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草鱼呼肠孤病毒（GCRV）引发的出血病严重威胁草鱼养殖。研究人员探究 II 型干扰素（IFNs）作为 GCRV - VP35 DNA 疫苗佐剂的潜力。结果显示 IFNs 可增强免疫基因表达，提升疫苗抗原呈递能力，为改进鱼类疫苗效力提供新思路。
在水产养殖的广阔天地里，草鱼（
Ctenopharyngodon idella）可是一位 “明星选手”。它在中国淡水养殖中占据着重要地位，年产量近 600 万吨，为渔业经济贡献颇丰。然而，有一种可怕的病毒 —— 草鱼呼肠孤病毒（GCRV），如同隐藏在暗处的 “杀手”，严重威胁着草鱼的健康。感染这种病毒的草鱼，尤其是幼鱼，死亡率高达 80 - 100%，给养殖户带来了巨大的经济损失。目前，针对 GCRV 引发的出血病，还没有有效的控制措施，这就像在黑暗中摸索，找不到驱散病魔的 “光明”。
在对抗疾病的众多手段中，疫苗一直被寄予厚望。DNA 疫苗因其独特的优势，在增强鱼类对 GCRV 感染的抵抗力方面展现出一定潜力。但它也有自己的 “短板”，保护效力无法达到最佳，还有很大的提升空间。于是，科研人员踏上了寻找 “秘密武器” 的征程，希望找到能提升 DNA 疫苗效果的方法，让草鱼在面对病毒时更有 “抵抗力”。
上海海洋大学的研究人员挺身而出，勇敢地迎接这一挑战。他们把目光聚焦在 II 型干扰素（IFNs）上，包括 IFN - γ 和 IFN - γ 相关分子（IFN - γrel），试图探索它们作为 GCRV - VP35 DNA 疫苗佐剂（一种能增强疫苗免疫效果的物质）的潜力。经过一系列深入研究，他们发现，将 IFN - γ 和 IFN - γrel 与 GCRV - VP35 DNA 疫苗联合使用，能协同增强免疫基因的表达，如Mx1、Isg15和Viperin等，还能上调Igm和Cd8基因，并且显著促进 MHC - I（主要组织相容性复合体 I 类分子，在抗原呈递过程中发挥关键作用）的表达，从而提升 VP35 疫苗的抗原呈递能力，为增强疫苗的免疫原性和保护效力提供了新的方向。这一研究成果意义重大，为改进鱼类疫苗效力提供了宝贵的思路，就像在黑暗中点亮了一盏明灯，为水产养殖对抗病毒感染带来了新的希望。虽然文章未提及发表期刊为《Developmental》，但这一成果无疑在水产养殖免疫学领域有着重要价值。
研究人员开展这项研究时，运用了多种关键技术方法。实验对象选取了健康的草鱼，这些草鱼来自上海滨海基地，实验前通过 PCR 检测确保它们未感染 GCRV。研究人员将包含 pcDNA3.1 - VP35、pcDNA3.1 - IFN - γ 和 pcDNA3.1 - IFN - γrel 等的表达质粒，以肌肉注射的方式注入草鱼体内，通过免疫荧光显微镜观察相关分子在注射部位的表达情况，并检测免疫基因的表达变化。
下面来详细看看研究结果：
- Vp35、ifn - γ 和 ifn - γrel 在质粒注射部位表达：研究人员将不同组合的表达质粒，如 pcDNA3.1 - VP35、pcDNA3.1 - IFN - γ、pcDNA3.1 - IFN - γrel 等，以不同剂量肌肉注射到草鱼体内，同时设置了 PBS 缓冲液注射的对照组。通过免疫荧光显微镜观察发现，GCRV - VP35、IFN - γ 和 IFN - γrel 在注射部位有局部表达，并且这种表达至少持续了五周。这表明这些分子能够在草鱼体内持续发挥作用，为后续的免疫反应提供了基础。
- 免疫基因表达变化：研究发现，同时注射 IFN - γ 和 IFN - γrel 质粒，相比单独注射其中任何一种质粒，能更显著地协同增强Mx1、Isg15和Viperin等免疫基因的表达。这说明 IFN - γ 和 IFN - γrel 在调节免疫反应方面具有协同作用，能够更有效地激活草鱼的免疫系统，增强其抗病毒能力。
- 适应性免疫相关基因上调：在注射了 IFN - γ/IFN - γrel 质粒的草鱼脾脏和肌肉中，Igm和Cd8基因也出现了上调。Igm是免疫球蛋白 M，在体液免疫中发挥重要作用；Cd8是细胞毒性 T 淋巴细胞表面的标志物，与细胞免疫密切相关。这表明 IFN - γ 和 IFN - γrel 能够调节草鱼的适应性免疫反应，进一步增强其对病毒感染的抵抗力。
- 促进抗原呈递：研究人员还发现，IFN - γ 和 IFN - γrel 能够显著上调Mhc I的表达，但对Mhc II的表达没有明显影响。MHC - I 在抗原呈递过程中起着关键作用，它能够将病毒抗原呈递给细胞毒性 T 淋巴细胞，激活细胞免疫反应。因此，IFN - γ 和 IFN - γrel 通过上调Mhc I的表达，促进了 VP35 疫苗的抗原呈递，从而增强了疫苗的免疫效果。
综合研究结论和讨论部分，这项研究首次深入探讨了 II 型干扰素（IFNs）作为 GCRV - VP35 DNA 疫苗佐剂的免疫调节潜力。研究结果表明，IFNs 能够通过多种途径增强免疫反应，包括协同激活免疫基因、调节适应性免疫相关基因以及促进抗原呈递等。这不仅为提升鱼类 DNA 疫苗的效力提供了新的策略，也为水产养殖中病毒病的防控开辟了新的方向。未来，有望基于这些发现，开发出更高效的鱼类疫苗，保护草鱼等水产养殖动物免受病毒的侵害，促进水产养殖业的健康可持续发展。
