编辑推荐：
钩端螺旋体病（Leptospirosis）全球分布广泛，诊断困难。研究人员评估重组嵌合体 ErpY-LemA 用于诊断的潜力。结果显示其抗原性强，ELISA 检测不同阶段患者血清灵敏度和特异性高。有望开发快速、低成本诊断测试。
钩端螺旋体病是一种在全球范围内广泛分布的传染病，尤其在热带地区，温暖的气候为钩端螺旋体（Leptospira）的生存创造了有利条件，再加上一些地区容易遭受自然灾害，卫生基础设施不完善，导致发病率居高不下。每年全球有超过一百万例病例，约 60000 人因此失去生命。而且钩端螺旋体的血清型众多，超过 300 种，感染不同血清型以及宿主生理状态的差异，使得人类钩端螺旋体病的临床表现多种多样，病情严重程度也各不相同，从轻微的自限性发热疾病到严重的危及生命的并发症，如肾脏、肝脏和肺功能障碍，甚至可能导致死亡。
目前，显微镜凝集试验（MAT）是诊断钩端螺旋体病的金标准。然而，该方法存在诸多弊端，不仅操作繁琐、劳动强度大，还会对实验室人员构成生物危害风险，而且结果解读存在主观性，容易影响诊断的准确性。在钩端螺旋体病流行地区，由于诊断工具不足和实验室基础设施落后，导致很多病例无法得到及时诊断，使得这种疾病长期被忽视。所以，开发一种快速、高效且准确的诊断方法迫在眉睫。
来自巴西的研究人员开展了一项关于评估重组嵌合体 ErpY-LemA 在人类钩端螺旋体病诊断中应用潜力的研究。研究结果表明，ErpY-LemA 具有很强的应用前景，有望为人类钩端螺旋体病的诊断带来新的突破，该研究成果发表在《Diagnostic Microbiology and Infectious Disease》上。
研究人员主要采用了以下关键技术方法：利用大肠杆菌（Escherichia coli）BL21 (DE3) STAR 宿主菌株表达重组蛋白 rErpY-LemA 嵌合体；使用 80 份先前经 MAT 检测的人类血清样本，通过 ELISA（酶联免疫吸附测定）检测血清中的 IgM 和 IgG，以此评估 rErpY-LemA 的诊断性能 。
研究结果
- rErpY-LemA 嵌合体的表达与抗原性：rErpY-LemA 嵌合体在大肠杆菌异源系统中成功表达，且以可溶性和不溶性两种形式存在，其分子量约为 35kDa。它能够与感染不同钩端螺旋体菌株的仓鼠血清发生反应，证实了其抗原性。而且，该嵌合体可以识别所有测试的血清型（P<0.001），表明它具有非血清型特异性。
- ELISA 检测人类血清的性能：研究人员用 ELISA 检测了 80 份人类血清。在急性期，IgM 检测的灵敏度和特异性均达到 95%（临界值 = 0.15，AUC=0.990；P<0.001）；在恢复期，IgG 检测的灵敏度为 80%，特异性为 100%（临界值 = 0.16，AUC=0.968；P<0.001）。当评估疾病阶段未知的血清时，IgG 和 IgM 的 ELISA 检测均保持了较高的诊断性能，灵敏度和特异性均≥95%，AUC 值高于 0.98。
研究结论与讨论
这项研究表明，ErpY-LemA 嵌合体作为一种抗原，在开发快速、经济有效的人类钩端螺旋体病血清学诊断测试方面极具潜力。它不受疾病阶段和感染血清型的限制，具有较高的灵敏度和特异性。目前现有的诊断方法都存在一定的局限性，如 MAT 的繁琐和危险，PCR（聚合酶链反应）的高成本和对专业技术的要求。而 ErpY-LemA 嵌合体的出现，为解决这些问题提供了新的方向。它有望成为一种更便捷、更可靠的诊断工具，帮助医生更及时、准确地诊断钩端螺旋体病，对于改善患者的治疗效果、降低死亡率具有重要意义，也为全球范围内防控钩端螺旋体病提供了有力的技术支持。
