胶原-巨噬细胞亚型鉴定：THBS2作为结直肠癌CMS4亚型延伸的免疫治疗新靶点

为解决结直肠癌(CRC)患者免疫治疗响应率低的问题，南京医科大学团队通过整合转录组和单细胞测序数据，鉴定出富含"胶原-巨噬细胞(CM)"的CRC新亚型，发现CAF(癌症相关成纤维细胞)分泌的THBS2(血小板反应蛋白-2)通过招募SPP1+巨噬细胞形成免疫抑制屏障。靶向THBS2联合PD-1治疗显著增强抗肿瘤效果，为CMS4亚型患者提供了精准治疗新策略。

　　

研究背景
结直肠癌作为全球第三大恶性肿瘤，其高度异质性导致患者对PD-1/PD-L1免疫治疗响应差异显著。尽管CMS4亚型已被证实与基质增生和免疫抑制相关，但约30%的非CMS4患者同样对免疫治疗无响应，暗示现有分类体系存在盲区。更棘手的是，传统测序技术丢失了肿瘤边界的关键空间信息——这个区域正是CAF与免疫细胞"密谋"建立免疫逃逸屏障的"犯罪现场"。

研究设计与方法
南京医科大学联合多家医院的研究团队开展多组学整合分析：

1. 整合EMTAB8107和GSE144735等13个样本的单细胞数据(61,698个细胞)，结合TCGA等17个队列的转录组数据；
2. 通过空间转录组技术定位肿瘤边缘的FAP⁺ CAF和SPP1⁺ TAM空间共定位；
3. 构建CM亚型评分系统(CSDGS)，筛选THBS2作为关键靶点；
4. 使用MC38小鼠模型验证THBS2抗体与PD-1的协同治疗效果。

主要研究结果

肿瘤边缘的免疫屏障
单细胞分析揭示：FAP⁺ CAF与SPP1⁺ TAM在肿瘤边缘形成"犯罪联盟"(风险评分最高)，其相互作用通过MIF和SPP1信号增强。空间转录组显示二者共定位程度与患者预后显著相关(R=0.78)。

CM亚型的分子特征
WGCNA鉴定出254个特征基因，将1,337例患者分为CM/非CM亚型。CM患者兼具：

• 基质特征：胶原交联、TGF-β通路激活
• 免疫特征：M2型巨噬细胞浸润、CD8⁺ T细胞耗竭
  值得注意的是，30%的CMS1-3患者被重新归类为CM亚型，解释了其免疫治疗耐药性。

THBS2的双重作用机制
CAF特异性分泌的THBS2被发现是CM亚型的"罪恶枢纽"：

1. 促转移：激活MMP1/7表达，促进EMT和血管生成
2. 促免疫抑制：招募SPP1⁺ TAM，形成PD-1耐药屏障
   小鼠实验中，THBS2敲除使肿瘤体积缩小42%，CD8⁺ T细胞浸润增加3.1倍。

临床转化价值
回顾性分析显示THBS2高表达患者对免疫治疗响应率降低67%。联合阻断THBS2和PD-1可使小鼠肿瘤完全消退率达60%，显著优于单药组。

结论与展望
该研究突破性地将CMS分类从"全肿瘤视角"推进到"空间微环境维度"，首次阐明：

1. CM亚型是CMS4的时空扩展版，涵盖更多免疫治疗耐药人群
2. THBS2作为CAF-TAM轴的"信号卫星"，兼具诊断标志物和治疗靶点价值
3. 空间多组学为肿瘤边界研究提供新范式

遗留问题包括：THBS2调控MMP的具体机制尚未解析，血浆THBS2能否作为无创诊断标志物仍需验证。该成果发表于《BMC Gastroenterology》，为破解结直肠癌免疫治疗困境提供了"空间生物学"新思路。