优化前房注射:助力靶向基因治疗与青光眼模型构建新突破

【字体: 时间:2025年05月09日 来源:Experimental Eye Research 3.0

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  小鼠前房注射因眼小、前房浅易致注射物质渗漏,传统方法弊端多。研究人员开发了新的前房注射技术,用此技术输送 AAV 和注射微珠,结果显示该方法有效、可重复且并发症少,为相关研究提供新途径。

  眼睛,作为人体感知外界的重要器官,其独特的解剖和生理结构就像一座坚固的堡垒,给药物输送带来了重重困难。眼睛存在着诸多屏障,像角膜、巩膜这些静态屏障,以及脉络膜和结膜的血流、淋巴清除、泪液稀释等动态屏障,它们联合起来,阻挡着药物有效渗透和分布,使得治疗眼部疾病的药物很难精准地到达 “战场”。
在众多眼内给药方式中,玻璃体内注射主要针对眼后段疾病,对前段疾病效果不佳。而治疗眼前段疾病常用的方法包括局部滴眼液、全身给药和前房注射(intracameral injection)。其中,前房注射能够直接将治疗药物输送到前房内的靶组织,避开不少生理屏障,应用广泛。例如,用它注射微珠可以建立青光眼模型,输送腺相关病毒(Adeno - Associated Virus,AAV)能进行基因治疗,还能用于输送培养的人角膜内皮细胞治疗内皮功能障碍。

然而,在小鼠身上进行前房注射却困难重重。小鼠眼睛小巧,前房深度浅,传统的前房注射技术通常在角膜缘或角膜中央附近注射,并且需要先注入无菌空气或粘性剂来防止药物渗漏。但这种方法不仅操作难度大,还容易引发诸如反复角膜损伤、眼内压(Intraocular Pressure,IOP)升高等并发症。为了解决这些棘手的问题,山东第一医科大学眼科研究所的研究人员展开了深入研究。

研究人员开发出一种改良的小鼠前房注射技术,该技术以虹膜后面的睫状沟作为切入点,减少了药物渗漏的风险,还避免了注射空气或粘性剂以及角膜穿刺。研究成果意义重大,为小鼠前房注射相关研究提供了更可靠、更有效的方法,推动了靶向基因治疗和青光眼模型构建等领域的发展,该研究发表在《Experimental Eye Research》杂志上。

研究人员为开展此项研究,主要运用了以下关键技术方法:首先是动物实验技术,选用 6 - 8 周龄、体重 20 - 25g 的成年 C57BL/6 小鼠作为实验对象;其次是前房注射技术,通过新开发的技术将物质注入小鼠前房;另外,使用了可视化评估技术,通过向前房注射荧光素钠,依据一系列标准来判断注射是否成功。

评估改良的前房注射


研究人员向前房注射荧光素钠以进行可视化观察。他们将成功注射的标准设定为:一是药物成功输送到前房;二是前房深度显著增加;三是注射入口处无明显渗漏;四是眼部组织,如虹膜、晶状体和视网膜等未受到损伤;五是无前房相关不良情况。通过这些标准来评估新注射技术的有效性和安全性。

讨论


在角膜疾病的治疗中,靶向基因治疗应用越来越多,但目前多数依赖基质内或结膜下注射。在小鼠中,缺乏可靠有效的前房注射方法,尤其是能防止注射材料渗漏到角膜的方法。小鼠前房浅、房水体积小(仅 5.9μL),使得现有方法难以满足需求。此次研究开发的新前房注射技术,为解决这些问题提供了可能,有望推动角膜疾病靶向基因治疗以及青光眼模型构建等方面的研究进展。

这项研究开发的小鼠前房注射改良技术,有效克服了传统方法的诸多弊端,在靶向基因治疗和青光眼模型构建等研究中展现出良好的应用前景。其操作的简便性、结果的有效性和较低的并发症发生率,为后续相关研究奠定了坚实基础。不过,研究也存在一定的局限性,比如新方法在其他品系小鼠或更大动物模型中的适用性还需进一步验证。未来,研究人员可以在此基础上,继续探索该技术在更多场景下的应用,优化技术细节,为眼部疾病的研究和治疗开辟更广阔的道路。

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