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为解决龙爪稷(Eleusine coracana)种质资源遗传多样性研究不足的问题,研究人员用随机扩增多态性 DNA(RAPD)和简单重复序列区间(ISSR)PCR 基因分型法,研究 25 个龙爪稷基因型,发现其遗传多样性中等,该研究助力育种及提升粮食安全。
在广袤的农业天地里,有一种作物虽不似小麦、水稻那般广为人知,却凭借自身独特的优势,在保障粮食安全和维护生态平衡方面发挥着关键作用,它就是龙爪稷(Eleusine coracana) ,也被亲切地称为 “Nutra-cereals”。龙爪稷是一种自花授粉作物,对恶劣环境有着超强的适应能力,在非洲和南亚地区,它可是当地居民的重要主食呢。它不仅能在贫瘠的土地上顽强生长,还富含蛋白质、膳食纤维、多种维生素和矿物质,营养价值极高。多吃龙爪稷,有助于促进消化、调节血糖,对预防糖尿病和心血管疾病都有好处,完全符合联合国可持续发展目标的要求。
然而,就像隐藏在迷雾中的宝藏,龙爪稷丰富的种质资源背后,其遗传多样性却一直未被深入探索。这可给作物改良工作带来了不小的阻碍。要知道,遗传多样性可是作物育种的关键,没有充分了解它,就如同在黑暗中摸索,难以培育出更优质、更适应环境变化的品种。为了揭开龙爪稷遗传多样性的神秘面纱,来自国内的研究人员挺身而出,开展了一项意义重大的研究,相关成果发表在《Ecological Genetics and Genomics》上。
研究人员从印度不同农业气候区域精心挑选了 25 个龙爪稷基因型,其中 18 个是由各个研究机构培育的杂交品种,7 个是当地的本土品种。他们采用了两种强大的分子标记技术 —— 随机扩增多态性 DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)和简单重复序列区间(Inter - Simple Sequence Repeat,ISSR)进行 PCR 基因分型。这两种技术就像是打开遗传宝库的钥匙,能帮助研究人员深入了解龙爪稷的遗传信息。
研究人员首先用 120 个 RAPD 引物对 25 个龙爪稷基因型进行初步筛选,最终确定了 14 个能产生清晰、可评分多扩增子的引物。用这 14 个引物进行 RAPD 分析,共扩增出 182 条带,平均每个引物能扩增出 13 条带。其中,OPF - 12 引物扩增出的带数最多,有 25 条;最少的引物仅扩增出 4 条带。通过这些数据,研究人员能分析出不同基因型之间的差异。同时,利用 10 个 ISSR 引物进行 ISSR 分析,产生了 83 条带,多态性达到 74% 。通过 PopGene 分析发现,ISSR 的 Nei's 遗传多样性比 RAPD 更高,但 RAPD 引物的 Shannon's 信息指数更高,这表明 RAPD 在基因型分化方面更具优势。
研究人员还计算了多态性信息含量(Polymorphic Information Content,PIC)、标记指数(Marker Index,MI)和有效多重比率(Effective Multiplex Ratio,EMR)等指标,综合这些指标发现,RAPD 引物 OPA - 18、OPH - 05、OPI - 10,以及 ISSR 引物 UBC - 841、UBC - 857、UBC - 863 在识别龙爪稷遗传多样性方面最为有效。
根据 Jaccard's 相似系数,结合 RAPD 和 ISSR 分析结果,发现龙爪稷的遗传多样性处于中等水平,相似系数在 0.59 - 0.87 之间。通过基于 RAPD 和 ISSR 的主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)和聚类分析(Hierarchical Cluster Analysis,HCA),研究人员发现不同基因型的龙爪稷能根据遗传关系,按照地理起源进行分组,其中 GN - 4 与 GPU - 48、GPU - 28 之间的遗传差异最大。分子方差分析(Analysis of Molecular Variance,AMOVA)表明,来自不同生态区域的基因型之间变异较大,而同一区域内的变异较小。
这项研究意义非凡。它不仅填补了龙爪稷遗传多样性研究的空白,为后续的作物育种和遗传改良提供了宝贵的数据支持,让育种专家们能更有针对性地培育出适应气候变化、产量更高、品质更好的龙爪稷品种,有助于提高全球粮食安全水平,还为其他作物的遗传多样性研究提供了参考范例,推动了整个农业领域的发展。