编辑推荐:
为解决转基因微生物(GMM)污染发酵产品及溯源难题,研究人员开展宏基因组鸟枪法测序研究。结果发现多产品存在 GMM 污染,且与 AMR 基因相关,还找出相似污染样本。该研究为保障食品安全提供依据,助力监管。
在食品生产的微观世界里,微生物发挥着巨大作用。像奶酪、酸奶这类自然发酵食品,微生物分解天然底物,赋予食物独特风味。而在工业领域,许多食品补充剂和酶是微生物发酵的成果,转基因微生物(GMM)因能提高发酵效率,在其中的应用越来越广泛。但问题也随之而来,GMM 携带的抗微生物耐药(AMR)基因可能传播,威胁公众健康。并且,欧盟规定食品或饲料中不能有 GMM,可实际检测却发现多种食品酶产品存在 GMM 污染,之前的研究虽发现了污染情况,却难以追溯污染来源。于是,为了深入了解微生物发酵产品的污染来源,相关研究人员开展了这项意义重大的研究。
这项研究由国外研究人员进行,最终论文发表在《Food Chemistry: Molecular Sciences》上。研究表明,宏基因组学方法可有效追踪 GMM 污染,发现不同产品中存在相同 GMM 宿主菌株,还找到部分样本污染的共同来源,同时明确了 GMM 污染与 AMR 基因的关联,这对保障食品安全、助力监管部门采取措施至关重要。
研究人员运用了多种关键技术方法:首先是 DNA 提取技术,从食品酶(FE)产品中提取基因组 DNA;其次是 qPCR 技术,检测特定微生物;然后是 DNA 测序技术,包括 Illumina 测序和 ONT 测序获取数据;最后利用宏基因组分析技术,像 Kraken2、StrainGE 等工具对数据进行处理和分析。
研究结果如下:
- qPCR 检测结果:对 16 种商业 FE 产品进行 qPCR 检测,发现所有样本都至少被一种 GMM 菌株或构建体污染,如 GMM protease1、GMM amylase1 和 / 或 GMM amylase2,但未检测到 GMM protease2。不过,qPCR 无法确定污染是否来自同一 GMM。
- 宏基因组学检测 GMM 宿主物种:通过宏基因组学分析,在多个样本中检测到了预期的 GMM 宿主物种,如在 α - 淀粉酶产品中主要是 B. licheniformis(GMM amylase2)和 / 或 B. amyloliquefaciens(GMM amylase1),在蛋白酶产品中主要是 B. velezensis(GMM protease1)。
- GMM 污染与宿主菌株关系:利用 StrainGE 分析发现,不同样本中的 GMM 宿主菌株关系密切,多数样本中同一 GMM 宿主菌株的平均可调用核苷酸同一性(ACNI)至少为 99.96% 。
- SNP - 系统发育基因组分析:基于 SNP 的系统发育基因组分析表明,不同样本中的 GMM 菌株亲缘关系近,不过 GMM amylase2 菌株间的 SNP 距离相对较大。
- 微生物污染概况:研究还发现部分样本存在与生产相关微生物的污染,以及一些与发酵产品无关的微生物污染,甚至发现五个样本可能有共同的污染来源。
- AMR 基因与 GMM 污染的关系:样本中 AMR 基因的存在与 GMM 污染密切相关,GMM 污染是样本中 AMR 基因的主要来源。
研究结论和讨论部分指出,宏基因组学在研究微生物污染方面具有显著优势,可直接从宏基因组数据中追溯 GM 菌株,长读长测序能检测 AMR 基因全长,揭示了 GMM 污染带来的潜在公共健康风险。但目前仍不清楚 AMR 基因转移的可行性,需要更多研究。同时,微生物污染的来源复杂,可能与生产环境等多种因素有关,这也提示生产设施需加强卫生管理。总之,该研究为食品和饲料行业的微生物污染研究提供了重要参考,对保障公众健康和行业规范发展意义非凡。