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在泰国,亚洲水巨蜥(Varanus salvator)生存受威胁且与人类接触增多。为查明其携带病原体状况,研究人员采集样本检测。结果发现多种病原体,如 Hepatozoon sp.、Anaplasma sp. 等。该研究为防控疾病提供依据,意义重大。
在东南亚的泰国,亚洲水巨蜥(Varanus salvator)曾因栖息地丧失和人类捕猎,数量急剧减少,被列入泰国保护物种名单。近年来,随着其数量回升,活动范围扩展到人类社区,与人类的接触日益频繁。然而,人们对亚洲水巨蜥携带的有害微生物知之甚少,像 Rickettsia spp.、Anaplasma spp. 等病原体虽被怀疑存在,但相关研究极为匮乏。这种知识缺口不仅威胁野生动物健康,还可能因水巨蜥与人类接触而危及公众健康,比如可能引发未知的传染病传播。因此,深入了解亚洲水巨蜥携带的病原体种类及其遗传多样性,对保护野生动物和保障人类健康至关重要。
为解决这一问题,来自泰国相关研究机构的研究人员,在拉差布里府的 Khao - zon 野生动物繁育站开展了一项关于亚洲水巨蜥携带细菌和原生动物感染的研究。研究人员通过采集样本、实验室检测和数据分析,发现亚洲水巨蜥可能是多种病原体的宿主和传播载体。这一研究成果发表在《Current Research in Parasitology》上,为后续的疾病防控和生态保护提供了关键的理论依据。
在研究过程中,研究人员采用了多种关键技术方法。首先是样本采集,从 2023 年 11 月至 2024 年 5 月,在 Khao - zon 野生动物繁育站手工捕获亚洲水巨蜥,选取体重超 3kg、体长超 100cm 的成年个体采集血液样本。之后,进行 DNA 提取,从血液样本中提取 DNA。接着运用聚合酶链反应(PCR)技术扩增目标基因,对 PCR 产物进行测序。最后利用生物信息学软件,如 BioEdit、MEGA、MrBayes、DnaSP 和 PopART 等,进行序列分析和构建系统发育树。
下面来看具体的研究结果:
- 病原体形态观察:研究人员对 16 份亚洲水巨蜥血液样本进行涂片观察,在 2 份样本中发现类似 Hepatozoon 的配子体(gamonts)。这些配子体呈细长形,两端宽圆,位于感染红细胞的细胞质内,宽度约 4.45μm,长度约 19.0μm,细胞质呈淡嗜碱性,细胞核为中央椭圆形嗜碱性。
- PCR 扩增与测序:血液样本检测显示,Hepatozoon sp. 阳性率为 37.5%(6/16),同时还检测到四种细菌,包括 Anaplasma sp.(18.75%,3/16)、Rickettsia sp.(12.5%,2/16)、Borrelia sp.(25.0%,4/16)和 Burkholderia sp.(6.25%,1/16)。通过测序和 BLAST 分析,发现 Hepatozoon sp. 的 18S rDNA 序列与伊朗 Pseudopus apodus 中的 H. ophisauri 相似度达 99.86%;Anaplasma sp. 的 16S rDNA 序列与巴基斯坦 Amblyomma gervaisi 蜱虫中未培养的 Anaplasma sp. 相似度为 98.3%,groEL 基因序列与印度尼西亚 Amblyomma varanense 蜱虫中分离的 Anaplasma sp. 相似度为 98.71% 等。
- 系统发育分析:基于不同基因构建的系统发育树显示,Hepatozoon sp. 的新序列与也门 Trachylepsis cristinae、伊朗 Pseudopus apodus 和中国 Elaphe carinata 中的序列聚为一支;Rickettsia sp. 的不同基因序列分别与泰国、韩国等地蜱虫中的序列聚类;Anaplasma sp. 的新序列与巴基斯坦、印度尼西亚等地蜱虫中的序列相关;Borrelia sp. 的新序列属于爬行动物相关(REP)Borrelia spp. 分支。
- 单倍型多样性:研究人员分析了不同基因序列的核苷酸多样性(π)、单倍型多样性(h)等参数。如 Hepatozoon spp. 的 18S rDNA 序列有 26 种单倍型,泰国亚洲水巨蜥中的 Hepatozoon sp. 与伊朗、中国等地宿主中的序列共享单倍型 1。Rickettsia spp.、Anaplasma spp. 和 Borrelia spp. 的基因序列也呈现出丰富的单倍型多样性,且与多个国家不同宿主中的序列相关。
研究结论和讨论部分表明,这是首次对泰国拉差布里府 Khao - zon 野生动物繁育站亚洲水巨蜥的细菌和寄生虫病原体进行研究。研究发现多种潜在致病微生物,其中 Hepatozoon sp. 与 H. ophisauri 密切相关;Rickettsia sp. 与 R. conorii raoultii 相关,虽其致病性尚待明确,但 R. raoultii 对人类致病;Anaplasma sp. 与蜱虫中的相关细菌相似;Borrelia sp. 属于 REP Borrelia spp.。此外,还检测到 Burkholderia sp.,其与中国、美国和墨西哥的未培养菌株相似度高。
这项研究意义重大,亚洲水巨蜥可能是多种病原体的储存宿主和传播载体,其携带的病原体对野生动物和人类健康构成潜在威胁。了解这些病原体的多样性,有助于评估公共卫生风险,为预防和控制传染病提供重要依据,也为野生动物保护和疾病监测工作指明了方向,强调了持续监测亚洲水巨蜥种群疾病的重要性,以便及时采取防控措施,保障生态系统平衡和人类健康安全。