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为探究犬感染伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi,sensu lato)后免疫反应与临床症状的关系,研究人员开展前瞻性队列研究。结果发现感染与高总 IgG ELISA 滴度及 Th2 免疫反应相关,且不同品种易感性有差异。这为理解犬抗感染机制提供依据。
莱姆病(Lyme disease,LD)是一种由伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi,sensu lato)引起的疾病,通过硬蜱属(Ixodes ricinus)复合体传播。在人类中,莱姆病最早于美国康涅狄格州被描述,其病原体也随之被发现。而犬莱姆病(Canine Lyme Disease,CLD)在临床诊断方面存在诸多挑战。在美国,虽已确定其为临床病症,但在欧洲,明确诊断却很少见。尽管已知狗可自然感染并产生针对伯氏疏螺旋体的抗体,但诊断的不确定性和争议依旧存在。此外,犬感染伯氏疏螺旋体后,临床症状的发生率较低,且血清学检测虽显示高患病率,但难以作为确诊依据。同时,不同犬种对感染的敏感性不同,疾病进程也存在差异,这些问题都亟待解决,这便是开展这项研究的重要原因。
荷兰相关研究人员开展了一项前瞻性队列研究。他们选取了不同年龄组的 84 只狗以及 31 只伯恩山犬(Bernese Mountain Dogs,BMD),对其进行了连续 3.5 年的跟踪监测。在研究期间,详细记录了狗的临床症状、血清学数据,并进行了多种检测。最终得出结论:自然发生的伯氏疏螺旋体感染可导致狗出现发热、跛行等症状,这些症状与高总 IgG 滴度、强烈的 IgG1 反应和近期血清转化密切相关。不同犬种对 CLD 的易感性存在显著差异,如拉布拉多寻回犬(Labrador Retrievers)和伯恩山犬的易感性较高。该研究成果发表在《Current Research in Parasitology》,为深入理解犬对伯氏疏螺旋体感染的抵抗力以及 CLD 的发病机制提供了重要依据,有助于提高对犬莱姆病的诊断和防治水平。
研究人员采用的主要关键技术方法如下:
- 前瞻性队列研究:选取不同年龄组的犬只,包括幼犬、年轻犬、成年犬和老年犬,组成四个年龄队列,进行为期 3.5 年的跟踪研究,期间定期采集血清样本和进行临床检查。
- 血清学检测:运用总 IgG 全细胞 ELISA、IgG1 和 IgG2 ELISA 等方法,检测血清中抗体水平,以分析免疫反应。
- 聚合酶链式反应(PCR):对部分犬只的组织样本进行 PCR 检测,用于检测伯氏疏螺旋体 DNA。
研究结果如下:
- 临床症状:在 84 只被跟踪研究的狗中,19 只被临床诊断为疑似犬莱姆病。共记录到 37 次发热和 59 次跛行事件,这些症状在同半年内同时出现的频率显著高于随机预期,且与伯氏疏螺旋体感染密切相关。
- 血清学:年轻犬在首次蜱虫感染季节大多经历蜱虫侵扰并发生血清转化。总 IgG 和 IgG2 滴度呈正态分布,二者存在中度相关性,反映 Th1 型反应;IgG1 滴度呈对数正态分布,与总 IgG 和 IgG2 滴度无相关性,反映 Th2 驱动的免疫过程。此外,抗体滴度受年龄、累积蜱虫暴露和季节影响。
- 临床症状和血清学关联:通过广义估计方程(GEE)模型分析,发现不同年龄组中,发热和跛行(FLb)或不适 / 发热后跛行(MFLb)与特定免疫指标、季节因素和临床变量相关。例如,年轻犬中,FLb 与 IgG1/IgG2≥0.4 显著相关,MFLb 与 Total-IgG≥8 & IgG1/IgG2≥0.4、高蜱虫侵扰强度和抗生素使用相关。
- 不同犬种及 C6 抗原检测结果:不同犬种的疑似 CLD 发病率差异显著,拉布拉多寻回犬和伯恩山犬发病率较高。伯恩山犬虽有强烈抗体反应,但组织中未检测到伯氏疏螺旋体 DNA,不过出现了与 CLD 相符的炎症变化。
研究结论和讨论部分表明,犬感染伯氏疏螺旋体后的临床和免疫结果受 Th1 和 Th2 反应平衡、IgG1 诱导的时间和幅度以及犬种特异性免疫遗传因素影响。Th2 极化免疫反应在减轻感染和缓解症状中起重要作用。该研究强调了感染、免疫和临床结果之间的复杂相互作用,为犬莱姆病的研究和防治提供了新的视角和理论依据,对提高犬类健康水平具有重要意义。