - 内酰胺酶和多药外排泵的基因。
- 新物种的抗菌潜力:研究测试了 P2663T对临床分离的P. aeruginosa的拮抗活性,在 96 株测试菌株中,有 7 株(7.3%)被抑制,抑制区域窄且边缘锐利,推测可能由 tailocin 介导。其他南极菌株也能拮抗临床分离株,但抑制谱因菌株而异。被抑制的P. aeruginosa分离株具有多种毒力因子,且部分对常用抗生素耐药。
研究结论和讨论
这项研究通过多相分类法,明确了从南极詹姆斯罗斯岛分离的 5 株Pseudomonas菌株中 P2663T代表一个新物种Pseudomonas rossensis sp. nov.。对 P2663T的基因组分析揭示了其适应南极极端环境的机制,以及潜在的生物合成能力。该新物种对临床分离的耐药P. aeruginosa具有抗菌活性,展现出作为新型抗菌剂来源的潜力,为解决全球抗菌耐药问题提供了新的可能,也凸显了南极微生物在生物技术和医药领域的巨大价值,为后续研究奠定了坚实基础,有望推动相关领域的进一步发展。