揭秘弥漫大 B 细胞淋巴瘤 “帮凶”：LILRB1-CREB-SORBS3 通路的关键作用

目前，60 - 70% 的弥漫大 B 细胞淋巴瘤（DLBCL）患者可通过现有化疗和免疫疗法治愈，但仍有部分患者治疗耐药、预后差。为探寻新靶点，研究人员聚焦 LILRB1 开展研究。结果发现 LILRB1 高表达与患者生存负相关，其通过 CREB - SORBS3 通路维持 DLBCL 细胞增殖，这为 DLBCL 治疗提供新方向。

　　淋巴瘤，这个源自淋巴造血系统的 “恶魔”，悄无声息地在人体内肆虐。它以无痛性淋巴结肿大为 “伪装”，还可能伴有肝脾肿大，同时带来发热、消瘦、瘙痒等全身性症状，严重威胁着人们的健康。在淋巴瘤的 “家族” 中，B 细胞淋巴瘤占了绝大多数，而弥漫大 B 细胞淋巴瘤（DLBCL）又是其中最常见的类型，约占非霍奇金淋巴瘤病例的 30%。

DLBCL 如同一个复杂的 “谜题”，具有高度的异质性，可分为活化 B 细胞样（ABC）亚型、生发中心 B 细胞样（GCB）亚型和未分类 DLBCL。当前，化疗、手术以及免疫疗法（如针对 CD19 的嵌合抗原受体（CAR）T 细胞疗法、针对 CD20 的单克隆抗体疗法）虽在部分患者身上取得了一定疗效，但由于复发或难治性 B 细胞淋巴瘤患者会出现 CD19/CD20 表达缺失的情况，这些免疫疗法的应用受到了极大限制。因此，寻找新的有效治疗靶点迫在眉睫。

上海大学中医药学院和上海交通大学医学院的研究人员，踏上了探索的征程。他们将目光聚焦在白细胞免疫球蛋白样受体 B1（LILRB1）上，开展了一系列深入研究。最终发现，LILRB1 在 DLBCL 细胞中高表达，且与患者的总生存期呈负相关。更为关键的是，他们揭示了 LILRB1 通过 CREB - SORBS3 通路维持 DLBCL 细胞增殖的机制。这一发现意义重大，为 DLBCL 的治疗提供了全新的潜在靶点，有望开辟治疗 DLBCL 的新路径。该研究成果发表在《Cellular Oncology》杂志上。

研究人员主要运用了以下几种关键技术方法：一是数据库分析，利用基因表达综合数据库（GEO）分析临床患者数据；二是基因编辑技术，采用短发夹 RNA（shRNA）和单向导 RNA（sgRNA）分别对 LILRB1 进行敲低和敲除；三是蛋白检测技术，运用蛋白质免疫印迹（Western blot）和染色质免疫沉淀（ChIP）技术来探究相关信号通路；四是测序技术，通过 RNA 测序（RNA - seq）来探索潜在机制。

下面来看看具体的研究结果：

• LILRB1 在 B 细胞淋巴瘤细胞中高表达：研究人员分析 GEO 数据库中 DLBCL 患者样本数据，发现 DLBCL 患者的 LILRB1 水平比健康供体高得多。在 DLBCL 的不同分子亚型中，LILRB1 表达存在差异，ABC 或未分类 DLBCL 中的 LILRB1 水平高于 GCB DLBCL。同时，LILRB1 表达与 CD19 表达呈正相关，与患者总生存期呈负相关。此外，在多种 B 细胞淋巴瘤细胞系中，LILRB1 也呈现高表达状态1。
• LILRB1 支持 B 细胞淋巴瘤细胞体外增殖：通过 shRNA 敲低 LILRB1，研究人员发现包括 OCL - Ly3、Su - DHL4 和 Raji 细胞在内的 B 细胞淋巴瘤细胞增殖显著减少。基因敲除 LILRB1 也同样削弱了淋巴瘤细胞的增殖能力。经 Wright - Giemsa 染色和 annexin V / 碘化丙啶（PI）染色分析发现，LILRB1 敲低的淋巴瘤细胞空泡化水平增加、凋亡细胞增多，细胞周期也发生变化，G₀ - G₁期细胞增多，S 和 G₂ - M 期细胞减少23。
• LILRB1 促进体内淋巴瘤发展：研究人员将 LILRB1 shRNA 感染的 Raji 细胞和 Su - DHL4 细胞分别皮下注射到 NOD - SCID 小鼠体内，结果发现，LILRB1 敲低的 Raji 细胞和 Su - DHL4 细胞在小鼠体内形成的肿瘤体积更小、生长更慢，这表明 LILRB1 在体内能够促进淋巴瘤细胞的增殖45。
• LILRB1 - SORBS3 通路维持 B 细胞淋巴瘤细胞致瘤活性：对 LILRB1 敲低和对照感染的 B 细胞淋巴瘤细胞进行 RNA 测序分析，发现 SORBS3 是共同的差异表达基因（DEG）。构建 SORBS3 过表达载体并感染细胞后发现，SORBS3 过表达能部分挽救 LILRB1 敲低对淋巴瘤细胞增殖和致瘤性的影响。临床数据也显示，SORBS3 在 DLBCL 细胞中高表达，且与患者总生存期呈负相关67。
• LILRB1 - CREB 信号通路激活 SORBS3 表达：对 RNA - seq 数据进行基因本体（GO）分析，发现钙信号通路富集，该通路与肿瘤发生密切相关。进一步研究发现，LILRB1 敲低后，cAMP 反应元件结合蛋白（CREB）的磷酸化水平和总蛋白水平均降低，且 p - CREB 降低更明显。荧光素酶报告基因检测和 ChIP 实验表明，CREB 能与 SORBS3 启动子区域结合，激活 SORBS3 表达，从而促进淋巴瘤细胞增殖89。

在研究结论与讨论部分，研究揭示了 LILRB1 在 DLBCL 细胞中高表达，且与患者生存呈负相关，LILRB1 通过 LILRB1 - CREB - SORBS3 信号通路维持淋巴瘤细胞增殖。虽然目前针对 DLBCL 已有多种治疗方法，但都存在一定局限性。LILRB1 在正常 B 细胞中不表达，仅在 DLBCL 细胞中高表达，这使其成为潜在的免疫治疗靶点，为 DLBCL 的治疗提供了新的方向和希望。不过，LILRB1 是否通过调节 T 细胞、巨噬细胞或 NK 细胞来抑制抗癌功能，以及其是否还通过其他信号通路参与淋巴瘤的发生发展，仍有待进一步探索研究。