揭秘 m6A 修饰：为角膜上皮愈合难题解锁新疗法

角膜上皮损伤后愈合延迟会影响视力，目前缺乏有效治疗手段。研究人员探究 m6A 修饰及其调节因子在角膜上皮愈合中的作用，发现沉默 METTL3 和 YTHDF2 可促进愈合，为治疗角膜上皮愈合延迟提供新思路。

　　角膜，作为眼睛前端那层透明的 “窗户”，对视力起着至关重要的作用。角膜上皮就像这扇 “窗户” 的保护膜，一旦受损，如果不能及时愈合，麻烦可就大了。角膜上皮损伤后的延迟愈合，会让角膜基质纤维化，形成不可逆的角膜瘢痕，就像给窗户糊上了一层擦不掉的污渍，严重影响患者的视力。当下，临床常用药物、佩戴角膜接触镜、手术等方法来促进角膜上皮愈合，可对于化学损伤导致的角膜上皮延迟愈合，这些手段却有些 “力不从心”，治疗效果不尽人意。

在这样的困境下，科研人员开启了一场探索之旅。来自南开医院等机构的研究人员，将目光聚焦在神秘的 N⁶- 甲基腺苷（m⁶A）修饰上，试图揭开它在角膜上皮愈合过程中的 “神秘面纱”，为角膜上皮延迟愈合的治疗寻找新方向。

m⁶A 修饰是 RNA 甲基化修饰中最常见的一种，它可不是一个 “独行侠”，而是由甲基转移酶（Writers）、去甲基化酶（Erasers）和甲基化识别酶（Readers）共同调控的动态可逆过程。众多研究表明，m⁶A 修饰在肿瘤细胞、血管内皮细胞等的增殖、迁移和凋亡过程中都扮演着重要角色，但在角膜上皮细胞中，它的作用却还是个 “未知数”。同时，热休克蛋白 70（HSP70）作为细胞内的 “守护者”，在角膜上皮愈合中也有着重要意义，不过 m⁶A 是否参与调控角膜中 HSP70 的表达，同样有待研究。

为了深入探究这些问题，研究人员进行了一系列实验。他们建立了 C57BL/6 小鼠角膜碱烧伤模型作为体内研究对象，以人角膜上皮细胞（HCECs）为体外研究主体。通过小干扰 RNA（siRNA）下调 HCECs 中 YTHDF2、METTL3 和 FTO 的表达，评估在基础条件下以及白细胞介素 - 1β（IL-1β）刺激后，下调 m⁶A 修饰调节因子对 HCECs 增殖、迁移和凋亡的影响。

研究结果令人眼前一亮：在小鼠角膜碱烧伤后，m⁶A 水平升高，而 METTL3、FTO 和 YTHDF2 的表达降低；在 IL-1β 刺激的 HCECs 中，m⁶A 水平显著增加，FTO 和 YTHDF2 的表达下降。沉默 METTL3 和 YTHDF2 能够通过增加 HSP70 的表达，增强 HCECs 的增殖和迁移能力，进而促进角膜上皮愈合；相反，沉默 FTO 可能会通过促进 HCECs 凋亡、抑制其增殖和迁移，阻碍角膜上皮愈合。

从研究方法来看，研究人员主要运用了以下关键技术：一是构建小鼠角膜碱烧伤模型，模拟角膜上皮损伤的体内环境；二是使用小干扰 RNA（siRNA）技术，精准下调相关基因的表达，研究其功能；三是利用体外培养的人角膜上皮细胞（HCECs），在细胞水平进行实验观察。

下面详细看看研究结果：

• 角膜碱烧伤模型：选用 6 - 8 周龄雄性 C57BL/6 小鼠构建角膜碱烧伤模型，遵循严格的动物实验规范。这个模型为后续研究提供了接近真实情况的体内研究场景。
• 轻度角膜碱烧伤的愈合过程：观察发现，受伤 0 小时时，烧伤区域角膜上皮脱落，角膜基质水肿；伤后第 1 天，周围角膜上皮覆盖，但角膜基质水肿加剧，角膜混浊达到峰值；到了伤后第 2 天，受损区域基本被角膜上皮覆盖，不过功能尚未恢复。这让研究人员对角膜碱烧伤后的愈合进程有了清晰的认识。
• m⁶A 修饰及相关因子的变化：通过实验检测发现，在角膜碱烧伤和 IL-1β 刺激的不同条件下，m⁶A 水平以及 METTL3、FTO、YTHDF2 的表达呈现出不同的变化规律，为进一步探究它们在角膜上皮愈合中的作用提供了线索。
• 对 HCECs 细胞行为的影响：沉默 METTL3 和 YTHDF2 促进了 HCECs 的增殖和迁移，沉默 FTO 则起到相反的作用，并且这些变化与 HSP70 的表达密切相关，揭示了 m⁶A 修饰调节因子影响角膜上皮愈合的潜在机制。

综合研究结果，研究人员得出结论：小鼠角膜轻度碱烧伤后，角膜上皮厚度和分层在伤后第 5 天基本恢复正常。m⁶A 修饰参与了角膜上皮的愈合过程，损伤后角膜组织总 RNA 中 m⁶A 修饰增加，可能与 FTO 表达下降有关。m⁶A 修饰在角膜上皮细胞的增殖、迁移和凋亡过程中都发挥着作用。

这项研究意义重大。它首次深入揭示了 m⁶A 修饰及其调节因子在角膜上皮愈合中的重要作用，为治疗角膜上皮延迟愈合提供了全新的理论依据和潜在的治疗靶点。以往对于角膜上皮延迟愈合的治疗手段有限，而此次研究成果就像为这一难题打开了一扇新的大门，让我们看到了新的希望，有望推动相关治疗方法的进一步发展，帮助那些深受角膜上皮损伤困扰的患者重见清晰世界。未来，基于这些发现，或许会有更多针对性的治疗策略被开发出来，为眼科医学的发展注入新的活力。