调节肠道菌群缓解应激，四逆散为肝细胞癌（HCC）治疗带来新希望

为探究中药复方四逆散（SNP）对肝细胞癌（HCC）的潜在作用及药理机制，研究人员开展相关研究。结果发现 SNP 可抑制癌细胞增殖，缓解应激反应，调节肠道菌群。这为 HCC 治疗提供了新方向。

　　研究旨在探索中药复方四逆散（Sini Powder，SNP）对肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）的潜在药理机制及其作用。研究人员运用超高效液相色谱 - 四极杆飞行时间质谱法，鉴定了 SNP 的活性成分及其在体内的分布情况。通过构建成分 - 靶点 - 疾病网络、蛋白质 - 蛋白质相互作用网络、基因本体（Gene Ontology）功能和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）通路富集分析，以及分子对接等方法，分析 SNP 的活性成分和抗 HCC 的机制。利用细胞活力测定和划痕愈合实验，确认含 SNP 血清（2.5%、5.0%、10%、20% 和 40%）、异丙肾上腺素（isoprenaline）或普萘洛尔（propranolol，均为 10、100 和 1,000 μmol/L）对 HepG₂或 Huh7 细胞增殖和迁移的影响。同时，采用实时定量逆转录聚合酶链反应（real-time quantitative reverse transcription，RT-qPCR）检测异丙肾上腺素或普萘洛尔对 HepG₂细胞中 β₂肾上腺素能受体（β₂ adrenergic receptor，ADRB2）mRNA 表达的影响。对皮下荷瘤小鼠进行慢性束缚应激（chronic restraint stress，CRS）后给予 SNP（364 mg/mL）处理，或直接用 SNP（364 mg/mL）处理，通过这两个平行实验验证 SNP 对应激反应的作用。运用 RT-qPCR、酶联免疫吸附测定和免疫组化技术，对与应激相关的蛋白质和激素进行定量分析。通过宏基因组测序，确认 SNP 对荷瘤 CRS 小鼠肠道菌群的影响。

研究结果显示，证实了 SNP 的 12 种活性成分在多种组织和粪便中的分布。网络药理学分析确定了 5 种活性成分的抗 HCC 作用。SNP 潜在的抗 HCC 机制可能涉及表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）、原癌基因酪氨酸蛋白激酶 Src（proto-oncogene tyrosine-protein kinase Src，SRC）和信号转导及转录激活因子 3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）通路。处理 24 小时后，含 SNP 血清在浓度分别为 2.5% 和 5.0% 时，可抑制 HepG₂和 Huh7 细胞的增殖。此外，SNP 抑制了经历 CRS 的荷瘤小鼠的肿瘤进展。SNP 处理主要通过调节肠道菌群，下调了应激相关蛋白和促炎细胞因子的表达。具体而言，在 SNP 处理组中，属于拟杆菌门（Bacteroidetes）的Alistipes和Prevotella的丰度增加，而属于厚壁菌门（Firmicutes）的Lachnospira的丰度降低。

研究结论表明，SNP 可通过调节肠道菌群缓解应激反应，进而对抗 HCC。