黑鲉Mx蛋白(SsMx)的抗菌抗病毒机制研究：表达特征与分子作用解析

本研究针对硬骨鱼类Mx蛋白抗病毒机制不明确的问题，从黑鲉(Sebastes schlegelii)中克隆获得新型SsMx基因，通过qRT-PCR、重组蛋白(rSsMx)功能实验及共免疫沉淀等技术，证实SsMx能通过结合SVCV G蛋白干扰病毒入侵，显著抑制鲤春病毒血症病毒(SVCV)复制，为鱼类先天免疫机制提供了重要理论依据。

　　

在海洋鱼类养殖业面临病毒性疾病威胁的背景下，硬骨鱼类的先天免疫机制研究成为热点。尽管哺乳动物中Mx蛋白的抗病毒功能已被广泛认知，但硬骨鱼类这类关键防御分子的作用机制仍存在巨大知识空白。黑鲉作为东亚重要经济鱼种，其免疫防御体系研究具有重要应用价值。

青岛农业大学的研究团队在《Developmental 》发表论文，首次从黑鲉中鉴定出Mx同源基因SsMx，通过分子克隆、qRT-PCR表达谱分析、重组蛋白制备及病毒感染模型等系列实验，系统揭示了SsMx的抗菌抗病毒双重功能。研究发现SsMx通过独特的GTP酶效应结构域(GED)与SVCV糖蛋白(G)直接互作，阻断病毒入侵过程，为鱼类抗病毒药物开发提供了新靶点。

关键技术包括：1) 从20g健康黑鲉(山东养殖场来源)克隆全长SsMx cDNA；2) 采用qRT-PCR分析病原感染后头肾、脾脏等组织的表达动态；3) 原核表达系统制备重组rSsMx蛋白；4) 共聚焦显微镜观察亚细胞定位；5) 共免疫沉淀(co-IP)验证SsMx-SVCV G蛋白互作。

【Characterization of black rockfish Mx cDNAs】
SsMx cDNA全长2982bp，编码672个氨基酸的蛋白质(75.88 KDa)，具有典型GTP酶结构域(9-252aa)和GED域(534-625aa)。序列比对显示其与鱼类Mx同源物相似度达43.67%-95.69%，核心功能域高度保守。

【Discussion】
研究发现SsMx在脾脏和肝脏高表达，病原感染后头肾巨噬细胞中表达显著上调。rSsMx不仅能结合多种细菌，还可通过以下机制抗SVCV：1) 抑制病毒诱导的细胞凋亡；2) 与病毒G蛋白共定位并形成复合物；3) 干扰病毒内化过程。这种"双功能"特性拓展了对鱼类Mx蛋白的认知，其GED域与病毒囊膜蛋白的相互作用模式为抗病毒药物设计提供了新思路。

该研究首次阐明SsMx通过直接靶向病毒囊膜蛋白阻断感染的分子机制，建立了鱼类Mx蛋白结构与功能的关系模型。成果对理解硬骨鱼类先天免疫进化具有重要意义，并为水产养殖抗病育种提供了理论依据。研究获得国家自然科学基金(31872607)和山东省"一流学科"等项目支持。