氟达拉滨：治疗急性肺损伤（ALI）的新希望 —— 靶向 STAT1/IRF1 通路调控自噬与炎症

急性肺损伤（ALI）及其严重形式急性呼吸窘迫综合征（ARDS）死亡率高且缺乏有效药物。研究人员探究 STAT1 抑制剂氟达拉滨（Fluda）对 ALI 的疗效。结果发现 Fluda 可抑制 STAT1/IRF1 通路，减轻炎症和调节自噬。这为 ALI 治疗提供了新策略。

　　在医学领域，急性肺损伤（ALI）一直是个棘手的难题。ALI 起病迅速，会引发微血管蛋白渗漏到肺泡腔、炎症细胞浸润、间质水肿以及上皮完整性遭到破坏等一系列问题，严重时发展为急性呼吸窘迫综合征（ARDS） ，死亡率居高不下。尽管对其临床特征已有深入了解，但相关发病机制仍不明确，目前也缺乏有效的治疗药物。为了寻找新的治疗方法，来自韩国江原国立大学（Kangwon National University）的研究人员开展了一项关于氟达拉滨（Fludarabine，Fluda）治疗 ALI 的研究，该研究成果发表在《Laboratory Animal Research》上。

研究人员主要采用了以下几种关键技术方法：首先，构建脂多糖（LPS）诱导的小鼠 ALI 模型，将小鼠分为对照组、Fluda 组、LPS 组和 LPS+Fluda 组进行实验 ；其次，运用转录组测序技术分析小鼠肺组织的基因表达变化；此外，还通过蛋白质免疫印迹（Western blotting）、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、酶联免疫吸附测定（ELISA）等实验技术，检测相关蛋白和细胞因子的表达水平。

研究结果如下：

• IRF1 在 LPS 诱导的 ALI 早期表达增加：通过 RNA 测序（RNA-seq）发现，LPS 暴露后小鼠肺组织中 70 个基因上调，其中 IRF1 和 IRF7 表达显著升高，且 IRF1 在 BAL 细胞尤其是巨噬细胞样细胞核中高表达。同时，LPS 处理的小鼠肺组织中 STAT1 在 Tyr⁷⁰¹和 Ser⁷²⁷位点的磷酸化水平明显增加。
• Fluda 降低 LPS 注射小鼠的 STAT1 激活和 IRF1 表达：向 LPS 暴露的小鼠气管内注射 Fluda 后，发现 Fluda 成功抑制了肺组织匀浆和 BAL 细胞中 STAT1 和 IRF1 的磷酸化。
• Fluda 减轻 LPS 诱导的小鼠组织损伤和炎症：Fluda 预处理缓解了 LPS 导致的肺组织损伤，抑制了炎症细胞浸润，降低了肺泡通透性和 MPO 活性，减少了 BALF 中促炎细胞因子的水平。
• Fluda 抑制小鼠 iNOS 表达和磷酸化 NF-κB/ERK1/2 信号通路：Fluda 显著抑制 BAL 细胞中 iNOS 在 mRNA 和蛋白水平的表达，降低 NO 产生，同时减少了 pNF-κB p65 和 pERK1/2 的表达。
• Fluda 抑制小鼠肺内 LPS 暴露的炎症细胞中失调的自噬：在 GFP-LC3 转基因小鼠中，Fluda 减少了 LPS 诱导的 BAL 细胞中自噬体的形成，降低了 LC3B-II 和 p62 的表达，表明 Fluda 调节了异常和过度的自噬反应。
• Fluda 减少巨噬细胞中磷酸化 STAT1/IRF1、iNOS 和磷酸化 NF-κB/ERK1/2 信号通路：在 RAW264.7 细胞中，Fluda 有效抑制 p-STAT1/IRF1 信号通路，降低 iNOS 信号和炎症细胞因子的释放，抑制 p-NF-κB 和 p-ERK1/2 的激活。

研究结论和讨论部分表明，Fluda 通过抑制 STAT1/IRF1 通路，减少了浸润的炎症细胞数量，降低了炎症细胞因子水平，抑制了 iNOS 表达，调节了肺泡巨噬细胞中 LPS 诱导的自噬通量受损。这一研究为 ALI 和自噬相关人类疾病的治疗提供了新的潜在策略，揭示了 STAT1/IRF1 通路在 ALI 发病机制中的关键作用，为进一步研究 ALI 的治疗方法奠定了基础，也为其他相关疾病的研究提供了参考方向。