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为解决肝癌患者对乐伐替尼（Lenvatinib）响应率低和易产生耐药性的问题，研究人员开展了肝癌中乐伐替尼耐药机制及联合治疗的研究。结果发现 PDGFRA 过表达介导耐药，阿伐替尼（Avapritinib）可增强乐伐替尼疗效。这为肝癌治疗提供新策略。
在肝癌治疗领域，乐伐替尼（Lenvatinib）作为一种多激酶抑制剂，能抑制肿瘤血管生成，对晚期肝癌治疗有一定效果，已成为美国、欧盟、日本和中国等多地晚期肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）的一线治疗药物。然而，现实却给肝癌患者和医疗团队泼了一盆冷水。大部分肝癌患者对乐伐替尼治疗并不敏感，还有不少患者在治疗过程中逐渐产生耐药性，这使得乐伐替尼的治疗效果大打折扣，严重影响了患者的生存质量和预后。因此，深入探究乐伐替尼耐药的分子机制，寻找有效的联合治疗方案来提高肝癌患者对乐伐替尼的敏感性，成为了肝癌治疗领域亟待攻克的难题。
福建医科大学孟超肝胆医院联合福州大学孟超 Med-X 中心等研究机构的研究人员勇挑重担，开展了一项极具意义的研究。他们致力于找出肝癌对乐伐替尼耐药的潜在分子机制，并探索靶向联合疗法克服耐药性的可行性。最终，研究取得了令人瞩目的成果。研究发现，血小板衍生生长因子受体 A（PDGFRA）的过表达是肝癌细胞对乐伐替尼产生耐药性的关键因素，使用 PDGFRA 抑制剂阿伐替尼（Avapritinib）能够显著增强肝癌细胞对乐伐替尼的敏感性，二者联合使用展现出强大的协同抑制效果。这一发现为肝癌治疗开辟了新的道路，为那些对乐伐替尼耐药的肝癌患者带来了新的希望，相关研究成果发表在《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》上。
研究人员在研究过程中运用了多种关键技术方法。首先，通过 CRISPR/Cas9 基因敲除筛选技术，在全基因组范围内寻找与乐伐替尼耐药相关的基因；同时结合转录组测序，分析耐药细胞系的转录组变化，从而筛选出潜在的耐药相关基因。此外，构建患者来源类器官（PDO）和患者来源异种移植（PDX）模型，在更贴近人体生理环境的模型中验证联合治疗的效果。研究使用的样本队列来源于福建医科大学孟超肝胆医院接受手术治疗的肝癌患者。
研究结果如下：
- CRISPR/Cas9 文库筛选确定潜在耐药基因：利用 CRISPR/Cas9 文库对 SNU-449 和 SMMC-7721 细胞进行全基因组敲除筛选，结合 RNA 测序分析乐伐替尼耐药细胞系的转录组变化。经过一系列筛选和分析，发现 PDGFRA 基因可能与乐伐替尼耐药相关。
- PDGFRA 过表达介导肝癌细胞对乐伐替尼耐药：通过 qPCR 和蛋白质免疫印迹（Western blot）分析，证实 PDGFRA 在乐伐替尼耐药细胞系中 mRNA 和蛋白水平均显著上调。功能实验表明，过表达 PDGFRA 会降低肝癌细胞对乐伐替尼的敏感性，而敲低 PDGFRA 则能增强细胞对乐伐替尼的敏感性。动物实验中，耐药细胞系建立的皮下肿瘤模型对乐伐替尼敏感性降低，且肿瘤组织中 PDGFRA 表达上调，进一步验证了 PDGFRA 在介导耐药中的重要作用。
- 阿伐替尼增强肝癌细胞对乐伐替尼的敏感性：体外实验显示，阿伐替尼与乐伐替尼联合使用，对乐伐替尼耐药细胞系和部分 PDGFRA 高表达的肝癌细胞系生长抑制效果显著，且在高 PDGFRA 表达和耐药的肝癌细胞中表现出明显的协同抑制作用。在小鼠模型中，无论是耐药细胞系还是过表达 PDGFRA 细胞系建立的皮下肿瘤模型，联合治疗都能显著抑制肿瘤生长，且未发现明显毒性。
- 在多种模型中验证联合治疗效果：在原位肝癌小鼠模型中，乐伐替尼对过表达 PDGFRA 的肝癌细胞治疗效果明显减弱，而阿伐替尼与乐伐替尼联合治疗能显著抑制肿瘤生长，提高小鼠生存率。在患者来源类器官（PDO）和患者来源异种移植（PDX）模型中，联合治疗在高 PDGFRA 表达的样本中同样表现出显著的协同抑制肿瘤生长的效果，而在低 PDGFRA 表达样本中则无明显协同作用。
- PDGFRA 表达与患者预后相关：对 212 例肝癌组织微阵列进行免疫组化分析发现，PDGFRA 高表达与肝癌患者总生存期和无进展生存期降低相关。对 15 例接受乐伐替尼联合治疗的肝癌患者肝组织活检分析表明，PDGFRA 高表达患者疾病进展，而低表达患者部分有缓解或病情稳定，说明 PDGFRA 表达可作为预测肝癌患者对乐伐替尼治疗反应的生物标志物。
- 揭示耐药的分子机制：研究发现，乐伐替尼治疗或 PDGFRA 过表达会激活 PTEN/AKT/GSK-3β/β-catenin 信号通路，促进肝癌细胞对乐伐替尼的耐药性。使用 AKT 抑制剂 capivasertib 处理细胞后，PDGFRA 对 β-catenin 的激活作用明显减弱，进一步证实了该信号通路在介导耐药中的作用。
研究结论和讨论部分指出，本研究揭示了 PDGFRA 过表达通过 PTEN/AKT/GSK-3β/β-catenin 信号级联使肝癌细胞对乐伐替尼产生耐药性，而阿伐替尼能够增强肝癌细胞对乐伐替尼的敏感性。这一发现为肝癌治疗提供了新的潜在治疗策略，即对于对乐伐替尼产生原发性或继发性耐药的肝癌患者，乐伐替尼与阿伐替尼联合治疗可能是一种有效的治疗方案。同时，研究也为阿伐替尼拓展了潜在的治疗应用领域。不过，研究也存在一定局限性，目前尚不清楚乐伐替尼耐药细胞中 PDGFRA 上调的具体机制，未来还需要进一步深入研究。总体而言，该研究成果为肝癌治疗带来了新的思路和希望，为后续的临床研究和治疗实践奠定了重要基础 。
